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文檔簡介
東北農(nóng)業(yè)大學(xué)遺傳學(xué)第五章1第二章遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)東北農(nóng)業(yè)大學(xué)遺傳學(xué)第五章2一、DNA是遺傳物質(zhì)的證據(jù)第四節(jié)DNA的結(jié)構(gòu)3基因存在于染色體上(真核生物):
蛋白質(zhì)約占66%脫氧核糖核酸(DNA)
約占27%
核酸核糖核酸(RNA)
約占6%
其它:如擬脂和無機物質(zhì)
少量染色體
四十年代以來,由于微生物遺傳學(xué)的發(fā)展,加上生物化學(xué)、生物物理學(xué)以及許多新技術(shù)不斷引入遺傳學(xué),促成了一個嶄新的領(lǐng)域——分子遺傳學(xué)的誕生和發(fā)展。分子遺傳學(xué)已擁有大量直接和間接的證據(jù),說明DNA是主要的遺傳物質(zhì),而在缺乏DNA的某些病毒中,RNA就是遺傳物質(zhì)。41.DNA作為主要遺傳物質(zhì)的間接證據(jù)51)
含量:
DNA含量恒定。體細胞DNA含量是配子DNA的一倍;
多倍體DNA含量倍增,但細胞內(nèi)蛋白質(zhì)含量不恒定。2)代謝:
利用放射性與非放射性元素進行標(biāo)記,發(fā)現(xiàn):
DNA分子代謝較穩(wěn)定;
其它分子一邊形成、同時又一邊分解。3)突變:
紫外線誘發(fā)突變時,最有效波長均為2600埃;
與DNA所吸收的紫外線光譜一致;
證明基因突變與DNA分子的變異密切聯(lián)系。64)分布:
①DNA是所有生物染色體所共有:
噬菌體、病毒、植物、人類等。②而蛋白質(zhì)則不同:
噬菌體、病毒、細菌的蛋白質(zhì)一般不存在于染色體上,而真核生物染色體中有核蛋白組成。E.coli72.DNA作為主要遺傳物質(zhì)
的直接證據(jù)81)肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗:────────────────────────肺炎雙球菌特征抗原型(穩(wěn)定)────────────────────────粗糙型(R)
無莢膜、粗糙菌落、無毒
I
R、II
R光滑型(S)
有莢膜、光滑菌落、有毒
I
S、II
S、III
S────────────────────────9a.格里費斯(GriffithF.,1928):肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化試驗。
①
無毒II
R型
小鼠成活
無細菌
②
有毒III
S型
小鼠死亡
重現(xiàn)III
S型
③
有毒III
S型(65℃殺死)
小鼠成活
無細菌
④
無毒II
R型
&有毒III
S型(65℃殺死)
小鼠
死亡
重現(xiàn)III
S型結(jié)論:
在加熱殺死的III
S型
肺炎雙球菌中有較耐高
溫的轉(zhuǎn)化物質(zhì)能夠進入
II
R型
IIR型轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>
III
S型
無毒轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>
有毒。10b.阿委瑞(AveryO.T.,1944)試驗:
用生物化學(xué)方法證明這種活性物質(zhì)是DNA。
正實驗:三個
負實驗:三個結(jié)論:
遺傳物質(zhì)DNA是轉(zhuǎn)化因子。112)噬菌體感染實驗:
a.赫爾希(Hershey
A.)等用同位素32P和35S驗證DNA是遺傳物質(zhì)。原理:
P存在于DNA,而不存于蛋白質(zhì);S
存在
于蛋白質(zhì),不存于DNA。
①.32P標(biāo)記T2噬菌體;
②.35S標(biāo)記T2噬菌體。結(jié)論:
進入菌內(nèi)的是DNA;
DNA進入細胞內(nèi)才能產(chǎn)生
完整的噬菌體。12b.煙草花葉病毒的感染和繁殖:
煙草花葉病毒簡稱TMV(TobaccoMosaic
Virus)。
TMV的蛋白質(zhì)外殼和單螺旋RNA接種:
TMV蛋白質(zhì)煙草不發(fā)??;
TMVRNA煙草發(fā)病新的TMV;
TMVRNA
&
RNA酶煙草不發(fā)病。13佛蘭科爾-康拉特-辛格爾(Framkel-Conrat-Singer)試驗:結(jié)論:提供RNA的親本決定了其后代的RNA和蛋白質(zhì)。
在不含DNA的TMV中,RNA就是遺傳物質(zhì)。14
二、核酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)151)核酸:
以核苷酸為單元構(gòu)成的多聚體,是一種高分子化合物。五碳糖:脫氧核糖、核糖核苷酸磷酸鳥嘌呤、腺嘌呤
環(huán)狀的含氮堿基胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶1.兩種核酸及其分布:1617DNA脫氧核糖核酸RNA核糖核酸五碳糖:脫氧核糖堿基:A、T、C、G五碳糖:核糖堿基:A、U、C、G18DNA四種脫氧核苷酸DNA分子19高等植物:DNA存在于染色體,葉綠體、線粒體中;
RNA在核(核仁、染色體)、細胞質(zhì)中。細菌:DNA和RNA。噬菌體:多數(shù)只有DNA。植物病毒:多數(shù)只有RNA。動物病毒:有些含RNA、有些含DNA。2)分布:201)
DNA雙螺旋結(jié)構(gòu):
1953年,沃森(WatsonJ.D.)和克里克(CrickF.H.C.)提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。主要依據(jù)為:堿基互補配對的規(guī)律以及DNA分子的X射線衍射結(jié)果。沃森和克里克與維爾金斯(Wilkins)一起獲得諾貝爾獎
(1962)。2.DNA的分子結(jié)構(gòu):21電子顯微鏡下的人類DNA22特點:①兩條互補多核酸鏈、在同一軸上互相盤旋;②雙鏈具有反向平行的特點;
③堿基配對原則為:A=T、G=C,雙螺旋直徑約20A,
螺距為34A(10個堿基對)。。。23④
A-T、G-C排列方法有
以下四種:
A-T或
G-C或C-G或
T-A
設(shè)某一段DNA分子鏈有1000對堿基,則有41000種不同
排列組合,就可能有41000種
不同性質(zhì)的基因。
24⑤物種:不同物種中的DNA的堿基含量不同:
a.
