生物化學(xué) 第4章 病毒

第4章病毒目的要求：1、病毒粒子的結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生存的環(huán)境條件。2、毒性噬菌體的侵染循環(huán)，溫和噬菌體和溶原細(xì)菌的特點(diǎn)。3、脊椎動(dòng)物病毒、昆蟲病毒、植物病毒的主要特點(diǎn)4、亞病毒的基本知識(shí)。重點(diǎn)：

噬菌體的一步生長(zhǎng)曲線及溶原性。難點(diǎn)：

1、DNA病毒的侵染循環(huán)。２、溫和噬菌體和溶原化。22023/2/18第一節(jié)病毒的基本屬性第二節(jié)病毒的分類第三節(jié)原核生物病毒——噬菌體第四節(jié)真核生物病毒第五節(jié)亞病毒32023/2/18第一節(jié)病毒的基本屬性一、病毒的發(fā)現(xiàn)二、病毒的特點(diǎn)和定義三、病毒的形態(tài)和大小四、病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成五、病毒與環(huán)境因素六、病毒的增殖42023/2/18病毒的發(fā)現(xiàn)1886年，A.Mayer發(fā)現(xiàn)具有傳染性的煙草花葉病1892年，D.Ivanovsky煙草花葉病病原體能通過(guò)細(xì)菌濾器

1898年，MWBeijerinck對(duì)煙草花葉病病原體的研究結(jié)果表明，該病原體：能通過(guò)細(xì)菌濾器；用培養(yǎng)細(xì)菌的方法不能被培養(yǎng)出來(lái)，推測(cè)只能在植物活細(xì)胞中生活FWTwort（1915）、Fd’Herelle（1917）分別發(fā)現(xiàn)細(xì)菌病毒1935年，WMStanley首次提純并結(jié)晶了煙草花葉病毒；1940年，Kausche首先用電鏡觀察到煙草花葉病毒顆粒；52023/2/18二、病毒的特點(diǎn)和定義非細(xì)胞生物（真）病毒：至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分亞病毒類病毒：只含具侵染性的RNA組分衛(wèi)星RNA：只含有不具侵染性的RNA組分朊病毒：只含蛋白質(zhì)病毒是沒有細(xì)胞構(gòu)造,活細(xì)胞內(nèi)專性寄生的實(shí)體,在寄主內(nèi)表現(xiàn)生命特性，在寄主外表現(xiàn)大分子特性。成熟的具有侵襲力的病毒顆粒稱為病毒粒子(virion)62023/2/18病毒的特點(diǎn)無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生；沒有酶或酶系統(tǒng)極不完全，不能進(jìn)行代謝活動(dòng)；個(gè)體極小，多在10-300nm之間，能通過(guò)細(xì)菌濾器；對(duì)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感。只有DNA或RNA一種核酸。病毒向寄主細(xì)胞提供自己的遺傳信息，通過(guò)寄主的轉(zhuǎn)錄、翻譯和合成系統(tǒng)來(lái)復(fù)制病毒。72023/2/18

三、病毒的形態(tài)與大小82023/2/182、病毒粒子的大小病毒粒子大小以nm表示，范圍在10－300nm之間。多數(shù)病毒粒子的直徑在100nm上下最大的病毒：牛痘苗病毒——直徑超過(guò)250nm最小的病毒：脊髓灰質(zhì)炎病毒——28nm病毒：細(xì)菌：真菌=1：10：10092023/2/18102023/2/183、典型病毒粒子的構(gòu)造基本成分核酸——位于中心，稱為核心蛋白質(zhì)——包圍在核心周圍，形成衣殼112023/2/18核心和衣殼合稱核衣殼或核殼體，為病毒的基本結(jié)構(gòu)。有些復(fù)雜的病毒在衣殼的外面包裹著一層由脂類和多糖組成的包膜。有的包膜上還長(zhǎng)有刺突。122023/2/18病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似，是脂雙層膜132023/2/18病毒粒子的殼體結(jié)構(gòu)由于殼粒在衣殼上的不同排列，病毒粒子殼體具有下列三種形態(tài)結(jié)構(gòu)：二十面體對(duì)稱螺旋對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱142023/2/18（1）螺旋對(duì)稱殼體：（多見于植物病毒，如TMV）亞基有規(guī)律地沿著中心軸（核酸）呈螺旋排列，進(jìn)而形成高度有序、對(duì)稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。152023/2/18162023/2/18二十面體對(duì)稱：

