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本文格式為Word版,下載可任意編輯——放線菌霉菌的形態(tài)觀察微生物學(xué)測驗LabworkonMicrobiology,三峽大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)教學(xué)組,測驗指導(dǎo)老師:涂璇,測驗五放線菌、霉菌形態(tài)查看,一、測驗?zāi)康亩?、測驗原理三、測驗器材四、測驗步驟五、測驗報告,一、測驗?zāi)康?學(xué)習(xí)并掌管查看放線菌、霉菌形態(tài)的根本方法。
初步了解放線菌和四類常見霉菌的根本形態(tài)特征。,二、根本原理,放線菌(原核微生物):
由不同長短的纖細(xì)的菌絲所形成的單細(xì)胞菌絲體。菌絲體分為兩片面,即潛入培養(yǎng)基中的養(yǎng)分菌絲(或稱基內(nèi)菌絲)和生長在培養(yǎng)基以上的氣生菌絲。有些氣生菌絲分化成孢子絲,呈螺旋形、波浪形或分枝狀等。孢子常呈圓形、橢圓形或桿狀。氣生菌絲及孢子的外形和顏色常作為分類的重要依據(jù)。,放線菌培養(yǎng)和查看方法,扦片法:在放線菌平板上扦上蓋玻片后培養(yǎng),使放線菌菌絲沿著培養(yǎng)基外觀與蓋玻片的交接處生長而附著在蓋玻片上。查看時直接取出蓋玻片置于載玻片上鏡檢。,鏡檢:用鑷子拔出蓋玻片,擦去后面培養(yǎng)物,將有菌的一面朝上置于載玻片上,直接鏡檢。
宜用略暗光線查看,低倍鏡—高倍鏡;
染色后查看效果更好。,玻璃紙法:將玻璃紙籠罩在平板外觀,接種放線菌、培養(yǎng),放線菌在玻璃紙上形成菌苔。查看時取下玻璃紙固定在載玻片上鏡檢。
鏡檢:先在載玻片上滴一小滴水,取下玻璃紙,使菌面朝上,使玻璃紙平貼于載玻片上。,優(yōu)點(diǎn):可查看到放線菌自然生長狀態(tài)下的特征,和不同生長期的形態(tài)。,留神:整過程勿觸動菌面培養(yǎng)物。,印片法:將要查看的放線菌的菌落或菌苔直接印在載玻片上,經(jīng)染色后查看。
用接種鏟或解剖刀將平板上的菌苔連同培養(yǎng)基一起切下,菌面朝上。另取一載玻片,微熱后,輕輕按壓菌苔,固定,染色后鏡檢。
主要用于查看孢子絲的形態(tài),孢子的排列及其外形等,但形態(tài)特征可能有所變更。,霉菌(真核微生物):
霉菌是一類可產(chǎn)生繁雜分枝菌絲的真核微生物的統(tǒng)稱。分枝菌絲分為基內(nèi)菌絲和氣生菌絲,氣生菌絲生長到確定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲,由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比放線菌大得多。,霉菌培養(yǎng)和查看方法,載玻片法:將培養(yǎng)基薄層置于載玻片上,接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng),霉菌即在其間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長。查看時直接將載玻片鏡檢。,玻璃紙法:與放線菌好像。
直接制片查看法:用解剖針挑取少量培養(yǎng)物置于預(yù)先滴加乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液中,制成霉菌制片鏡檢。
50%乙醇用于洗去孢子;
盡可能保持霉菌生長狀態(tài);
制止產(chǎn)生氣泡。
特點(diǎn):細(xì)胞不變形;
不易枯燥,易保存;
防止孢子飛散;
鞏固反差。,霉菌菌絲較粗大,細(xì)胞易收縮變形,而且孢子很輕易飛散,制真菌標(biāo)本時常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。
用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液制成的霉菌標(biāo)本的特點(diǎn)是:(a)細(xì)胞不變形;
(b)具有殺菌防腐作用,不易枯燥,能保持較長時間;
(c)溶液本身呈藍(lán)色,有確定染色效果。,1、菌種放線菌劃線平板28℃7天后培養(yǎng)物,曲霉、根霉、青霉和毛霉劃線平板28℃4天后培養(yǎng)物。
2、儀器顯微鏡;
3、其他材料平皿,載玻片,解剖針,香柏油,二甲苯,擦鏡紙,吸水紙,染色缸等。,三、測驗器材,四、操作步驟,查看放線菌氣生菌絲和基內(nèi)菌絲的識別取插片一片,直接在顯微鏡下舉行查看,留神分界面兩側(cè)菌絲形態(tài)的差異,鏈霉菌的基內(nèi)菌絲與氣生菌絲,,孢子絲分隔成孢子,放線菌和細(xì)菌的異同,查看黑根霉菌絲處境和子囊孢子處境(著重鑒別孢子囊、包囊梗、假根):,查看毛霉菌絲和分生孢子著生處境:,逐級分枝,查看黑曲霉菌絲分隔處境和分生孢子著生處境(著重鑒別分生孢子梗、足細(xì)胞和分生孢子):,分生孢子梗頂端膨大成圓形或橢圓形的頂囊,由頂囊向外輻射長出一層或兩層小梗,最上層小梗呈瓶狀,在其頂端生成成串的分生孢子。,查看青霉菌絲和分生孢子著生處境:,五、測驗報告,記錄所查看到的放線菌基內(nèi)菌絲和氣生菌絲的區(qū)別繪圖表示曲霉、根霉、青霉和毛霉的形態(tài)特征,斟酌題,在顯微鏡的高倍鏡或油
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