天然藥毒物分析課件

天然藥毒物天然藥毒物的中毒原因原因多方面、形式多樣化投毒：味苦，多混于中藥、茶等味較重的液體中。誤食：多為小孩誤飲：多為藥酒用藥不當：偏方、處理不當、過量等。長期吸毒或吸毒過量天然藥毒物中毒特點多成分、結(jié)構(gòu)復雜；有些將成分提取出來制成的藥物制劑或毒品，成分可比較單純。多具有較強的藥理作用，有許多是常用中草藥。毒性差異大，毒理作用也不同，多有特殊的中毒癥狀和病理改變。作為中草藥的品種區(qū)域性較強，有些名稱較亂，存在一種多名和同名異物的情況。天然藥毒物檢驗方法方法形態(tài)學動物試驗理化法化學反應(yīng)光譜法色譜法免疫法聯(lián)用法形態(tài)學檢驗——外觀性狀鑒別通過感觀對天然藥毒物的外觀性狀進行鑒別形狀：根、莖、葉、花、果實、種子等大?。捍笮　㈤L短、粗細等顏色：表面和內(nèi)部的色澤表面特征：光滑還是粗糙，皺褶、槽溝、皮孔、毛茸等質(zhì)地：軟硬、脆韌、輕重、粘性、粉性等折斷面：平整－粗糙、致密－疏松、斷面紋路及顏色。氣味形態(tài)學檢驗方法——顯微形態(tài)鑒別利用顯微鏡觀察藥毒物的組織結(jié)構(gòu)、細胞種類和形態(tài)以及細胞后含物的種類及形態(tài)等，通過與已知物核對進行鑒定。細胞種類包括纖維細胞、石細胞、柵欄細胞、薄壁細胞等）。后含物包括如淀粉粒、菊糖、草酸鈣結(jié)晶、鐘乳體、油珠等。常用封片試劑及作用（1）常用試劑作用水或稀甘油觀察細胞及其后含物的形態(tài)和全貌。水合氯醛使收縮的細胞膨脹，溶解淀粉、蛋白－甘油質(zhì)、葉綠素、樹脂等，起凈化和透化作用，便于某些特征形態(tài)的觀察。乙醚－乙醇可溶解除去脂肪油、揮發(fā)油、樹脂、鞣質(zhì)等，便于后含物的鑒別。間苯三酚試劑使木化的石細胞、纖維、導管等細胞壁顯紅色。常用封片試劑及作用（2）常用試劑作用氯化鋅碘試劑使纖維細胞顯紅色。碘試劑使淀粉顯藍色。蘇丹Ⅲ試劑使油滴顯桔紅色。1∶1硫酸試劑使各種草酸鈣結(jié)晶變成針狀硫酸鈣結(jié)晶。醋酸試劑使碳酸鈣晶體（鐘乳體）溶解，并釋放出二氧化碳。鹽酸使草酸鈣和碳酸鈣均溶解，并釋放出二氧化碳。動物毒理學試驗大多毒性大，且具有較強的生理活性和特殊的中毒癥狀。體外檢材充裕、新鮮時，可用動物作急性毒性試驗或毒效試驗，以預試是否有劇毒或有某類毒物存在。常用顏色反應(yīng)和沉淀反應(yīng)試劑顏色反應(yīng)和沉淀反應(yīng)的選擇性和實用性選擇性一種試劑通?？膳c多種生物堿發(fā)生反應(yīng)。一種生物堿一般不可能與所有試劑發(fā)生反應(yīng)。許多含氮化合物（堿性藥物、蛋白質(zhì)等）可能發(fā)生類似的反應(yīng)。適用性

預試：選幾種非特異的試劑檢驗，在有足夠覆蓋面和靈敏度的情況下，結(jié)果均為陰性時，基本可排除生物堿：結(jié)果為陽性時，不能作為肯定生物堿存在的依據(jù)，需用其它方法確證。

