臨床微生物標(biāo)本采集課件

臨床微生物標(biāo)本采集、

轉(zhuǎn)運(yùn)與處理

——微生物標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性

正確采集、處理與運(yùn)送細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接關(guān)系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽(yáng)性率的高低，是臨床細(xì)菌檢驗(yàn)成功的關(guān)鍵。標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)，因此標(biāo)本采集與處理的規(guī)范化是準(zhǔn)確、及時(shí)地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)。好的微生物檢驗(yàn)標(biāo)本可提升實(shí)驗(yàn)室工作效率及病患照顧質(zhì)量，降低醫(yī)療成本。

臨床標(biāo)本的分類(lèi)

帶菌體液無(wú)菌體液痰液血液咽拭子腦脊液尿液關(guān)節(jié)腔積液糞便胸腹水、膽汁其他類(lèi)別其他類(lèi)別發(fā)熱（≥38℃）或（低溫≤36℃）寒戰(zhàn)白細(xì)胞增多（特別有“核左移”未成熟的或桿狀核白細(xì)胞）皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血壓降低、CRP升高及呼吸快特殊患者（如血液病）出現(xiàn)粒細(xì)胞減少（成熟的多形核白細(xì)胞＜1000×109/L）、血小板減少等，或同時(shí)具備上述幾種體征的臨床可疑菌血癥應(yīng)采集血培養(yǎng)新生兒菌血癥，進(jìn)行血培養(yǎng)同時(shí)應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)對(duì)入院危重感染患者在未進(jìn)行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時(shí)采集血培養(yǎng)

采血量：血液中細(xì)菌和真菌的檢出率依賴于足夠的血量，但并非越多越好，超過(guò)一定數(shù)量的采血量會(huì)稀釋培養(yǎng)基內(nèi)的肉湯，使肉湯無(wú)法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補(bǔ)體、抗體、抗生素）。血量與培養(yǎng)液的比例以

1：10為宜，但對(duì)已接受抗菌藥物長(zhǎng)達(dá)10天以上的患者，采血量與培養(yǎng)基的比例應(yīng)為1：20或大于1：20為宜。成人10~15ml兒童3~5ml嬰幼兒1~2ml骨髓1~2ml采集要點(diǎn)：

1.每一對(duì)血培養(yǎng)應(yīng)當(dāng)從身體的不同部位采集2.用來(lái)培養(yǎng)的血應(yīng)當(dāng)是靜脈血而不是動(dòng)脈血3.盡量避免從靜脈導(dǎo)管中抽血4.皮膚和瓶子的消毒非常關(guān)鍵采集時(shí)機(jī)：

應(yīng)在病人發(fā)病初期或發(fā)熱高峰到來(lái)之前采集。一般情況下應(yīng)盡量選擇在使用抗菌藥之前進(jìn)行，在24h內(nèi)采集2-3份血培養(yǎng)（一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng)）。如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)。采血套數(shù)

檢測(cè)靈敏度上呼吸道標(biāo)本采集的臨床指征

上呼吸道標(biāo)本懷疑上呼吸道感染時(shí)如發(fā)熱、咽部疼痛等，尤其是懷疑化膿性鏈球菌感染或念珠菌感染時(shí)進(jìn)行咽拭子培養(yǎng)。標(biāo)本采集

口腔標(biāo)本鼻標(biāo)本咽喉標(biāo)本鼻咽標(biāo)本采集指南1.用棉簽清除口腔病灶表面的分泌物、碎屑，扔掉2.用第二根拭子采取病灶的標(biāo)本，避免碰到其它組織1.用經(jīng)鹽水濕潤(rùn)的拭子插入鼻孔約2cm2.將拭子貼著鼻黏膜轉(zhuǎn)動(dòng)1.用一壓舌板壓住舌2.用無(wú)菌拭子在后咽部、扁桃體及發(fā)炎部位采集標(biāo)本1.將一藻酸鈣拭子經(jīng)鼻腔輕輕插入鼻咽喉部2.緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)拭子5秒鐘吸收分泌物3.取出拭子并床邊接種或?qū)⑹米臃湃脒\(yùn)送培養(yǎng)基下呼吸道（痰培養(yǎng)）標(biāo)本

采集的臨床指征

咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常見(jiàn)的癥狀。咯血包括泡沫血痰、鮮血和痰中帶血等呼吸困難，呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛發(fā)熱伴WBC增高尤其是中性粒細(xì)胞或CRP明顯增高胸部影像學(xué)檢查提示感染可能標(biāo)本采集

痰（咳出的）痰（誘導(dǎo)的）支氣管標(biāo)本采集指南1.在護(hù)士指導(dǎo)下取標(biāo)本2.先用清水清洗或漱口3.深咳痰以獲得深部痰，放入無(wú)菌痰杯中4.不能取鼻后液1.先刷洗牙齦和舌2.再用清水漱口3.用霧化器使患者吸入約25ml3-10％的無(wú)菌鹽水4.采集誘導(dǎo)的痰液放入無(wú)菌痰杯1.由臨床醫(yī)生操作采集2.抽吸物或洗出物放入痰采集容器中3.將刷取物放入裝有鹽水的無(wú)菌容器中標(biāo)本質(zhì)量

