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文檔簡介
微生物學微生物培養(yǎng)基的配制滅菌第一頁,共二十二頁,2022年,8月28日課堂紀律嚴格遵守實驗室規(guī)章制度嚴肅課堂紀律不允許無故曠課、早退遲到工作服第二頁,共二十二頁,2022年,8月28日進入微生物實驗室的注意事項1.進入實驗室必須穿白大褂2.實驗室內(nèi)不準吃東西3.在實驗室內(nèi)不要趴在桌子上4.實驗完成后值日生留下做好清潔工作(值日工作實行組長負責制,納入實驗成績)5.離開實驗室前洗手6.實驗現(xiàn)象要隔天觀察的實驗,必須要按時到實驗室記錄實驗現(xiàn)象第三頁,共二十二頁,2022年,8月28日實驗安排實驗一微生物培養(yǎng)基的配制和滅菌實驗二微生物的純培養(yǎng)技術實驗三顯微鏡油鏡的使用及細胞形態(tài)的觀察實驗四環(huán)境因素對微生物的影響實驗五放線菌、霉菌及酵母菌的形態(tài)觀察實驗六水的細菌學檢查,土壤微生物的分離實驗七微生物生理生化反應觀察試驗八微生物遺傳實驗試驗九藥物的體外抗菌實驗及口服藥物的細菌檢查實驗十操作考試第四頁,共二十二頁,2022年,8月28日實驗報告要求一個實驗,一份實驗報告,有連續(xù)性的實驗等到做完后再寫實驗報告。實驗報告內(nèi)容:
1.實驗項目名稱
2.實驗目的
3.實驗原理
4.實驗步驟
5.實驗結果與分析(即使實驗失敗也要寫好分析)
6.思考題第五頁,共二十二頁,2022年,8月28日實驗微生物培養(yǎng)基的配制和滅菌及純培養(yǎng)第六頁,共二十二頁,2022年,8月28日一、微生物培養(yǎng)基的配制和滅菌目的要求實驗材料實驗程序第七頁,共二十二頁,2022年,8月28日1、目的了解培養(yǎng)基的配制原理和方法,掌握其配制過程。了解幾種滅菌方法,掌握干熱滅菌法和加壓蒸汽滅菌法的原理及其使用方法。第八頁,共二十二頁,2022年,8月28日2、材料和器皿主要藥品:牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、營養(yǎng)瓊脂等。儀器:高壓蒸汽滅菌器、恒溫干熱滅菌箱、紫外線殺菌燈。其它:天平、藥匙、電爐、1mol/LHCl、1mol/LNaOH、pH試紙、三角燒瓶、量筒、玻棒、試管、培養(yǎng)皿、吸管、牛皮紙、紗繩、硅膠塞、標簽等。第九頁,共二十二頁,2022年,8月28日3、方法和步驟培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基和玻璃器材的滅菌方法第十頁,共二十二頁,2022年,8月28日培養(yǎng)基的概念及種類培養(yǎng)基的配方、配制步驟(1)培養(yǎng)基的配制第十一頁,共二十二頁,2022年,8月28日培養(yǎng)基是指由人工配制的、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合營養(yǎng)料。培養(yǎng)基的介紹碳源、氮源、無機鹽、能源、生長因子、水營養(yǎng)物質的濃度要適宜營養(yǎng)物質之間的配比要適宜培養(yǎng)基的pH值、滲透壓、水活度和氧化還原電勢等物理化學條件要適宜。第十二頁,共二十二頁,2022年,8月28日細菌:pH7.0~8.0放線菌:pH7.5~8.5酵母菌:pH3.8~6.0霉菌:pH4.0~5.8藻類:pH6.0~7.0原生動物:pH6.0~8.0初始pH通常培養(yǎng)條件:第十三頁,共二十二頁,2022年,8月28日培養(yǎng)基的種類按照培養(yǎng)基的物理狀態(tài)可分為1.液體培養(yǎng)基:不加凝固劑的液體狀態(tài)培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入2%左右的凝固劑的固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。3.半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入0.2—0.5%凝固劑而成的半固體狀培養(yǎng)基。第十四頁,共二十二頁,2022年,8月28日
瓊脂是最優(yōu)良的凝固劑,自1880年代開始用于配制微生物培養(yǎng)基以來,至今經(jīng)久不衰。第十五頁,共二十二頁,2022年,8月28日實驗室的常用培養(yǎng)基:細菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;放線菌:高氏1號合成培養(yǎng)基培養(yǎng);酵母菌:麥芽汁培養(yǎng)基;霉菌:查氏合成培養(yǎng)基;第十六頁,共二十二頁,2022年,8月28日培養(yǎng)基的配制配方、配料加熱溶解調(diào)pH(略)過濾(略)分裝(倒平板不分裝)滅菌包扎(試管放在燒杯)擺斜面、倒平板貯存第十七頁,共二十二頁,2022年,8月28日牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配制1、液體培養(yǎng)基2、固體培養(yǎng)基3、半固體培養(yǎng)基第十八頁,共二十二頁,2022年,8月28日牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方(P.64):牛肉膏0.3g蛋白胨1g氯化鈉0.5g瓊脂1.5g
水100mLpH7.2~7.4滅菌121℃,20min牛肉膏蛋白胨半固體培養(yǎng)基配方:
瓊脂0.3g牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基配方:
瓊脂0g第十九頁,共二十二頁,2022年,8月28日牛肉膏蛋白胨
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