裸露的二十面體毒粒有包膜的二十面體毒粒172023/2/18有尾噬菌體，其殼體由頭部和尾部組成。包裝核酸的頭部通常呈二十面體對(duì)稱，尾部呈螺旋對(duì)稱。（3）復(fù)合對(duì)稱結(jié)構(gòu)182023/2/184.病毒的化學(xué)組成組成病毒的化學(xué)成分有：核酸（一種病毒只含有一種核酸：

DNA或RNA）蛋白質(zhì)（存在核殼中）脂類（存要包膜中）多糖（存在包膜中）192023/2/18

（1）病毒的核酸核酸是病毒的遺傳物質(zhì)；控制著病毒的增殖及對(duì)宿主的感染性；一種病毒的毒粒只含一種核酸：DNA或RNA；雙鏈DNA：dsDNA單鏈DNA：ssDNA雙鏈RNA：dsRNA單鏈RNA：ssRNA

植物V 動(dòng)物V昆蟲V噬菌體RNA(多為單鏈)絕大多數(shù)部分少數(shù)少數(shù)DNA(多為雙鏈)極少數(shù)部分多數(shù) 多數(shù)202023/2/18凡堿基排列順序與mRNA相同的單鏈DNA或RNA，稱(+)DNA鏈或(+)RNA鏈，凡堿基排列順序與mRNA鏈互補(bǔ)的單鏈DNA和RNA，稱(-)DNA鏈或(-)RNA鏈。正鏈(+)核酸具有侵染性，可直接作為mRNA合成蛋白質(zhì)，負(fù)鏈(-)沒有侵染性，必須依靠病毒攜帶的轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄成正鏈后才能作為mRNA合成蛋白質(zhì)。212023/2/18（2）病毒蛋白

構(gòu)成病毒粒子外殼，保護(hù)病毒核酸；決定病毒感染的特異性，與易感細(xì)胞表面存在的受體具特異性親和力決定病毒的抗原性某些病毒蛋白質(zhì)是具有特殊功能的酶，如噬菌體中的溶菌酶。功能：222023/2/18（3）脂類存在：僅存在于有包膜病毒的包膜中種類：膽固醇、中性脂肪、磷脂功能：與病毒的吸附和侵入有關(guān)。（4）糖類存在：常以糖蛋白，糖脂的形式存在或者以糖苷鍵直接與堿基相連種類：葡萄糖、龍膽二糖等功能：與病毒的血清反應(yīng)有關(guān)。232023/2/18有特定形態(tài)，多為圓形。體積較大，光學(xué)顯微鏡下可見。位于：細(xì)胞質(zhì)（質(zhì)型病毒，具嗜酸性）或核中（核型病毒，具嗜堿性）可以用于病毒的快速鑒別病毒包含體有的病毒在寄主細(xì)胞中形成聚集體，其中包含未裝配的病毒亞基、完整的病毒體和寄主編碼的蛋白質(zhì)。242023/2/18溫度：大都不耐熱，55—60℃幾分鐘就能殺死病毒。病毒對(duì)低溫不敏感，低溫下病毒停止復(fù)制，但仍能存活較長(zhǎng)時(shí)間。pH值：較適合pH是7.0左右，但不同的病毒對(duì)pH的容許范圍限不一樣。過(guò)酸過(guò)堿的溶液可使病毒裂解滅活。輻射：X射線、r射線和紫外線均可使病毒滅活