合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準(zhǔn)外觀：觀察顏色、粘度、有無(wú)血絲或膿。若標(biāo)本為水狀且很明顯是唾液，則應(yīng)拒收。為了判定是否來(lái)自下呼吸道的痰，需檢查是否為合格的痰標(biāo)本：WBC>25個(gè)/低倍視野，鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍視野為合格標(biāo)本。采集合格標(biāo)本對(duì)細(xì)菌的診斷極為重要。痰培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留物采集后的標(biāo)本應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室（室溫≤2ｈ）申請(qǐng)抗酸桿菌檢查或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時(shí)送檢，應(yīng)放入4℃冰箱，以免雜菌生長(zhǎng)，但存放時(shí)間應(yīng)不超過(guò)24ｈ懷疑嗜血桿菌或肺炎鏈球菌感染時(shí)，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，切忌冷藏中段尿培養(yǎng)

留取中段尿

簡(jiǎn)單易行，又無(wú)感染的危險(xiǎn)。通常取晨起第一次尿送檢。尿液在膀胱內(nèi)停留6-8h以上（給細(xì)菌足夠的繁殖時(shí)間）尿標(biāo)本必須用無(wú)菌帶螺帽的容器采集，否則為拒收標(biāo)本。

腦脊液培養(yǎng)

采集的臨床指征

在生理情況下，血液和腦脊液之間有血腦屏障，阻礙各種微生物通過(guò)血液進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。因此正常人的腦脊液是絕對(duì)無(wú)菌的。當(dāng)懷疑結(jié)核性、化膿性、流行性、霉菌性腦膜炎時(shí)進(jìn)行腦脊液培養(yǎng)。嚴(yán)格無(wú)菌操作

標(biāo)本采集

以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方，并麻醉之，然后以一特制通管針，輕輕的由第三與第四腰椎間的中線部位穿刺入脊髓蛛網(wǎng)膜，采集約3-5ml腦脊液于3支無(wú)菌試管中，每支試管至少1-2ml，然后馬上將第2根（或第1根）送至實(shí)驗(yàn)室。做腦脊液培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)做血培養(yǎng)。腰穿時(shí)必須作徹底消毒和無(wú)菌操作。腦脊液標(biāo)本的運(yùn)送

采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。常溫立即送檢，實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。腦脊液標(biāo)本送檢的理想時(shí)間為15分鐘內(nèi)，半小時(shí)送檢是可接受的，如果送檢時(shí)間超過(guò)1小時(shí)，則會(huì)影響結(jié)果。注：某些細(xì)菌具有自溶酶，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易自溶死亡，因此，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，并且保溫（禁止放冰箱，因腦膜炎雙球菌遇冷死亡）穿刺液培養(yǎng)穿刺液主要包括：膽汁胸水腹水心包液關(guān)節(jié)液腦脊液在正常人體中，上述體液均是無(wú)菌的。有感染的情況下檢出的細(xì)菌，在排除污染后應(yīng)視為病原菌，及時(shí)給予正確的治療。

采集的臨床指征

臨床上出現(xiàn)胸腔積液（胸水）、腹腔積液（腹水）、關(guān)節(jié)液、心包腔積液、鞘膜腔積液等情況時(shí)，多因漿膜腔發(fā)生循環(huán)障礙、炎癥、癌浸潤(rùn)等病變，腔內(nèi)液體滲漏增加所致。標(biāo)本采集

一般由臨床醫(yī)師在無(wú)菌操作下穿刺抽取或外科手術(shù)采集標(biāo)本。取５～１０ｍｌ于無(wú)菌肝素抗凝管中（０.５ｍｇ肝素可抗凝５ｍｌ標(biāo)本），充分混勻后立即送檢，不能有凝塊。大便培養(yǎng)采集指征腹瀉病人應(yīng)盡量在急性期（３天內(nèi)）、在用抗生素前留取標(biāo)本以提高病原菌的檢出率，陳舊標(biāo)本影響檢出陽(yáng)性率。連續(xù)出現(xiàn)膿血、黏液、糊狀、米泔樣等形狀異常的糞便。疑似細(xì)菌性食物中毒患者，大便培養(yǎng)可作為一個(gè)輔助檢查手段。懷疑感染傷寒沙門(mén)菌、細(xì)菌性痢疾的患者。胃腸道感染懷疑霍亂等弧菌感染者。標(biāo)本采集

無(wú)需特別準(zhǔn)備，但最好不要住院超過(guò)３ｄ，在使用抗生素前采集最佳。自然排便后，可挑取新鮮糞便中有膿血、黏液部分的糞便約２～３ｇ，液體糞便取絮狀物２～３ｍｌ，糊狀、米泔樣等性狀異常的糞便盛于無(wú)菌的容器中或置于保存液中送檢。大便標(biāo)本的運(yùn)送

標(biāo)本采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。糞便標(biāo)本：室溫1小時(shí)內(nèi)送至。直腸拭子（proctoswab）：室溫1小時(shí)內(nèi)送至。高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本室溫1小時(shí)內(nèi)送至，運(yùn)送必須符合特殊標(biāo)本的安全要求。堿性蛋白胨水：霍亂