市公開課動物細胞融合與單克隆抗體彭金剛第5稿

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廣州市鐵一中學(xué)！熒光標(biāo)志的小鼠細胞和人細胞融合實驗示意圖2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體選修3專題2細胞工程執(zhí)教廣州市鐵一中學(xué)彭金剛1.1概念

動物細胞融合也稱細胞雜交。是指_________動物細胞結(jié)合成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為________。一、動物細胞融合兩個或多個雜交細胞1.3融合過程融合的原理？滅活的含義？兩兩融合后可產(chǎn)生幾種雜交細胞？1.2融合手段________(PEG)、________、電激等聚乙二醇滅活的病毒突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。

成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。

其中最有價值的應(yīng)用是制備單克隆抗體。1.4

意義與應(yīng)用《藍貓單克隆抗體及生物導(dǎo)彈》

思考：制備單克隆抗體運用了什么技術(shù)？單克隆抗體的優(yōu)點？抗體由什么細胞產(chǎn)生的？獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么？有何缺陷？二、單克隆抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差問題2問題1抗體由什么細胞產(chǎn)生的？獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么？有何缺陷？二、單克隆抗體如何才能讓B淋巴細胞產(chǎn)生單一大量抗體？產(chǎn)量低、純度低、特異性差→細胞群問題2問題3問題1單克隆抗體一個B淋巴細胞

克隆→抗體什么細胞可以無限增殖？如何才能將兩種細胞的特點結(jié)合起來？1975年，米爾斯坦和柯勒1984年，諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。問題4問題5骨髓瘤細胞模擬單克隆抗體的制備過程每4人一組利用細胞模型，完成模擬制備流程。小組探究活動B淋巴細胞骨髓瘤細胞分泌抗紅細胞抗體的B淋巴細胞分泌抗紅細胞抗體的雜交瘤細胞其他雜交瘤細胞注射羊紅細胞為什么注射羊紅細胞？獲到的B淋巴細胞有哪些類型？細胞兩兩融合后，產(chǎn)生幾種融合細胞？如何把雜交瘤細胞篩選出來？雜交瘤細胞有何特點？如何選出分泌抗紅細胞抗體的細胞群？如何得到大量單克隆抗體？（第二次篩選）如何得到大量雜交瘤細胞？（第一次篩選）二、單克隆抗體的應(yīng)用歡迎兩位學(xué)生為我們分享單克隆抗體的應(yīng)用！單克隆抗體有何特點？特異性強、靈敏度高，可大量制備。（傳統(tǒng)抗體）特異性差、純度低、產(chǎn)量低。課堂小結(jié)動物細胞融合動物細胞A動物細胞B_____細胞

細胞___________法誘導(dǎo)

雜種培養(yǎng)物理化學(xué)生物植物體細胞雜交動物細胞融合理論基礎(chǔ)相同細胞膜的流動性不同植物細胞的______性細胞的_______誘導(dǎo)手段相同物理法(離心振動電激等)化學(xué)法(_______)不同生物法(_________)處理方法不同用纖維素酶

和_______去除細胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或_________處理使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合結(jié)果不同雜種細胞經(jīng)組織培養(yǎng)后獲得_________培養(yǎng)雜交細胞，生產(chǎn)_________相同改變_________，產(chǎn)生新性狀

動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較全能增殖聚乙二醇PEG滅活的病毒果膠酶膠原蛋白酶細胞產(chǎn)品雜種植物遺傳物質(zhì)課堂小結(jié)二單克隆抗體已免疫的B淋巴細胞

______細胞B-B細胞融合_____細胞_____細胞雜交瘤細胞______克隆化培養(yǎng)和_______分泌特定抗體的雜交瘤細胞________或_________大量單克隆抗體