化學(xué)藥劑：有包膜的病毒因包膜中含有脂類，故對(duì)脂溶劑敏感。甲醛能使病毒滅活，所以常用甲醛來(lái)清洗污染了病毒的器具。氯、碘對(duì)病毒有高度的滅活作用。5、環(huán)境對(duì)病毒的影響252023/2/18細(xì)胞內(nèi)階段：病毒核酸在寄主體內(nèi)復(fù)制，病毒粒子增殖，呈有生命狀態(tài)細(xì)胞外階段：病毒以結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化學(xué)粒子形式存在，不能代謝、繁殖，呈惰性狀態(tài)6.病毒的生活周期7、病毒的增殖無(wú)論是動(dòng)物病毒、植物病毒或細(xì)菌病毒，其繁殖過(guò)程雖不完全相同，但基本相似，可分為六個(gè)連續(xù)步驟：吸附→侵入→脫殼→合成→裝配→釋放262023/2/184、病毒的增殖吸附侵入脫殼病毒大分子合成裝配釋放272023/2/18（1）吸附吸附是病毒表面蛋白與細(xì)胞受體特異性的結(jié)合，導(dǎo)致病毒附著在細(xì)胞表面。病毒吸附蛋白：能夠特異性地識(shí)別細(xì)胞受體并與之結(jié)合的毒粒表面的結(jié)構(gòu)蛋白分子。細(xì)胞受體（receptor）

：能被病毒吸附蛋白特異性地識(shí)別并與之結(jié)合，介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞，啟動(dòng)感染發(fā)生的細(xì)胞表面組分282023/2/18（2）侵入:動(dòng)物病毒的侵入有以下四種方式:

內(nèi)吞、膜融合、移位入侵、衣殼重排植物病毒的侵入:

一般通過(guò)表面?zhèn)诟腥净虼涛娇谄骼ハx將攜帶的病毒插入到植物細(xì)胞中去噬菌體的侵入:

有尾噬菌體靠尾鞘的收縮將核酸注入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，如T4噬菌體。病毒的核酸或整個(gè)病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞的過(guò)程。不同的病毒侵入宿主細(xì)胞的方式不一樣。292023/2/18動(dòng)物病毒的入侵方式302023/2/18（3）脫殼病毒侵入后，病毒的包膜和／或殼體除去而釋放出病毒核酸（4）生物合成

核酸的復(fù)制→mRNA的轉(zhuǎn)錄→蛋白質(zhì)的合成312023/2/18不同核酸類型的病毒轉(zhuǎn)錄mRNA的方式322023/2/18逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒也是（＋）RNA病毒，在病毒粒子攜帶的逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，先由（＋）RNA合成（－）DNA，形成（＋）RNA／（－）DNA中間體，再將（＋）RNA除去，形成單鏈（－）DNA。（－）DNA在依賴DNA的DNA聚合酶催化下合成出（＋）DNA，再形成雙鏈（±）DNA，（±）DNA可以作為模板轉(zhuǎn)錄mRNA。332023/2/18（5）裝配大多數(shù)DNA病毒核酸在寄主核內(nèi)復(fù)制，蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中合成。合成好的蛋白質(zhì)再運(yùn)到核中組裝。大多數(shù)RNA病毒，核酸的復(fù)制，蛋白質(zhì)的合成，病毒的裝配均在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行.有包膜病毒包膜的獲得靠出芽釋放獲得342023/2/18（6）釋放成熟病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的過(guò)程。

動(dòng)物病毒釋放的方式多樣:a.通過(guò)細(xì)胞溶解或局部破裂釋放。

b.通過(guò)“出芽”釋放。

c.沿核周與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相通部位從細(xì)胞內(nèi)逐漸釋放植物病毒:一般不裂解細(xì)胞，通過(guò)胞間連絲傳給相鄰的細(xì)胞。細(xì)菌病毒:大多數(shù)以裂解細(xì)胞的方式釋放。352023/2/18第二節(jié)病毒的分類早期依據(jù)寄主范圍分類：脊椎動(dòng)物病毒、無(wú)脊椎動(dòng)物病毒、昆蟲病毒、植物病毒、細(xì)菌病毒1995年，國(guó)際病毒分類委員會(huì)依據(jù)核酸類型和有無(wú)包膜，將病毒分七類，71科

2005年，依據(jù)核酸類型和病毒形狀、培養(yǎng)特征、流行病學(xué)等特征，將病毒分3個(gè)目，73科,1950個(gè)種。按核酸類型分八大類群。362023/2/18dsDNA病毒：

