微生物及無(wú)菌知識(shí)培訓(xùn)六步洗手法及進(jìn)入潔凈車間的程序

微生物及無(wú)菌知識(shí)培訓(xùn)六步洗手法及進(jìn)入潔凈車間的程序第一頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日

生物）。事實(shí)說(shuō)明，微生物有特別頑強(qiáng)的生存、繁殖和變異能力來(lái)適應(yīng)環(huán)境。

微生物種類繁多，有的對(duì)人有益，有的有害，有的無(wú)益也無(wú)害。但在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，不可能對(duì)環(huán)境中的各種微生物加以區(qū)別對(duì)待，為保證藥品的安全有效，需要對(duì)其進(jìn)行控制?？諝庵械奈⑸锒鄶?shù)附著在灰塵上，或以芽孢形式懸浮于空氣中，1μm以下者處于懸浮狀態(tài)，10μm以上者會(huì)逐漸沉下來(lái)而形成菌塵。所以也要對(duì)塵粒進(jìn)行控制。

大量臨床資料表明，注射劑（尤其是靜脈注射劑）如污染了7~12μm的塵粒，可導(dǎo)致熱原反應(yīng)、肺動(dòng)脈炎、微血栓或異物肉芽腫等，嚴(yán)重的還會(huì)致人死命。而如果污染了細(xì)菌，輕則局部紅腫化膿，重則引起全身細(xì)菌性感第二頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日染。因此，對(duì)微生物和塵粒進(jìn)行更加嚴(yán)格的控制對(duì)于針劑生產(chǎn)潔凈室非常重要。

人是潔凈室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分鐘向周圍排放1000個(gè)以上的含菌粒子，女性為750個(gè)以上。穿無(wú)菌服時(shí)，靜止時(shí)的發(fā)菌量為10~300個(gè)/min，一般活動(dòng)時(shí)發(fā)菌量為150~1000個(gè)/min，行走時(shí)發(fā)菌量為900~2500個(gè)/min?？人砸淮伟l(fā)菌量為70~700個(gè)/min，噴嚏一次為4000~60000個(gè)/min。所以在潔凈室中，人的數(shù)量和活動(dòng)應(yīng)有特別嚴(yán)格的限制。

二．微生物簡(jiǎn)介

第三頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日微生物是廣泛存在于自然界的一群體形微小（直徑小于1mm）、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼看不見(jiàn)，必須藉助光學(xué)或電子顯微鏡放大數(shù)百至數(shù)萬(wàn)倍才能觀察到的生物。需要說(shuō)明的是，微生物是一個(gè)比較籠統(tǒng)的概念，界線有時(shí)非常模糊。如單細(xì)胞藻類和一些原生動(dòng)物也應(yīng)算是微生物，但通常它們并不放在微生物中進(jìn)行研究。

微生物具有以下特點(diǎn)：①體積小，面積大；②吸收多，轉(zhuǎn)化快（2000倍體重/h）；③生長(zhǎng)旺，繁殖快（20min分裂一次）；④易變異，適應(yīng)強(qiáng)；⑤分布廣，種類多（10萬(wàn)種以上）。

微生物按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性等差異可分成三大類：

1．真核細(xì)胞型細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體；胞質(zhì)內(nèi)有完整的細(xì)胞第四頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日器（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體及線粒體等）。真菌屬于此類型微生物。

2．原核細(xì)胞型細(xì)胞核分化程度低，僅有原始核質(zhì)，沒(méi)有核膜與核仁；細(xì)胞器不很完善。這類微生物種類眾多，有細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌。

3．非細(xì)胞型沒(méi)有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，亦無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。體積微小，能通過(guò)除菌濾器。病毒屬于此類型微生物。

微生物在自然界中的分布極為廣泛，空氣、土壤、江河、湖泊、海洋等都有數(shù)量不等、種類不一的微生物存在。在人類、動(dòng)物和植物的體表及其與外界相通的腔道中也有多種微生物存在。