鑒別：預試結(jié)果為陽性時，可選擇專一性較強的特殊結(jié)晶反應(yīng)或顏色反應(yīng)鑒別。光譜法和色譜法光譜法毒性成分大多結(jié)構(gòu)復雜，一般都具有紫外吸收，有些甚至有熒光。體外純品藥物制劑或較純的毒品可直接用光譜法檢驗。中草藥、植物、摻假毒品、體內(nèi)檢材，因成分復雜，一般需與色譜聯(lián)用。色譜法和色－質(zhì)聯(lián)用因具分離能力，靈敏度較高，是天然藥毒物常用的分析手段。色－質(zhì)聯(lián)用是目前最有效的手段。烏頭生物堿的結(jié)構(gòu)母體結(jié)構(gòu)為由19個碳構(gòu)成的烏頭胺。毒性大的一般是在C8和C14位上的醇基與有機酸形成的雙酯型生物堿。C8接的為乙酸，C14多接苯甲酸，少數(shù)為大茴香酸。注：LD50為小鼠按mg/kg（干燥根）i.v.給藥。烏頭的外觀形態(tài)大致可分為兩類紡錘形或圓錐形，中部多向一側(cè)膨大，有的稍有彎曲，如川烏（烏頭根）、草烏（北烏頭根）。長圓錐形或長圓柱形，直徑較小，質(zhì)堅較脆，如雪上一支蒿。個別品種由數(shù)個根呈鏈狀連生，如多根烏頭。烏頭的顯微形態(tài)烏頭生物堿的性質(zhì)和檢材處理不溶于水、石油醚，溶于醇、乙醚、氯仿等有機溶劑。堿性，可與酸成鹽。酯鍵極易水解，酸、堿、加熱均可加速水解。一般在氨堿性條件下用有機溶劑提取。不宜用Stta-Otto法提取分離。HPLC-MS檢測烏頭生物堿及其代謝產(chǎn)物無需復雜的衍生化處理可同時檢測各種烏頭生物堿及其代謝產(chǎn)物，包括烏頭胺。不必每次用標準品對照。二、馬錢子（番木鱉）來源：馬錢科植物馬錢或云南馬錢的干燥成熟種子。成分：士的寧（strychnine,番木鱉堿）和馬錢子堿（brucine,布魯生）。藥用：中醫(yī)用于治療風濕頑痹、麻木癱瘓、跌打損傷等。硝酸士的寧注射液西醫(yī)臨床用作脊髓中樞興奮劑。毒性：劇毒，治療量與中毒量接近。硝酸士的寧治療1～3毫克，中毒5～10毫克，致死30毫克。馬錢子堿毒性僅為士的寧的1/8～1/3。馬錢子生品屬劇毒中草藥管制品種。馬錢子的顯微形態(tài)表皮為單細胞毛，細胞分化向一側(cè)斜伸，基部膨大，似石細胞，壁極厚，強烈木化，有縱向扭曲紋孔，，毛體有數(shù)條脊狀增厚，胞腔斷面類圓形；種皮內(nèi)層為頹廢的棕色薄壁細胞；內(nèi)胚乳細胞呈多角形、長多角形或類圓形，壁厚，隱約可見胞間連絲（碘液可使之明顯），細胞中含有脂肪、油滴和糊粉粒。士的寧和馬錢子堿的結(jié)構(gòu)士的寧和馬錢子堿的性質(zhì)及檢材處理無色或白色晶體；難溶于水，溶于乙醇、氯仿；士的寧幾乎不溶于乙醚，馬錢子堿溶于乙醚；堿性，可與酸成鹽；硝酸士的寧和硫酸馬錢子堿溶于水、乙醇、氯仿；性質(zhì)穩(wěn)定一般堿性條件下，有機溶劑提取；揮干殘渣或乙醚液里，用酸水液反提凈化；Stas-Otto法可適用于腐敗檢材。士的寧和馬錢子堿的化學反應(yīng)

反應(yīng)方法及結(jié)果適用釩酸銨－硫酸士的寧藍紫紅橙預試馬錢子堿紅棕士的寧硫酸液＋重鉻酸鉀晶體重鉻酸鉀－硫酸紫堇色線狀條紋放置紫紅較特殊橙黃色H2O

變黃馬錢子堿氧化深紅

氯化亞錫紫區(qū)別士的寧硝酸士的寧淡黃蒸干和馬錢子堿殘渣氨氣紫紅士的寧和馬錢子堿的紫外光譜二者光譜不同，可以區(qū)別。酸水液中，士的寧最大吸收為254nm。酸水液中，馬錢子堿最大吸收為265nm和300nm.馬錢子的青蛙毒性試驗機理：脊髓中樞興奮癥狀：間歇性、強直性四肢肌肉痙攣，蛙體及后腿僵直，前肢合抱，外界稍有聲或光刺激，立即再次引起全身強直痙攣。三、顛茄生物堿

來自茄科幾個屬的植物，是由莨菪烷衍生的氨基醇類與有機酸形成的酯類生物堿，又稱莨菪生物堿（tropanealkaloids).