有尾噬菌體目（下分3科15個(gè)屬）未分目的科：17個(gè)科（下分47個(gè)屬）ssDNA病毒：

未分目的科：5個(gè)科（下分17個(gè)屬）RNA－DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒：

未分目的科：5個(gè)科（下分19個(gè)屬）dsRNA病毒：

未分目的科：6個(gè)科（下分22個(gè)屬）裸露RNA病毒：

未分目的科：1個(gè)科（下分2個(gè)屬）－ssRNA病毒：

單分子負(fù)鏈RNA病毒目（下分4個(gè)科，14個(gè)屬）未分目的科：3個(gè)科（下分13個(gè)屬）+ssRNA病毒：

未分目的科：16個(gè)科（下分73個(gè)屬）套病毒目（下分2個(gè)科，3個(gè)屬）372023/2/18第三節(jié)原核生物病毒—噬菌體侵染在細(xì)菌和放線菌的病毒稱為噬菌體或者叫細(xì)菌病毒，其所含核酸多數(shù)為DNA，少數(shù)為RNA。

寄生于真菌的病毒叫噬真菌體或叫真菌病毒，為雙鏈RNA病毒寄生在藍(lán)細(xì)菌上的病毒叫噬藍(lán)藻體，都是雙鏈DNA病毒382023/2/181915年，Twort在培養(yǎng)葡萄球菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)菌落上出現(xiàn)透明斑，1917處，第赫蘭發(fā)現(xiàn)混濁的痢疾桿菌培養(yǎng)液變澄清，他認(rèn)為細(xì)菌被另一種更微小的生物溶解了，他把這種生物稱為噬菌體（Bacteriophage,phage）噬菌體的發(fā)現(xiàn)：392023/2/18噬菌體的形態(tài)

噬菌體由蛋白質(zhì)和核酸組成，基本形態(tài)為蝌蚪形、微球形和線狀三種，進(jìn)一步分為六種不同的形態(tài)402023/2/18412023/2/18類型形態(tài)特征核酸類型噬菌體舉例寄主種類1具六角形頭部及伸縮性長(zhǎng)尾

ds—DNA

T2，T4，T6

E.coli.PseudomonasBacillus.