第五頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日絕大多數(shù)微生物對(duì)人類和動(dòng)、植物的生存是有益而必需的。自然界中氮、碳、硫等多種元素循環(huán)靠微生物的代謝活動(dòng)來(lái)進(jìn)行。例如空氣中的大量氮?dú)庵挥幸揽课⑸锏淖饔貌拍鼙恢参镂眨寥乐械奈⑸锬軐?dòng)、植物蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)含氮化合物，以供植物生長(zhǎng)的需要，而植物又為人類和動(dòng)物所利用。因此，沒(méi)有微生物，植物就不能新陳代謝，而人類和動(dòng)物也將無(wú)法生存。

另一方面，由極少數(shù)微生物引起的傳染病發(fā)病快、死亡率高、傳播迅速、傳播范圍廣，嚴(yán)重危害著人民健康。

三．微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)

第六頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日1．細(xì)菌（原核單細(xì)胞生物）

細(xì)菌按形狀可分為：球菌（0.5~2μm）、桿菌（長(zhǎng)1~5μm，寬0.3~1μm）和螺形菌（大小與桿菌相似）。

按革蘭氏染色法染色的不同，分為革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁表面含較多的磷壁酸，會(huì)產(chǎn)生外毒素，如金黃色葡萄球菌；革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁表面多含脂蛋白和脂多糖，會(huì)產(chǎn)生內(nèi)毒素（即熱原），如大腸桿菌。

細(xì)菌一般有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核，有的還有莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞等特殊結(jié)構(gòu)。

細(xì)菌一般為無(wú)性繁殖，以二分法繁殖，幾十分鐘或1~2小時(shí)分裂一次。

第七頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日資料：關(guān)于芽孢

在溫度逐漸降低或營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)，芽胞桿菌屬（如炭疽桿菌）及梭狀芽胞桿菌屬（如破傷風(fēng)桿菌）能在菌體內(nèi)形成一個(gè)折光性很強(qiáng)的不易著色小體，稱為芽胞。芽胞是處于休眠狀態(tài)的細(xì)菌，并非細(xì)菌的繁殖體，當(dāng)環(huán)境適宜時(shí)，可恢復(fù)生長(zhǎng)繁殖。

芽胞在自然界分布廣泛，要注意防止污染。芽胞的抵抗力強(qiáng)，對(duì)熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力，用一般的方法不易將其殺死。有的芽胞可耐100℃沸水煮沸數(shù)小時(shí)。殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。當(dāng)進(jìn)行消毒滅菌時(shí)往往以芽胞是否被殺死作為判斷滅菌效果的指標(biāo)。

2．霉菌（絲狀真菌的通稱，真核多細(xì)胞生物）

第八頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日霉菌是真菌的一部分。在培養(yǎng)基上長(zhǎng)成絨毛狀或棉絮狀的菌絲體的真菌統(tǒng)稱為霉菌。

霉菌細(xì)胞呈狹長(zhǎng)的管狀，稱為菌絲。菌絲直徑比細(xì)菌、放線菌大，約2~10μm。菌絲分枝連接，交錯(cuò)集合在一起的總體稱為菌絲體。

霉菌大多數(shù)是多細(xì)胞微生物，菌絲細(xì)胞由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和各種細(xì)胞器組成。細(xì)胞壁很薄，往往在表面產(chǎn)生色素，使菌落出現(xiàn)各種顏色。

霉菌靠孢子繁殖，有無(wú)性繁殖和有性繁殖兩種方式，以無(wú)性繁殖為主。

有些真菌可用釀酒造醬，或用于發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸、葡萄糖酸、酶、抗生素（如青霉素、頭孢菌素）；少數(shù)真菌能引起各種真菌病。真菌產(chǎn)生的真菌毒素（如黃曲霉素）有毒。

第九頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日3．酵母菌（真核單細(xì)胞生物，屬真菌）

酵母菌以單細(xì)胞存在，呈圓形、卵圓形和香腸形，比細(xì)菌大，細(xì)胞長(zhǎng)5~30μm，寬1~5μm。細(xì)胞結(jié)構(gòu)有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和各種細(xì)胞器等。