主要幾種生物堿又名莨菪堿(hyoscyamin)天仙子胺，其外消旋體稱阿托品（atropine）東莨菪堿(scopalamine)天仙子堿山莨菪堿(anisodamine)654–2樟柳堿(anisodine)含顛茄生物堿的藥物常用西藥：硫酸阿托品及東莨菪堿、山莨菪堿和樟柳堿的氫溴酸鹽。抗膽堿藥。有抑制腺體分泌、松弛平滑肌、加速心率、擴大瞳孔、解痙止痛等作用，阿托品常用于有機磷農(nóng)藥中毒搶救。含顛茄生物堿藥毒物的檢驗方法形態(tài)學方法化學反應(yīng)UV各種色譜動物試驗體外中草藥檢材中生物堿的鑒別擴瞳試驗洋金花的形態(tài)洋金花粉末的顯微形態(tài)天仙子和南天仙子的形態(tài)天仙子：茄科莨菪屬（莨菪）或賽莨菪屬（三分三）植物的干燥種子。南天仙子：爵床科植物水蓑衣的種子、顛茄生物堿的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)水中難溶，易溶于醇、氯仿、乙醚等；堿性，可與酸成鹽，易溶于水；堿性或酸性條件下，酯鍵易水解，受熱加速。一般在弱堿性條件下，有機溶劑提取。提取時應(yīng)注意避免水解。顛茄生物堿的化學反應(yīng)反應(yīng)原理和結(jié)果適用硝化反應(yīng)莨菪酸結(jié)構(gòu)中的苯硝化成三硝基顛茄生物堿(Vitali反應(yīng))衍生物，后者在堿性條件下分子預試重排成醌式結(jié)構(gòu)顯紫色。阿托品的堿性可使氧化汞分解成氯化汞反應(yīng)黃色氧化汞，加熱變紅。東莨菪可區(qū)別阿堿堿性較弱，只能與氯化汞生成托品與東白色復鹽。莨菪堿樟柳堿的鄰二羥基結(jié)構(gòu)可被過碘可區(qū)別樟氧化縮合反應(yīng)酸氧化成甲醛，后者在醋酸銨中柳堿和其可與乙酰丙酮縮合而顯黃色。他堿碘－碘化鉀稀硫酸中，阿托品可形成似飛鳥阿托品確結(jié)晶反應(yīng)狀的結(jié)晶。證顛茄生物堿的紫外吸收吸收主要來自結(jié)構(gòu)中含苯環(huán)的莨菪酸部分，呈“山”字形苯環(huán)B帶吸收。各種顛茄生物堿吸收光譜相似。乙醇中阿托品最大吸收為252nm，257nm和263nm.可用于現(xiàn)場藥劑、安剖、注射器等體外檢材的預試和篩查。色譜法檢驗顛茄生物堿堿性較強，薄層展開劑中常加入少量堿抑制斑點拖尾；HPLC一般采用反相離子對色譜法，在流動相中加入十二烷基磺酸鈉（SDS）等離子對試劑，酸性條件下，十二烷基磺酸根離子與帶正電荷的生物堿形成離子對，可使結(jié)構(gòu)相似的幾種顛茄生物堿得到較好分離。

貓眼擴瞳試驗機理：阿托品和東莨菪堿具有強擴瞳作用，利用貓作試驗，觀察貓眼瞳孔變化。山莨菪堿和樟柳堿的擴瞳作用較弱。古柯堿有類似生理作用。四、斑蝥來源：是芫青科昆蟲，南方大斑蝥或黃黑小斑蝥的干燥蟲體。主要成分：斑蝥素(cantharidin)藥用：治療腰腿痛、風濕痛、疥癬、惡瘡等，現(xiàn)有用來治療腫瘤的。毒性：大毒。生品屬國家規(guī)定的劇毒中草藥管制品種。斑蝥的檢驗方法形態(tài)學方法理化方法GC、GC/MS斑蝥蟲斑蝥素斑蝥形態(tài)綠芫青（青娘子）：與斑蝥同科不同屬，有些也含斑蝥素。紅娘子：蟬科。早年文獻認為含斑蝥素，80年代有研究認為不含斑蝥素。青娘子和紅娘子也屬于劇毒中草藥管制品種。斑蝥素的理化性質(zhì)和檢材處理無色結(jié)晶，熔點218℃，120℃開始升華；不溶于水，難溶于石油醚，微溶于熱水、乙醇、乙醚，較易溶于丙酮、氯仿；斑蝥素是斑蝥酸的內(nèi)酸酐，遇堿可開環(huán)成鹽而溶于水，遇酸立即閉環(huán)?？衫蒙A和開環(huán)性質(zhì)進行分離凈化。斑蝥素的理化檢驗方法結(jié)果對二甲基苯甲醛反應(yīng)紫紅或櫻紅色其他一些酚類、吲