毒理學安全性評價程序課件

第十一章

毒理學安全性評價程序

一、化學品管理過程中毒理學家的作用①參與法律、法規(guī)制定，提供技術支持、咨詢②對現有化學物提出優(yōu)先管理的化學品，并為制訂安全限值提供理論依據③對化學品分類、分級、標簽管理提供技術支持、咨詢④對新產品進行安全性評價，參與評審⑤環(huán)境污染物健康危險度評價⑥化學事故的應急救援

危險度

又稱危險性，指在特定條件下，因接觸某種水平的化學毒物而造成機體損傷、引起疾病甚至導致死亡的預期概率。

可接受的危險度

可接受的危險度系指公眾和社會在精神、心理等各方面均能承受的危險度。（一）基本概念危險度評價目的是確定可接受的危險度，為政府管理部門正確做出衛(wèi)生和環(huán)保決策、制定相應的衛(wèi)生標準提供科學依據，從而最大限度的保護廣大人民群眾的身體健康。

1、危害性認定

危害性認定是危險度評價的第一階段，為定性評價階段。目的是：

確定待評化學毒物在一定條件下與機體接觸后，能否產生損害效應；效應的性質和特點如何；化學毒物與損害效應之間有無因果關系。

2、劑量—反應關系評價

劑量—反應關系評價為定量危險度評價，其目的是：在認定待評化學毒物具有危害性的基礎上，依據人群流行病學調查資料和毒理學研究結果，闡明不同劑量水平的待評化學毒物與接觸群體中出現的最為敏感的關鍵性有害效應發(fā)生率之間的定量關系，確定合適的劑量—反應曲線，并獲得特定接觸劑量下評價人群危險度的基準值。

人群接觸劑量的估測不僅應考慮到經由不同途徑吸收時吸收率的影響，還要注意一種化學毒物經由多種途徑進入機體的可能性。另外，接觸劑量與靶器官劑量并非總是平行，而只有后者才能引起損害效應，故估測接觸劑量時應結合健康效應進行。

接觸評定涉及環(huán)境有害物質與接觸人群兩方面的研究。對于環(huán)境有害物質，要弄清其來源、在環(huán)境中存在的總量及在不同介質(空氣、水體、土壤和食物)中的分布、轉運、轉化的情況和

消長規(guī)律。對于接觸人群，不僅要掌握人數、構成、范圍等資料，尤其要注意抽樣的代表性問題。否則會帶來很大的不確定性。如對接觸機會較多(如生產工人)或較為敏感的某些亞群

(如老弱病殘者)需區(qū)別對待，分別進行評價。

4．危險度特征分析

是危險度評價的最后總結階段。通過對前三個階段的評定結果

進行綜合、分析、判斷、測算待評化學毒物在接觸人群中引起危害概率(即危險度)的估計

值，并以文件的形式闡明該物質可能引起的公眾健康問題，為政府管理機構決策提供科學依據。

1.外來化合物的安全性

外來化合物的安全性是指一種化合物在規(guī)定的使用方式和用量條件下，對人體健康不致產生任何損害，即不引起急性、慢性中毒，亦不致對接觸者（包括老、弱、病、幼和孕婦）及其后代產生潛在危害。

（一）概念2.每日容許攝人量(ADl)每日容許攝人量是指容許正常成人每日由外界環(huán)境攝人體內某種化學物質的總量。也即是人類終生每日攝人該化學物質，對人體健康不引起任何已知不良效應的劑量，通常以mg／kg體重表示。

3.最高容許濃度(MAC)

我國規(guī)定的車間空氣中有害物質MAC是指車間內工人工作地點空氣中某種化學物質不應超過的限值。在該濃度下長期從事生產勞動，不致引起急、慢性職業(yè)危害。

(二)我國現行的毒理學安全性評價程序：第一階段包括急性毒性試驗和局部毒性試驗；第二階段包括蓄積試驗、遺傳毒性試驗和致畸試驗；第三階段包括亞慢性毒性試驗、生殖試驗和代謝試驗；第四階段包括慢性毒性試驗和致癌試驗。

（三）安全性毒理學評價程序的原則對一種外來化合物進行毒性試驗時，通常采取分階段進行的原則。①、通常在化學物質投產之前或登記、銷售之前，必須進行第一、二階段的試驗。②、凡屬我國首創(chuàng)、產量較大、使用面廣、接觸機會較多、或化學結構提示有慢性毒性和／或致癌作用可能者，必須進行第四階段的試驗。

③、對于有一定毒性資料的仿制品，如生產單位能證明其產品的化學結構、理化性質、純度、雜質成分及含量均與國外原產品相似，并經一項急性毒性試驗和一項致突變試驗核對，結果與國外產品的毒性資料或文獻資料一致，一般不再繼續(xù)進行實驗，可參考國外有關資料或規(guī)定作出評價