酵母菌的增殖分無(wú)性繁殖和有性繁殖兩個(gè)階段，有三種方式：芽殖、裂殖、孢子生殖。

酵母菌是重要的工業(yè)微生物，用于釀酒，生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白、B族維生素、核酸、輔酶A、細(xì)胞色素C等。一般對(duì)人體無(wú)害。

4．放線菌（原核單細(xì)胞生物）

放線菌有生長(zhǎng)發(fā)育良好的菌絲體，呈分枝狀，菌絲寬為0.2~1.2μm，革蘭氏陽(yáng)性。其內(nèi)部構(gòu)造與細(xì)菌相似，無(wú)完整的細(xì)胞核。菌落常呈幅射狀，因此稱放線菌。

第十頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日繁殖方式為無(wú)性孢子繁殖。最適pH6.7~7.5，溫度25~30℃。

放線菌可用于生產(chǎn)抗生素、維生素和酶類，少數(shù)可引起人畜放線菌病。

5．病毒

病毒是一類體積十分微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，只含一種核酸（DNA或RNA），沒(méi)有產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型微生物。病毒在自然界分布非常廣泛，在所有其它生物中都有病毒寄居。病毒是最常見(jiàn)的致病微生物，人類傳染病中大約75%是由病毒引起的。

病毒體主要由核酸和蛋白質(zhì)組成。病毒體積微小，最大直徑300nm（如牛痘病毒），最小直徑20nm（如口蹄疫病毒），絕大多數(shù)在第十一頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日150nm以下，能通過(guò)細(xì)菌濾器，用普通光學(xué)顯微鏡看不見(jiàn)，必須用電子顯微鏡放大數(shù)千至數(shù)萬(wàn)倍才能看見(jiàn)。形態(tài)多呈球形，少數(shù)為桿狀或磚形。噬菌體（細(xì)菌病毒）有呈蝌蚪狀的。

朊病毒于1982年發(fā)現(xiàn)，它很特殊，與一般病毒不同，是一種異常蛋白質(zhì)，不含有核酸。與瘋牛病（牛海綿狀腦?。┘叭丝搜攀喜￡P(guān)系密切。其復(fù)制方式不明。

四．微生物的營(yíng)養(yǎng)

1．水分：水占細(xì)胞漿的70%～90%，是細(xì)胞的重要組成成分。較普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為：只有第十二頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日在含水的環(huán)境中微生物才能存活。但也有人發(fā)現(xiàn)在無(wú)水碳?xì)浠衔镏形⑸锟砷L(zhǎng)期存活。

2．碳源：碳源是構(gòu)成細(xì)胞的重要物質(zhì)。有些微生物的碳源必須來(lái)自有機(jī)碳化合物如糖、蛋白質(zhì)、脂肪、有機(jī)酸等（同時(shí)利用其化學(xué)能），屬異養(yǎng)型；有些微生物不需有機(jī)碳化合物，以CO2為碳源，屬自養(yǎng)型（分為光能自養(yǎng)型和化能自養(yǎng)型）。

3．氮源：氮是組成蛋白質(zhì)和核酸的重要元素。

4．無(wú)機(jī)鹽類：細(xì)菌所需無(wú)機(jī)鹽包括磷、硫、鎂、鐵、鉀、鈉、鈣、氯、錳、鋅、鈷、銅等。其中磷、硫、鎂、鉀、鈉、鐵需要量較多，其他只需微量。

5．生長(zhǎng)因子：生長(zhǎng)因子是某些微生物生長(zhǎng)發(fā)第十三頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日育所必需，而其自身又不能合成的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。包括維生素、嘌呤和嘧啶等。五．微生物生長(zhǎng)的影響因素

1．營(yíng)養(yǎng)物

2．pH值：各種微生物都有其最適宜的pH值，大多數(shù)細(xì)菌最適pH為6.8~7.4，但一般有較大的容忍度，在4~9也可存活和生長(zhǎng)，少數(shù)細(xì)菌能在極端pH值范圍內(nèi)生長(zhǎng)。真菌適于pH值3~6的微酸性環(huán)境，但在2~10也可生長(zhǎng)。