粘球菌，沙門氏菌2

具六角形頭部及不伸縮的長(zhǎng)尾

ds—DNA

λT1，T5

E.coli.Pseuclomonas棒桿菌,鏈霉菌

3具六角形頭部及不伸縮短尾

ds—DNA

T3，T7，P22

E.coli.PseudomonasBacillus.土壤桿菌,沙門氏菌

4

無(wú)尾，六角形頭部的頂點(diǎn)殼粒大

ss—DNA

φX174，S13

E.coli.沙門氏菌等

5

無(wú)尾，六角形頭部頂點(diǎn)殼粒小

ss—RNA

R17,f2,MS2,Qβ

E.coli.Pseudomonas.柄細(xì)菌等

6無(wú)頭尾之分，病毒粒子線狀

ss—DNA

Fd，M13，f1，Vb

E.coli.Pseudomonas

422023/2/18噬菌體分為烈性噬菌體和溫和噬菌體兩大類凡是能夠侵染細(xì)菌，在其中復(fù)制和完成其生活周期，最后裂解細(xì)菌細(xì)胞的噬菌體，稱為烈性噬菌體，其生活周期為裂解性生活周期（lyticcycle）2、噬菌體的生活周期432023/2/18E.ColiT4phage：頭部（二十面體蛋白質(zhì)衣殼，內(nèi)含DNA雙鏈）尾部（螺旋對(duì)稱結(jié)構(gòu)，由中空尾髓和可收縮的尾鞘組成，尾端有基板、尾釘和尾絲）烈性噬菌體大腸桿菌的T偶數(shù)噬菌體（如T2、T4、T6）為烈性噬菌體尾絲尾釘基板尾鞘尾髓頸部頭部DNA442023/2/181.吸附2.侵入3.增殖（生物大分子的合成）4.裝配5.裂解釋放烈性噬菌體的生活周期452023/2/18462023/2/18T4噬菌體的繁殖過(guò)程最初的吸附是隨機(jī)的，當(dāng)噬菌體以尾絲作為吸附點(diǎn)，通過(guò)尾部的刺突與細(xì)菌的表面的特殊受體相結(jié)合后，則具有特異性吸附472023/2/18482023/2/18侵入噬菌體通過(guò)收縮尾鞘，將核酸物質(zhì)注入寄主細(xì)胞內(nèi)492023/2/18復(fù)制和生物合成烈性噬菌體的復(fù)制過(guò)程包括核酸的復(fù)制、蛋白質(zhì)殼體（頭部、尾部和尾絲）和釋放噬菌體所需要的酶，該過(guò)程是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程502023/2/18裝配、釋放噬菌體的各個(gè)部分有序地組裝在一起，形成完整的病毒粒子，成熟的病毒粒子引起寄主細(xì)胞的裂解，釋放處病毒粒子512023/2/18噬菌斑烈性噬菌體感染細(xì)菌的結(jié)果：液體培養(yǎng)基：渾濁菌液變清亮雙層（上層含菌）固體平板：出現(xiàn)噬菌斑522023/2/18定義：定量描述毒性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的曲線稱為一步生長(zhǎng)曲線。作用：用來(lái)測(cè)定噬菌體侵染和成熟病毒體釋放的時(shí)間間隔,并用以估計(jì)每個(gè)被侵染的細(xì)胞釋放出來(lái)的新的噬菌體粒子的數(shù)量。即反映每種噬菌體的三個(gè)重要特性參數(shù)：

潛伏期、裂解期、裂解量

3、一步生長(zhǎng)曲線（onestepgrowthcurve）532023/2/181、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細(xì)胞（通常細(xì)菌與噬菌體的混合比例為10∶1

）；2、數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清（中和未吸附的噬菌體）；3、將上述混合物大量稀釋；4、保溫培養(yǎng)并定期檢測(cè)培養(yǎng)物中的噬菌體效價(jià)（對(duì)噬菌體含量進(jìn)行計(jì)數(shù)）；5、以感染時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒的感染效價(jià)為縱坐標(biāo)，繪制出病毒特征性的繁殖曲線；一步生長(zhǎng)曲線的制作542023/2/18552023/2/18潛伏期：噬菌體在吸附和侵入后，細(xì)胞內(nèi)只出現(xiàn)噬菌體的核酸和蛋白質(zhì)，還沒有釋放出噬菌體的一段時(shí)間裂解期：裝配好的噬菌體將宿主細(xì)胞裂解，大量噬菌體顆粒從細(xì)胞中放出。平板檢測(cè)的噬菌斑數(shù)急劇上升。穩(wěn)定期：當(dāng)宿主細(xì)胞全部裂解，新噬菌體數(shù)目達(dá)到最高值，不再增加。每個(gè)被感染細(xì)菌釋放出的新噬菌體的平均數(shù)稱為裂解量。562023/2/18

定義：有些噬菌體進(jìn)入寄主細(xì)胞后，并不進(jìn)行復(fù)制和裂解寄主，而是將其核酸整合到寄主的染色體上，并隨著寄主細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖而傳下去，這種噬菌體稱為溫和性噬菌體特點(diǎn)：其核酸的類型都是dsDNA，可整合到宿主細(xì)胞的染色體中，隨宿主染色體復(fù)制而同步復(fù)制3、溫和性噬菌體

temperatephagesorlysogenicphages

572023/2/18噬菌體吸附宿主細(xì)胞裂解途徑誘導(dǎo)DNA復(fù)制DNA整合到宿主染色體合成、裝配裂解釋放溶原性細(xì)胞溫和噬菌體的感染和溶源化示意圖溶源途徑582023/2/18溫和噬菌體及其溶原化592023/2/18溶源細(xì)胞lysogeniccells：含有溫和噬菌體的細(xì)胞稱為溶源細(xì)菌(或溶原細(xì)胞)。整合在宿主染色體上的噬菌體DNA稱為前噬菌體。而溫和噬菌體侵入寄主細(xì)胞所產(chǎn)生的特性稱為溶源性602023/2/18可以自發(fā)或人工誘發(fā)變?yōu)榱倚允删wvirulent溶原細(xì)胞可失去噬菌體的核酸后復(fù)愈溶原細(xì)菌對(duì)同源噬菌體的感染具有免疫性某些溶原細(xì)菌可以合成特殊的代謝產(chǎn)物,如白喉?xiàng)U菌只有在被原噬菌體感染形成溶原細(xì)菌后才能產(chǎn)生白喉毒素。溶源細(xì)菌的特點(diǎn)：612023/2/18

