臨床微生物標本采集課件

臨床微生物標本采集、

轉運與處理

——微生物標本規(guī)范化采集的重要性

正確采集、處理與運送細菌培養(yǎng)的標本直接關系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽性率的高低，是臨床細菌檢驗成功的關鍵。標本質量的好壞直接影響診斷結果的正誤，不當的標本可導致假陰性、假陽性結果的出現，因此標本采集與處理的規(guī)范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎。好的微生物檢驗標本可提升實驗室工作效率及病患照顧質量，降低醫(yī)療成本。

臨床標本的分類

帶菌體液無菌體液痰液血液咽拭子腦脊液尿液關節(jié)腔積液糞便胸腹水、膽汁其他類別其他類別發(fā)熱（≥38℃）或（低溫≤36℃）寒戰(zhàn)白細胞增多（特別有“核左移”未成熟的或桿狀核白細胞）皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血壓降低、CRP升高及呼吸快特殊患者（如血液?。┏霈F粒細胞減少（成熟的多形核白細胞＜1000×109/L）、血小板減少等，或同時具備上述幾種體征的臨床可疑菌血癥應采集血培養(yǎng)新生兒菌血癥，進行血培養(yǎng)同時應增加尿液和腦脊液培養(yǎng)對入院危重感染患者在未進行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應及時采集血培養(yǎng)

采血量：血液中細菌和真菌的檢出率依賴于足夠的血量，但并非越多越好，超過一定數量的采血量會稀釋培養(yǎng)基內的肉湯，使肉湯無法有效中和血中的抑制物質（補體、抗體、抗生素）。血量與培養(yǎng)液的比例以

1：10為宜，但對已接受抗菌藥物長達10天以上的患者，采血量與培養(yǎng)基的比例應為1：20或大于1：20為宜。成人10~15ml兒童3~5ml嬰幼兒1~2ml骨髓1~2ml采集要點：

1.每一對血培養(yǎng)應當從身體的不同部位采集2.用來培養(yǎng)的血應當是靜脈血而不是動脈血3.盡量避免從靜脈導管中抽血4.皮膚和瓶子的消毒非常關鍵采集時機：

應在病人發(fā)病初期或發(fā)熱高峰到來之前采集。一般情況下應盡量選擇在使用抗菌藥之前進行，在24h內采集2-3份血培養(yǎng)（一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應視為單份血培養(yǎng)）。如患者已經應用抗菌藥物進行治療，應在下一次用藥之前采血培養(yǎng)。采血套數

檢測靈敏度上呼吸道標本采集的臨床指征

上呼吸道標本懷疑上呼吸道感染時如發(fā)熱、咽部疼痛等，尤其是懷疑化膿性鏈球菌感染或念珠菌感染時進行咽拭子培養(yǎng)。標本采集

口腔標本鼻標本咽喉標本鼻咽標本采集指南1.用棉簽清除口腔病灶表面的分泌物、碎屑，扔掉2.用第二根拭子采取病灶的標本，避免碰到其它組織1.用經鹽水濕潤的拭子插入鼻孔約2cm2.將拭子貼著鼻黏膜轉動1.用一壓舌板壓住舌2.用無菌拭子在后咽部、扁桃體及發(fā)炎部位采集標本1.將一藻酸鈣拭子經鼻腔輕輕插入鼻咽喉部2.緩慢轉動拭子5秒鐘吸收分泌物3.取出拭子并床邊接種或將拭子放入運送培養(yǎng)基下呼吸道（痰培養(yǎng)）標本

采集的臨床指征

咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常見的癥狀?？┭ㄅ菽?、鮮血和痰中帶血等呼吸困難，呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛發(fā)熱伴WBC增高尤其是中性粒細胞或CRP明顯增高胸部影像學檢查提示感染可能標本采集

痰（咳出的）痰（誘導的）支氣管標本采集指南1.在護士指導下取標本2.先用清水清洗或漱口3.深咳痰以獲得深部痰，放入無菌痰杯中4.不能取鼻后液1.先刷洗牙齦和舌2.再用清水漱口3.用霧化器使患者吸入約25ml3-10％的無菌鹽水4.采集誘導的痰液放入無菌痰杯1.由臨床醫(yī)生操作采集2.抽吸物或洗出物放入痰采集容器中3.將刷取物放入裝有鹽水的無菌容器中標本質量