3．溫度：微生物適于生長(zhǎng)繁殖要有適宜的溫度，當(dāng)超過(guò)其最低或最高可耐受的溫度時(shí)，即停止生長(zhǎng)或死亡。一般細(xì)菌最適溫度為第十四頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日30~40℃，真菌為20~30℃。

4．氧氣：大多數(shù)細(xì)菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)），少數(shù)細(xì)菌是厭氧菌（在無(wú)氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)），有些細(xì)菌和酵母菌是兼性需氧厭氧的，在有氧或無(wú)氧環(huán)境中都能生長(zhǎng)繁殖。

5．滲透壓：微生物細(xì)胞膜和所有生物膜一樣是一種半透膜，可讓水自由通過(guò)，對(duì)溶質(zhì)則有選擇性。由于細(xì)胞壁的保護(hù)，微生物能存活在低滲透壓的水中。而在高滲溶液（如高濃度的鹽溶液或糖溶液、40%甘油）中，細(xì)胞會(huì)脫水并停止生長(zhǎng)繁殖。但也有一些專性耐高鹽細(xì)菌只有在高鹽（10~15%）條件下才生長(zhǎng)。

6．表面張力：表面活性劑可降低表面張力第十五頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日它是影響細(xì)菌生長(zhǎng)的因素之一。很多革蘭氏陰性菌，特別是大腸菌群可很好地在表面活性劑包圍的介質(zhì)中生長(zhǎng)，而大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌在表面張力低時(shí)（0.05N/m）不能很好生長(zhǎng)。陽(yáng)離子表面活性劑對(duì)很多有機(jī)體有毒性，陰離子表面活性劑毒性很小，非離子表面活性劑幾乎沒(méi)有毒性，并可成為某些微生物的營(yíng)養(yǎng)物。

六．消毒與滅菌

消毒與滅菌是微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)中最基本的操作，從事藥品生產(chǎn)和檢驗(yàn)的人員都應(yīng)當(dāng)了解消毒與滅菌的方法及其意義，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，否則會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量，危害患者安全。

1．概念

第十六頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日1．概念

無(wú)菌——不存在活的生物（GMP指南）。

“無(wú)菌”從定義上來(lái)說(shuō)是一個(gè)絕對(duì)的概念，但遺憾的是，在科學(xué)和技術(shù)高度發(fā)展的今天，藥品的絕對(duì)無(wú)菌即做不到，也無(wú)法加以證實(shí)。然而，無(wú)菌制劑的安全性要求人們?cè)O(shè)定無(wú)菌的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。

FDA、歐洲制藥工業(yè)界曾將百萬(wàn)分之一微生物污染率作為滅菌產(chǎn)品“無(wú)菌”的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)，它和蒸汽滅菌后產(chǎn)品中微生物存活的概率為10-6（即產(chǎn)品的無(wú)菌保證值為6），系同一標(biāo)準(zhǔn)的不同表示法。這一標(biāo)準(zhǔn)于1980起收錄于USPXX中，如今已為世界各國(guó)普遍接受和采用。

滅菌——使達(dá)到無(wú)菌狀態(tài)的方法（GMP指南第十七頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日南）。用物理或化學(xué)方法殺滅傳播媒介上所有的微生物，使其達(dá)到無(wú)菌（GB）。通常是指殺滅或除去全部活的微生物（包括繁殖體和芽孢）。

消毒——用物理或化學(xué)方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達(dá)到無(wú)害化（GB）。通常是指殺死病原微生物的繁殖體，但不能破壞其芽孢。所以消毒是不徹底的，不能代替滅菌。

無(wú)菌制劑——不存在活的微生物的制劑（GMP指南）。

非無(wú)菌制劑——所含活的微生物量符合衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)的制劑（GMP指南）。