溫和噬菌體侵入寄主細(xì)胞的三種去向：多數(shù)情況：噬菌體DNA整合到宿主細(xì)胞染色體

DNA上，與寄主同步復(fù)制，宿主細(xì)胞不裂解。少數(shù)情況(1)：溶源細(xì)胞中的原噬菌體大量復(fù)制，裝配為成熟噬菌體，裂解寄主。裂解方式：自發(fā)裂解：機(jī)率較小，10-5

誘發(fā)裂解：物理、化學(xué)因素處理少數(shù)情況(2)：溶源細(xì)胞的復(fù)愈：原噬菌體DNA在細(xì)胞傳代過(guò)程中丟失，溶源細(xì)胞成為正常細(xì)胞

622023/2/18λ噬菌體裂解生長(zhǎng)與溶源化的建立取決于兩種阻竭蛋白CI和Cro的合成。CI和Cro蛋白分別由λ噬菌體的CI基因和Cro基因編碼。當(dāng)CI蛋白的合成占優(yōu)勢(shì)時(shí)，PRM啟動(dòng)子被激活，CI蛋白繼續(xù)合成，因而溶源化狀態(tài)建立。相反Cro蛋白合成占優(yōu)勢(shì)，則PRM啟動(dòng)子被抑制，沒有C1蛋白的合成，于是λ噬菌體在Cro蛋白的控制下進(jìn)入裂解生長(zhǎng)。632023/2/18

檢驗(yàn)溶源菌的方法是將少量溶源菌與大量敏感指示菌(易受溶源菌釋放出的噬菌體感染發(fā)生裂解性循環(huán)者)相混合，然后倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，溶源菌長(zhǎng)成菌落。當(dāng)溶源菌中極少數(shù)的細(xì)胞發(fā)生自發(fā)裂解釋放出↑粒子時(shí)，這些粒子會(huì)感染溶源菌周圍的敏感菌，并反復(fù)侵染形成噬菌斑。最后形成了中央是溶源菌菌落，四周為透明裂解圈的特殊菌落。642023/2/18λ噬菌體是一種研究得很透徹的大腸桿菌溫和噬菌體，原噬菌體插入寄主細(xì)胞染色體的特定位點(diǎn)(在gal和bio基因之間)，成為寄主細(xì)胞染色體的附加體，并隨著寄主細(xì)胞復(fù)制、繁殖而傳代。含有λ原噬菌體的溶源細(xì)胞對(duì)于λ原噬菌體的毒性突變株有免疫性，也就是說(shuō)，毒性突變株對(duì)非溶源寄主有毒性，對(duì)溶源寄主(含有λ原噬菌體)卻沒有毒性。

λ噬菌體652023/2/18PI噬菌體也是一種溫和噬菌體，它和λ噬菌體有兩種明顯不同的特征。一個(gè)特征是它的原噬菌體主要是獨(dú)立地存在于寄主細(xì)胞內(nèi)，而不是染色體的附加體。第二個(gè)特征是當(dāng)它插入染色體為附加體時(shí)不是在某個(gè)特定位點(diǎn)上，而是能在許多不同位點(diǎn)上插入。