。如產品質量或毒理學試驗結果與國外產品或資料不同，必須完成第一、二階段的試驗。

四、食品安全性毒理學評價程序（一）受試物的要求①、提供受試物(必要時包括雜質)的物理、化學性質(包括化學結構、純度、穩(wěn)定性等)。

②、受試物必須是符合既定的生產工藝和配方的規(guī)格化產品，其純度應與實際應用的相同，在需要檢測高純度受試物及其可能存在的雜質的毒性或進行特殊試驗時可選用純品，或以純品及雜質分別進行毒性檢測。

急性毒性試驗結果判定

如LD50劑量小于人的可能攝入量的10倍，則放棄該受試物用于食品，不再繼續(xù)其他毒理學試驗。如大于10倍者，可進入下一階段毒理學試驗。凡LD50在人的可能攝入量的10倍左右時，應進行重復試驗，或用另一種方法進行驗證。

第二階段：遺傳毒性試驗，傳統致畸試驗，短期喂養(yǎng)試驗。1.遺傳毒性試驗遺傳毒性試驗的組合必須考慮原核細胞和真核細胞、生殖細胞與體細胞、體內和體外試驗相結合的原則。目的：對受試物的遺傳毒性以及是否具有潛在致癌作用進行篩選。2.常用遺傳毒性試驗①細菌致突變試驗：鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗(Ames試驗)為首選項目，必要時可另選和加選其他試驗。

②小鼠骨髓微核率測定或骨髓細胞染色體畸變分析。

③小鼠精子畸形分析和睪丸染色體畸變分析。④其他備選遺傳毒性試驗：

V79/HGPRT基因突變試驗、顯性致死試驗、果蠅伴性隱性致死試驗，程序外DNA修復合成(UDS)試驗。

遺傳毒性試驗結果進行判斷。

①如其中三項試驗為陽性，則表示該受試物很可能具有遺傳毒性作用和致癌作用，一般應放棄該受試物應用于食品；毋需進行其他項目的毒理學試驗。②如其中兩項試驗為陽性，而且短期喂養(yǎng)試驗顯示該受試物具有顯著的毒性作用，一般應放棄該受試物用于食品；如短期喂養(yǎng)試驗顯示有可疑的毒性作用，則經初步評價后，根據受試物的重要性和可能攝入量等，綜合權衡利弊再作出決定。③如其中一項試驗為陽性，則在被選試驗中選擇兩項遺傳毒性試驗。如再選的兩項試驗均為陽性，則無論短期喂養(yǎng)試驗和傳統致畸試驗是否顯示有毒性與致畸作用，均應放棄該受試物用于食品；如有一項為陽性，而在短期喂養(yǎng)試驗和傳統致畸試驗中未見有明顯毒性與致畸作用，則可進入第三階段毒性試驗。

④如四項試驗均為陰性，則可進入第三階段毒性試驗。

3.傳統致畸試驗目的：了解受試物對胎仔是否具有致畸作用。4.短期喂養(yǎng)試驗：30d喂養(yǎng)試驗。目的：通過30d喂養(yǎng)試驗，進一步了解其毒性作用，并可初步估計最大無作用劑量。短期喂養(yǎng)試驗結果判定

在只要求進行兩階段毒性試驗時，若短期喂養(yǎng)試驗未發(fā)現有明顯毒性作用，綜合其他各項試驗即可作出初步評價；若試驗中發(fā)現有明顯毒性作用，尤其是有劑量－反應關系時，則考慮進行進一步的毒性試驗。

第三階段：亞慢性毒性試驗

90d喂養(yǎng)試驗繁殖試驗代謝試驗。90d喂養(yǎng)試驗目的：觀察受試物以不同劑量水平經較長期喂養(yǎng)后對動物的毒性作用性質和靶器官，并初步確定最大無作用劑量；繁殖試驗目的：了解受試物對動物繁殖及對仔代的致畸作用，為慢性毒性和致癌試驗的劑量選擇提供依據。代謝試驗目的：了解受試物在體內的吸收、分布和排泄速度以及蓄積性，尋找可能的靶器官；為選擇慢性毒性試驗的合適動物種系提供依據；了解有無毒性代謝產物的形成。

根據90d喂養(yǎng)試驗、傳統致畸試驗、繁殖試驗三項試驗中所采用的最敏感指標所得的最大無作用劑量進行評價，原則是：①、最大無作用劑量小于或等于人的可能攝入量的100倍者表示毒性較強，應放棄該受試物用于食品。②、最大無作用劑量大于100倍而小于300倍者，應進行慢性毒性試驗。

③、大于或等于300倍者則不必進行慢性毒性試驗，可進行安全性評價。

第四階段：慢性毒性試驗(包括致癌試驗)

目的：了解經長期接觸受試物后出現的毒性作用，尤其是進行性或不可逆的毒性作用以及致癌作用；最后確定最大無作