2．常用消毒劑

消毒劑

常用量

用途

第十八頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日乙醇

①70%~75%水溶液

②0.5%洗必泰溶于70%乙醇，再加入2%甘油

用于皮膚、器具等消毒

供洗手用消毒

異丙醇

75%水溶液

用于皮膚、器具等消毒

甲醛

37%~40%甲醛液8~9ml，再加入4~5g高錳酸鉀

每m3熏蒸量，密閉12~24h。刺激性強(qiáng)

戊二醛

2%水溶液

用于空氣、器具等消毒。廣譜、高效、低毒，可殺芽孢和病毒。刺激性較輕。

新潔爾滅（苯扎溴銨）

0.1%水溶液

用于皮膚、粘膜、器具等消毒，有清潔和消毒雙重功效?？咕V較窄。

第十九頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日杜滅芬（消毒寧）

0.05%~0.1%水溶液

用于皮膚、器具等消毒

過(guò)氧乙酸

①0.2%~0.5%水溶液

②新配0.5%水溶液

③1g/m3

用于器具等消毒抗菌譜廣，可

用于皮膚消毒殺滅某些病毒

熏蒸但性質(zhì)不穩(wěn)定

乳酸

①0.33~1mol/L

②1~1.5ml/m3熏蒸或與等量苯酚合用熏蒸

噴霧，用于空氣消毒，有強(qiáng)殺菌作用

熏蒸，密閉12h以上

麝香草酚

5%麝香草酚溶于50%乙醇

噴灑墻面、地面，殺霉菌

第二十頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日3．常用滅菌法

1）干熱滅菌法常見(jiàn)的有火焰、燒灼、干烤和紅外線滅菌等。

①火焰、燒灼：通常用于實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作中金屬或其它耐火材料制成的器具的滅菌。

②干烤和紅外線：利用干熱空氣或熱輻射進(jìn)行滅菌。一般135~145℃需3~5h，160~170℃需2h以上，170~180℃需1h以上，180~200℃需0.5~1h。除熱原則需250℃30min，或200℃45min，180℃2h。

空氣傳熱慢，穿透力不強(qiáng)，故干熱滅菌時(shí)間長(zhǎng)。干熱滅菌時(shí)烤箱內(nèi)裝入物品應(yīng)留有空隙，以利空氣流動(dòng)，否則使箱內(nèi)溫度不均，部分物品滅菌不徹底。

第二十一頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日2）濕熱滅菌法通過(guò)熱蒸汽或沸水使蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透力強(qiáng)，滅菌效果較干熱好。

①煮沸或流通蒸汽滅菌：常壓下沸水和蒸汽的溫度是100℃，一般處理30~60min可殺死細(xì)菌繁殖體，但不能完全殺滅芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。

②低溫間隙滅菌（巴斯德滅菌法）：將物品先用60~80℃加熱（或煮沸）1h，然后置20~25℃保存24h（或常溫過(guò)夜），使其中殘存的芽孢萌發(fā)成繁殖體，再用以上條件滅菌，如此反復(fù)三次。本法適用于不耐高溫或高溫下易變質(zhì)的物品，但很費(fèi)時(shí)。

③高壓蒸汽滅菌（熱壓滅菌法）：超過(guò)一個(gè)大氣壓時(shí)，水的沸點(diǎn)高于100℃，反之亦然。第二十二頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日高壓蒸汽滅菌就是通過(guò)加壓提高蒸汽溫度，滅菌效果最好。它簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可靠、無(wú)毒，是最可靠、應(yīng)用最廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。常用條件為：

115.5℃

30min

121.5℃

20min

126.5℃

15min

注意事項(xiàng)：

a.必須完全排出滅菌器內(nèi)的空氣。否則會(huì)影響滅菌器內(nèi)溫度達(dá)到規(guī)定的要求。

b.注意被滅菌物品的溫度。滅菌器內(nèi)溫度與被滅菌物品的溫度一般是一致的，但在蒸汽輸入過(guò)快時(shí)，后者可能低于前者，所以升溫時(shí)要有一定的預(yù)熱時(shí)間。另外，降溫過(guò)快易引起玻璃炸裂。因此，對(duì)于一種滅菌產(chǎn)品，第二十三頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日應(yīng)制定一固定的滅菌曲線（象凍干曲線一樣）。