合格標本的判斷標準外觀：觀察顏色、粘度、有無血絲或膿。若標本為水狀且很明顯是唾液，則應拒收。為了判定是否來自下呼吸道的痰，需檢查是否為合格的痰標本：WBC>25個/低倍視野，鱗狀上皮細胞<10個/低倍視野為合格標本。采集合格標本對細菌的診斷極為重要。痰培養(yǎng)標本的運送標本采集后正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留物采集后的標本應立即送往實驗室（室溫≤2ｈ）申請抗酸桿菌檢查或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時送檢，應放入4℃冰箱，以免雜菌生長，但存放時間應不超過24ｈ懷疑嗜血桿菌或肺炎鏈球菌感染時，標本應立即送檢，切忌冷藏中段尿培養(yǎng)

留取中段尿

簡單易行，又無感染的危險。通常取晨起第一次尿送檢。尿液在膀胱內停留6-8h以上（給細菌足夠的繁殖時間）尿標本必須用無菌帶螺帽的容器采集，否則為拒收標本。

腦脊液培養(yǎng)

采集的臨床指征

在生理情況下，血液和腦脊液之間有血腦屏障，阻礙各種微生物通過血液進入中樞神經系統(tǒng)。因此正常人的腦脊液是絕對無菌的。當懷疑結核性、化膿性、流行性、霉菌性腦膜炎時進行腦脊液培養(yǎng)。嚴格無菌操作

標本采集

以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方，并麻醉之，然后以一特制通管針，輕輕的由第三與第四腰椎間的中線部位穿刺入脊髓蛛網膜，采集約3-5ml腦脊液于3支無菌試管中，每支試管至少1-2ml，然后馬上將第2根（或第1根）送至實驗室。做腦脊液培養(yǎng)時，建議同時做血培養(yǎng)。腰穿時必須作徹底消毒和無菌操作。腦脊液標本的運送

采集后應正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。常溫立即送檢，實驗室收到標本后應立即接種。腦脊液標本送檢的理想時間為15分鐘內，半小時送檢是可接受的，如果送檢時間超過1小時，則會影響結果。注：某些細菌具有自溶酶，放置時間過長易自溶死亡，因此，標本應立即送檢，并且保溫（禁止放冰箱，因腦膜炎雙球菌遇冷死亡）穿刺液培養(yǎng)穿刺液主要包括：膽汁胸水腹水心包液關節(jié)液腦脊液在正常人體中，上述體液均是無菌的。有感染的情況下檢出的細菌，在排除污染后應視為病原菌，及時給予正確的治療。

采集的臨床指征

臨床上出現胸腔積液（胸水）、腹腔積液（腹水）、關節(jié)液、心包腔積液、鞘膜腔積液等情況時，多因漿膜腔發(fā)生循環(huán)障礙、炎癥、癌浸潤等病變，腔內液體滲漏增加所致。標本采集

一般由臨床醫(yī)師在無菌操作下穿刺抽取或外科手術采集標本。取５～１０ｍｌ于無菌肝素抗凝管中（０.５ｍｇ肝素可抗凝５ｍｌ標本），充分混勻后立即送檢，不能有凝塊。大便培養(yǎng)采集指征腹瀉病人應盡量在急性期（３天內）、在用抗生素前留取標本以提高病原菌的檢出率，陳舊標本影響檢出陽性率。連續(xù)出現膿血、黏液、糊狀、米泔樣等形狀異常的糞便。疑似細菌性食物中毒患者，大便培養(yǎng)可作為一個輔助檢查手段。懷疑感染傷寒沙門菌、細菌性痢疾的患者。胃腸道感染懷疑霍亂等弧菌感染者。標本采集

無需特別準備，但最好不要住院超過３ｄ，在使用抗生素前采集最佳。自然排便后，可挑取新鮮糞便中有膿血、黏液部分的糞便約２～３ｇ，液體糞便取絮狀物２～３ｍｌ，糊狀、米泔樣等性狀異常的糞便盛于無菌的容器中或置于保存液中送檢。大便標本的運送

標本采集后應正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。糞便標本：室溫1小時內送至。直腸拭子（proctoswab）：室溫1小時內送至。高度懷疑霍亂弧菌感染的標本室溫1小時內送至，運送必須符合特殊標本的安全要求。堿性蛋白胨水：霍亂