DNA分子上的堿基順序是一致的,一般保持不變才能保持該物種的遺傳特性的穩(wěn)定;b.在特殊條件下,堿基順序改變,出現(xiàn)遺傳變異。252)DNA構(gòu)型:B-DNA:生理狀態(tài)下,每螺圈10.4個堿基對,右手螺旋;A-DNA:高鹽濃度下,每螺圈11個堿基對,右手螺旋;Z-DNA:序列富含GC,嘌呤和嘧啶交替出現(xiàn),
每螺圈12個堿基對,左手螺旋。263.RNA分子結(jié)構(gòu):與DNA的區(qū)別
①
U代替T;②
核糖代替脫氧核糖;③
一般以單鏈存在。27第五節(jié)RNA的分子結(jié)構(gòu)
28一、三種RNA分子信使RNA(mRNA)轉(zhuǎn)運RNA(tRNA)核糖體RNA(rRNA)29mRNA:含量少,代謝快,傳遞遺傳信息真核生物mRNA特點:5’帽子,3’polyA302.tRNA:①
分子量為25000~30000;②
70~100個核苷酸組成;③
稀有堿基,如假尿嘧啶等。315’末端具有G(大部分)或C;3‘末端都以ACC結(jié)尾;一個富有鳥嘌呤的環(huán);一個反密碼子環(huán);一個胸腺嘧啶環(huán);tRNA結(jié)構(gòu):323.rRNA細胞中含量最多,約占82%。單獨存在時并不執(zhí)行功能,與多種蛋白質(zhì)組成核糖體,作為合成蛋白質(zhì)的裝配機。33原核生物rRNA(3種):
5S:120個核苷酸;
16S:1540個核苷酸;
23S:2900個核苷酸。真核生物rRNA(4種):
5S:
120個核苷酸;
5.8S:160個核苷酸;
18S:1900個核苷酸;
28S:4700個核苷酸。
rRNA與核糖體的組裝:34(四)其他的RNA小核RNA(smallnuclearRNA,snRNA);siRNA
(SmallinterferingRNA);MicroRNAs(miRNAs)。35第六節(jié)DNA的復(fù)制36半保留復(fù)制:瓦特森(WatsonJ.D.)等提出的DNA半保留復(fù)制方式。其方法為:
①.一端沿氫鍵逐漸斷開;②.以單鏈為模板,堿基互補;③.氫鍵結(jié)合,聚合酶等連接;④.形成新的互補鏈;⑤.形成了兩個新DNA分子。
DNA的這種復(fù)制方式對保持生物遺傳的穩(wěn)定性是非常重要的。一、DNA復(fù)制的一般特點:37二、復(fù)制起點和復(fù)制方向:1.原核生物﹡絕大多數(shù)細菌和病毒:只有一個復(fù)制起點,控制整個染色體的復(fù)制,且為雙向復(fù)制。﹡噬菌體P2:其DNA的復(fù)制是沿一個方向進行的。﹡復(fù)制子:在同一個復(fù)制起點控制下的一段DNA序列。382.
真核生物﹡每條染色體的DNA復(fù)制都是多起點,多個復(fù)制起點共同
控制整個染色體的復(fù)制;﹡每條染色體有多個復(fù)制子;﹡且為雙向復(fù)制;39DNA復(fù)制過程1.DNA雙螺旋的解鏈*DNA解旋酶在ATP供能下,每分鐘旋轉(zhuǎn)3000次解開雙螺旋;*單鏈DNA結(jié)合蛋白馬上結(jié)合在分開的單鏈上,以避免產(chǎn)生單鏈內(nèi)配對;*DNA拓撲異構(gòu)酶來解決由于復(fù)制叉的推進而產(chǎn)生超螺旋的問題。
三、原核生物DNA合成:402.DNA合成的開始
合成DNA片段之前,先由RNA聚合酶合成一小段RNA引物(約有20個堿基對)DNA聚合酶才開始起作用合成DNA片段。413.后隨鏈的不連續(xù)復(fù)制∵DNA聚合酶,以5′
3′方向發(fā)揮作用;
∴從3′
5′合成方向的一條鏈,就會遇
到困難??级鞑?KornbergA.,1967)提出不連續(xù)復(fù)制假說:
在3′5′方向鏈上,仍按從5′
3′
的方向一段段地合成DNA單鏈小片段“岡崎
片段”(100
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