蛋白質(zhì)糖類脂質(zhì)實(shí)驗(yàn)鑒定

實(shí)驗(yàn)原理生物組織中某些有機(jī)化合物能與某些化學(xué)試劑產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。(1)糖類淀粉+碘→藍(lán)色還原糖+斐林試劑50~65℃水浴加熱約2min磚紅色沉淀(2)脂肪＋蘇丹Ⅲ染液→橘黃色脂肪＋蘇丹Ⅳ染液→紅色(3)蛋白質(zhì)＋雙縮脲試劑→紫色實(shí)驗(yàn)流程(1)還原糖的檢測和觀察選材：含糖量較高、白色或近于白色的植物組織結(jié)論：組織樣液中有可溶性還原糖在鑒定可溶性還原糖的實(shí)驗(yàn)中，加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部，放入盛50℃～65℃溫水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部；斐林試劑不穩(wěn)定，應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。(2)脂肪的檢測和觀察方法一：花生種子勻漿＋3滴蘇丹Ⅲ染液→橘黃色方法二：取材：花生種子(浸泡)，將子葉削成薄片結(jié)論：花生種子中有脂肪存在脂肪的鑒定中，實(shí)驗(yàn)用的花生種子需提前浸泡3～4h，浸泡時(shí)間太短，不易切片；浸泡時(shí)間太長，則組織太軟，切下的薄片不易成形。(3)蛋白質(zhì)的檢測和觀察選材與制備：鮮肝提取液或黃豆?jié){濾液

結(jié)論：組織樣液中存在蛋白質(zhì)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，如果用蛋清稀釋液作為實(shí)驗(yàn)材料，一定要稀釋到一定程度，否則，與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘在試管的內(nèi)壁上，使反應(yīng)不徹底，試

管也不易洗刷干凈.還原糖、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，在加相應(yīng)試劑鑒定之前，要留出一部分組織樣液，以便與鑒定后的樣液顏色作對比，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力。(1)實(shí)驗(yàn)材料的選擇由于本實(shí)驗(yàn)是利用顏色反應(yīng)鑒定不同的物質(zhì)，因此在實(shí)驗(yàn)的選材上應(yīng)注意以下兩點(diǎn)：①材料本身應(yīng)無色，以免對結(jié)果產(chǎn)生干擾；②材料應(yīng)富含相關(guān)物質(zhì)，使現(xiàn)象更顯著。(2)斐林試劑與雙縮脲試劑的比較斐林試劑雙縮脲試劑鑒定成分還原糖蛋白質(zhì)鑒定原理還原糖中的醛基(—CHO)在加熱條件下能將Cu(OH)2中的Cu2＋還原成Cu＋，從而生成磚紅色的Cu2O沉淀雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)在堿性溶液中能與Cu2＋結(jié)合生成紫色絡(luò)合物，蛋白質(zhì)分子中含有與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵斐林試劑雙縮脲試劑試劑濃度甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液；乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液A液：質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液；B液：質(zhì)量濃度為0.01g/mL的CuSO4溶液使用方法甲液、乙液混合均勻后，再加入樣液先加A液造成堿性環(huán)境，再加B液使用條件加熱(水浴50～65℃)不加熱，搖勻即可實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象淺藍(lán)色→棕色→磚紅色紫色斐林試劑雙縮脲試劑使用方法甲液、乙液混合均勻后，再加入樣液先加A液造成堿性環(huán)境，再加B液使用條件加熱(水浴50～65℃)不加熱，搖勻即可實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象淺藍(lán)色→棕色→磚紅色紫色習(xí)題2、連線題：蘇丹Ⅲ染液豆?jié){磚紅色沉淀斐林試劑馬鈴薯汁橘黃色雙縮脲試劑葡萄汁藍(lán)色碘液花生子葉紫色基礎(chǔ)題

1.（1）√；（2）X。

典例印證(2010·茂名質(zhì)檢)根據(jù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，回答下列問題：(1)鑒定成熟蘋果果肉中存在還原性糖，所用的試劑

是

，該試劑與細(xì)胞內(nèi)還原性糖發(fā)生作用，形成

沉淀，因此，可用該試劑檢驗(yàn)糖尿病人尿液中

的含量。

(2)鑒定黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時(shí)，向組織液中加入雙

縮脲試劑A搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑B搖勻。

其中雙縮脲試劑B的量只有3～4滴，而不能過量，為

什么？

。[解析]

還原糖的鑒定試劑常用斐林劑試，也可用班氏試劑，原理是相同的：還原糖的—CHO將Cu(OH)2的Cu2＋還原為Cu＋。在蛋白質(zhì)鑒定中，NaOH的作用是制造蛋白質(zhì)與Cu2＋形成絡(luò)合物的堿性條件，若Cu2＋過量，會與NaOH反應(yīng)，生成藍(lán)色的Cu(OH)2，干擾現(xiàn)象的觀察。[答案]

(1)斐林試劑磚紅色葡萄糖(2)過量的雙縮腺試劑B會于試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色利用某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定顏色反應(yīng)的原理和方法，還可以解決以下問題：

(1)對生物組織進(jìn)行某種成分的檢測。

(2)在醫(yī)學(xué)上進(jìn)行疾病的診斷，如糖尿病、腎炎。

(3)可以鑒定某些消化液中含有蛋白質(zhì)。

(4)用于劣質(zhì)奶粉的鑒定。

(5)不同生物組織中含糖量高低的測定。

1.(2008·廣東理基)雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)，是由于

蛋白質(zhì)有(

)A.肽鍵

B.氨基酸

C.羧基

D.氨基解析：在堿性溶液中，雙縮脲(H2NOC－NH－CONH2)能與Cu2＋作用，形成紫色的絡(luò)合物。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，從而用來鑒定蛋白質(zhì)的存在。答案：A2.(2007·廣東理基)下列健康人的4種液體樣本中，能與雙

縮脲試劑發(fā)生紫色顏色反應(yīng)的是(

)①尿液②胃液③汗液④唾液

A.①③B.①④C.②③D.②④

解析：雙縮脲試劑是用于鑒定蛋白質(zhì)的試劑，可與蛋白質(zhì)發(fā)生紫色反應(yīng)。胃液中含有胃蛋白酶，唾液中含有唾液淀粉酶，它們都屬于蛋白質(zhì)。答案：D3.(2007·江蘇高考)若以雞蛋蛋白液為材料進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒

定實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)蛋白液與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘固

在試管壁上。下列關(guān)于這一現(xiàn)象形成原因的描述中正

確的是(

)A.雞蛋蛋白液稀釋不夠，攪拌不勻

B.只添加了雙縮脲試劑A，未添加雙縮脲試劑BC.雞蛋蛋白液不是合適的實(shí)驗(yàn)材料

D.蛋白液與雙縮脲試劑的反應(yīng)時(shí)間不夠長解析：如果蛋白液稀釋不夠，