c.定期檢查滅菌器內(nèi)溫度的準(zhǔn)確性。

3）化學(xué)滅菌法利用化學(xué)試劑形成的氣體來(lái)殺滅微生物的方法。常用的滅菌劑為環(huán)氧乙烷（又稱氧化乙烯）。環(huán)氧乙烷是廣譜殺菌劑，能殺滅細(xì)菌、芽孢和多種病毒，還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環(huán)氧乙烷易燃易爆且有毒（有致變異性），用于藥品方面極有限，多用于醫(yī)療器械、塑料制品等滅菌。（不能用于橡膠和乳膠手套，能將其溶解。）

4）濾過(guò)除菌法利用細(xì)菌不能通過(guò)致密具孔濾材的原理，除去對(duì)熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體物質(zhì)中的細(xì)菌的方法。過(guò)濾法一般只能除菌，不能除去支原體和病毒。

第二十四頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日過(guò)濾除菌的效果與濾膜的性能、孔徑的大小、密度、濾膜的厚度等因素有關(guān)。

濾過(guò)除菌法要求最終過(guò)濾的濾膜孔徑為0.22μm。由于各廠家生產(chǎn)的相同規(guī)格的濾膜質(zhì)量并不一致，為了保證除菌效果，在使用前后應(yīng)檢查濾器的完好性（如壓力維持試驗(yàn)或起泡點(diǎn)試驗(yàn)）。

一個(gè)過(guò)濾器的使用時(shí)間應(yīng)根據(jù)品種驗(yàn)證后確定，一般不應(yīng)超過(guò)8小時(shí)。

5）輻射滅菌法輻射有兩種類型：一種是電磁波輻射，如紫外線、紅外線、微波；一種是電離輻射，如可引起被照射物電離的X射線、γ射線。

①紫外線：紫外光波長(zhǎng)在136~390nm之間，其中260nm左右能破壞核酸，殺菌作用最強(qiáng)。第二十五頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日另外，空氣中的氧受紫外線照射后，可微量轉(zhuǎn)變?yōu)槌粞豕餐饸⒕饔谩Ｗ贤饩€消毒的效果與光源的功率、光源與被照射物的距離、照射時(shí)間、溫度和濕度等因素有關(guān)。我國(guó)規(guī)定紫外燈照射強(qiáng)度在距離1m處不低于70μW/cm2（以紫外線測(cè)強(qiáng)儀測(cè)定）。在操作面上要求強(qiáng)度達(dá)40μW/cm2以上。一般每10m2裝30W燈管1支，工作前開30~60min。

紫外燈的輸出功率隨使用時(shí)間增加而降低。國(guó)產(chǎn)紫外燈的平均壽命（點(diǎn)到70%額定功率的時(shí)間）一般為2000h，超過(guò)平均壽命時(shí)，就達(dá)不到預(yù)期效果，必須更換。

紫外線的穿透力很弱，不能穿透一般包裝材料，如玻璃、塑料薄膜、紙等。玻璃能強(qiáng)烈吸收小于350nm的紫外線，石英玻璃能吸收第二十六頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日小于200nm的紫外線。因此，它主要用于空氣和物體表面消毒，特制的紫外燈裝置也可用于水的消毒。

紫外線對(duì)眼、皮膚有損壞，照射過(guò)程中產(chǎn)生的臭氧對(duì)眼、鼻腔有刺激，臭氧過(guò)多時(shí)使人頭暈、胸悶、血壓下降。

②紅外線：通過(guò)加熱碳化硅板產(chǎn)生的輻射熱能，由空氣傳導(dǎo)加熱滅菌。如紅外線烤箱，溫度可達(dá)180℃左右。熱效應(yīng)特點(diǎn)是由表及里。

③微波：微波滅菌主要是因其熱效應(yīng)。微波加熱升溫快，溫度高且均勻，殺菌作用強(qiáng)。熱效應(yīng)特點(diǎn)是由里及表。不同性質(zhì)的物品吸收微波的能力不同，其熱效應(yīng)和消毒效果也不同。