PI噬菌體662023/2/18噬菌體的應(yīng)用用于鑒定未知細(xì)菌用于治療某些傳染性疾病利用噬菌體可以檢驗(yàn)由種子攜帶的植物病原菌測(cè)定輻射劑量在分子生物學(xué)研究方面的應(yīng)用通過(guò)對(duì)大腸桿菌噬菌體侵染過(guò)程的研究，闡明了遺傳學(xué)的基本問題。是基因工程的重要載體。噬菌體的防治選育抗噬菌體的突變株672023/2/18第四節(jié)真核生物病毒一、植物病毒二、脊椎動(dòng)物病毒三、昆蟲病毒682023/2/18定義：感染植物的病毒。引起的癥狀：一、植物病毒①葉綠體受到破壞而引起的花葉、黃化、紅化等②植株矮化、從簇、畸形等③形成枯斑、壞死等。692023/2/18702023/2/18煙草蘭花712023/2/18植物病毒的特點(diǎn)病毒粒子形態(tài)多桿狀核酸多為單鏈RNA感染的?；圆粡?qiáng)，一種病毒可感染不同科、屬的植物混合感染常見，即一種植物可被多種病毒感染病毒常在感染宿主細(xì)胞內(nèi)由病毒子堆疊成結(jié)晶性內(nèi)含體或是由病毒粒子與細(xì)胞組分形成非結(jié)晶性內(nèi)含體722023/2/18植物病毒的增殖其侵入方式都是被動(dòng)的：昆蟲刺吸式口器、帶病汁液與植物傷口相接觸在細(xì)胞間的擴(kuò)散和傳播：借助植物的胞間連絲就可以實(shí)現(xiàn)病毒粒子必須在侵入宿主細(xì)胞后才脫去蛋白質(zhì)衣殼，TMV的脫殼作用約需4小時(shí)732023/2/18

單鏈或雙鏈，DNA（天花）或RNA（流感）。多為球狀，有的具有包膜，有的不具有包膜。人類疾病：

80%的傳染病由病毒引起。如：天花，流感，肝炎，麻疹，脊髓灰質(zhì)炎，愛滋病等畜禽疾?。嚎谔阋?，狂犬病，瘋牛病，豬瘟，雞新城疫等，其中前三種為人畜共患。二、脊椎動(dòng)物病毒742023/2/18引起非洲出血熱疾病的埃博拉（Ebola）病毒艾滋病毒在侵染人的淋巴細(xì)胞

752023/2/18乙肝病毒

(hepatitisBvirus,HBV)特征：環(huán)狀雙鏈DNA病毒，分3種形態(tài)

1、完整病毒粒子：含外膜和核衣殼，含核心結(jié)構(gòu)蛋白（核心抗原HBsAg），有感染性。

2、空心包膜組成的球形顆粒：不含核衣殼，無(wú)感染性

3、空心包膜組成的絲狀顆粒：不含核衣殼，無(wú)感染性乙肝檢測(cè)的兩對(duì)半指標(biāo)

HBsAg：乙肝病毒表面抗原

HBsAb：乙肝病毒表面抗體

HBeAg：乙肝病毒e抗原

HBeAb：乙肝病毒e抗體

HBcAb：乙肝病毒核心抗體762023/2/18772023/2/18艾滋病毒80年代初，人類發(fā)現(xiàn)一種可怕的病毒性傳染病——艾滋?。ˋIDS），即獲得性免疫缺陷綜合病癥（AcquiredImmureDeficiencySyndrome）。1983年，法國(guó)的盧克蒙塔博士最早分離到艾滋病病毒。1986年，WHO定名為HIV(humanimmunedeficiencyvirus)