第二十七頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日微波有一定穿透力，但不強(qiáng)。微波對(duì)人體有害，要注意防護(hù)。

④60Co滅菌：放射性同位素60Co（或137Cs）衰變時(shí)可放射出γ射線，γ射線的能量高、穿透力強(qiáng)，可使細(xì)胞內(nèi)各種活性物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化，從而使細(xì)菌損傷或死亡。

經(jīng)60Co輻射滅菌的物品溫度升高很少，一般僅約5℃，故又稱“冷滅菌”。

60Co輻射存在兩個(gè)方面的安全問(wèn)題：一是輻射的直接作用。γ射線對(duì)人體細(xì)胞同樣有害；二是經(jīng)過(guò)輻射的食品、藥品的安全性。1984年美國(guó)農(nóng)業(yè)部食品安全實(shí)驗(yàn)室用輻射處理的雞肉喂飼小鼠，發(fā)現(xiàn)患**腫瘤增加，包括加重癌病損害。因此60Co輻射用于食品和藥品都應(yīng)經(jīng)過(guò)安全試驗(yàn)，進(jìn)行科學(xué)的、全面的評(píng)第二十八頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日價(jià)，高劑量的輻射藥品更應(yīng)慎重。

美國(guó)藥典（？版）規(guī)定25kGy為有效滅菌劑量。1997年我國(guó)衛(wèi)生部頒發(fā)了60Co中藥滅菌標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)限國(guó)內(nèi)流通中藥可用60Co輻照滅菌，規(guī)定了允許輻照的藥材和中成藥的品種和劑量。

中藥輻照最大吸收劑量標(biāo)準(zhǔn)：

散劑

3kGy

片劑

3kGy

丸劑

5kGy

中藥原料粉

6kGy附錄：

1．藥品生產(chǎn)潔凈室（區(qū)）的空氣潔凈度等級(jí)（GMP1998）

潔凈度級(jí)別

塵粒最大允許數(shù)（個(gè)/m3）

微生物最大允許數(shù)

0.5μm

5μm

浮游菌（個(gè)/m3）

沉降菌（個(gè)/皿）

100級(jí)

3,500

0

5

1

10,000級(jí)

350,000

2,000

100

3

第二十九頁(yè)，共四十一頁(yè)，2022年，8月28日100,000級(jí)

3,500,000

20,000

500

10

300,000級(jí)

10,500,000

60,000

－

15

注：①我國(guó)GMP1998附錄規(guī)定：“潔凈室（區(qū)）在靜態(tài)條件下檢測(cè)的塵埃粒子數(shù)、浮游菌數(shù)或沉降菌必須符合規(guī)定，應(yīng)定期監(jiān)控動(dòng)態(tài)條件下的潔凈狀況。”因此，潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度的測(cè)定要求為靜態(tài)測(cè)試，動(dòng)態(tài)監(jiān)控。對(duì)塵粒和微生物中的兩項(xiàng)測(cè)定指標(biāo)，至少各測(cè)一項(xiàng)。

②空氣潔凈度為100級(jí)的潔凈室，室內(nèi)大于等于5μm塵粒的計(jì)數(shù)，應(yīng)進(jìn)行多次采樣，當(dāng)某一測(cè)試值多次出現(xiàn)時(shí)，該值方可認(rèn)可。

③測(cè)試按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》。

2．水和一些物料的衛(wèi)生學(xué)（法定）標(biāo)準(zhǔn)：

飲用水

某些輔料#

二部片劑

二部膠囊劑%

XX霜*

細(xì)菌總數(shù)

100/ml

1000/g

1000/g

1000/g

100/g

霉菌、酵母菌數(shù)

100/g

100/g

100/g

10/g

大腸桿菌

3/100ml

－

－

－

NC

沙門氏菌

NC

NC

NC

NC

銅綠假單胞菌

NC

NC

NC

－

金黃色葡萄球菌

NC