全球：500萬(wàn)感染者，4000萬(wàn)攜帶者，非洲比例最高，博茨瓦那10%中國(guó)：20萬(wàn)感染者，100萬(wàn)攜帶者。782023/2/18艾滋病由人類免疫缺陷病毒HIV引起，HIV病毒體呈圓球形，直徑100nm，病毒的殼體由P18和P24兩種蛋白組成，核心含有單鏈RNA和逆轉(zhuǎn)錄酶，病毒殼體外有包膜，包膜由脂類和蛋白質(zhì)組成艾滋病毒的組成792023/2/18HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，感染并殺死T4淋巴細(xì)胞。球形，直徑約100nm，有包膜與刺突。802023/2/18HIV病毒具有高度變異性，不易被人體免疫體系清除，潛伏期長(zhǎng)。當(dāng)人體受到HIV的侵染后，就會(huì)引起免疫功能的喪失HIV病毒主要通過(guò)血液和分泌物，并經(jīng)粘膜表面和皮膚的破損處進(jìn)入體內(nèi)艾滋病毒的致病性艾滋病毒的抵抗力HIV對(duì)熱敏感，56℃30min滅活，但在室溫保存7天，仍保持活性。對(duì)紫外線、γ射線有較強(qiáng)抵抗力。對(duì)化學(xué)試劑敏感。812023/2/18822023/2/18病毒特點(diǎn)烈性傳染性RNA病毒。主要感染牛、羊、豬等偶蹄動(dòng)物，人畜共患，春季最勝，使仔豬大批死亡，成年動(dòng)物感染較少。對(duì)日光、熱、酸、堿敏感。癥狀：體溫升高，精神不振，食欲降低，口腔、鼻吻部、蹄部產(chǎn)生水皰和潰爛。傳播：呼出氣體、排泄物?？谔阋?FMD：footandmouthdisease)832023/2/18三、昆蟲病毒昆蟲病毒的特點(diǎn)昆蟲病毒的主要特點(diǎn)是病毒粒子與宿主細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)形成結(jié)晶體，稱為包含體，包含體多呈現(xiàn)六角形、五角形、四角形等，故稱多角體。根據(jù)包含體在寄主細(xì)胞內(nèi)的存在部位和包含體中病毒粒子的多少以及包含體的有無(wú)，將之分為：核型多角體病毒（NPV）質(zhì)型多角體病毒（CPV）顆粒體病毒（GV）無(wú)包含體病毒842023/2/18昆蟲病毒--核型多角體病毒

（NPV，nuclearpolyhedrosisvirus）

一類在昆蟲細(xì)胞核內(nèi)增殖的、具有蛋白質(zhì)包涵體的桿狀病毒殺蟲過(guò)程一般經(jīng)過(guò)這樣幾個(gè)過(guò)程：病毒粒子→進(jìn)入宿主的中腸上皮細(xì)胞→進(jìn)入體腔→吸附各種細(xì)胞→大量增殖、重復(fù)感染→宿主生理機(jī)能紊亂→組織破壞→死亡852023/2/18核型多角體病毒862023/2/18昆蟲病毒--質(zhì)型多角體病毒

（CPV，cytoplasmicpolyhedrosisvirus）一類在昆蟲細(xì)胞質(zhì)內(nèi)增殖的、具有蛋白質(zhì)包涵體的一種球狀病毒研究得最多的是家蠶的CPVCPV的感染途徑是：先通過(guò)昆蟲的口腔進(jìn)入其消化道，以后由于胃液呈堿性，把多角體蛋白溶解并釋放出病毒粒子，然后侵入中腸上皮細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制872023/2/18質(zhì)型多角體病毒882023/2/18昆蟲病毒--顆粒體病毒（GV，granulosisvirus）

一類具有蛋白質(zhì)包涵體、每個(gè)包涵體內(nèi)一般僅含一個(gè)病毒粒子的昆蟲桿狀病毒，核酸類型是dsDNA

被GV感染后，一般表現(xiàn)出食欲減退、體弱無(wú)力、行動(dòng)遲緩、腹部腫脹變色，蟲體表皮易破，流出液呈腥臭、混濁、乳白色膿狀等癥狀892023/2/18顆粒體病毒902023/2/18第五節(jié)亞病毒1981年法國(guó)著名病毒學(xué)家A.Dlwoff把病毒分為亞病毒和真病毒，亞病毒是比病毒更為簡(jiǎn)單的致病因子，只有核酸或蛋白質(zhì)，而真病毒同時(shí)含有核酸和蛋白質(zhì)類病毒；朊病毒;擬病毒：衛(wèi)星病毒衛(wèi)星RNA包括：912023/2/18類病毒（viroid

）

目前所知道的最小、只含單鏈閉合環(huán)狀RNA一種成分、專性細(xì)胞內(nèi)寄生的分子生物。只在植物體中發(fā)現(xiàn)，引起植物病害。如：馬鈴薯紡錘形塊莖病類病毒：是一條長(zhǎng)50nm的棒形結(jié)構(gòu)，是一個(gè)裸露的閉合環(huán)狀dsRNA分子922023/2/18

朊病毒（Prions）美國(guó)神經(jīng)生物學(xué)家StanleyPrusin