高中生物選修1知識點總結(jié)

- .專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵·無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌·生殖4、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)展有氧呼吸，大量繁殖。 CHO＋6O→6CO＋6HO6 12 6 2 2 25、在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)展酒精發(fā)酵。 CHO→2CHOH＋2CO6 12 6 2 5 26、20℃左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18℃-25℃7呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?CHOH＋O→CHCOOH＋HO2 5 2 3 210、控制發(fā)酵條件的作用①醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)展深層發(fā)酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最適生長溫度為30～35℃，控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時間縮短，又減少雜菌污染的時機(jī)。③有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實驗流程：挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒〔→醋酸發(fā)酵→果醋〕、酒精檢驗：果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來檢驗。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反響呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中參加發(fā)酵液2ｍL，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的HSO33滴，振蕩試管，2 4觀察顏色13應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時，應(yīng)該充氣口連接氣泵，輸入氧氣。疑難解答〔1〕你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？機(jī)。〔2〕你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進(jìn)展酒精消毒；每次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。〔3〕制葡萄酒時，為什么要將溫度控制在18～25℃？制葡萄醋時，為什么要將溫度控制在30～35℃？. -可修遍---.z..z.溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20℃左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度圍。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30～35℃，因此要將溫度控制在30～35℃。課題二腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)展前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的假設(shè)干塊。所用豆腐的含水量為70％左右，水分過多那么腐乳不易成形。*水分測定方法如下：準(zhǔn)確稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品5～10g(準(zhǔn)確到0.02mg)，置于重量的蒸發(fā)皿中，均勻攤平后，在100～105℃電熱枯燥箱枯燥4h，取出后置于枯燥器冷卻至室溫后稱重，然后再烘30min，直至所稱重量不變?yōu)橹?。樣品水分含量?〕計算公式如下：(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量·毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜，將籠屜中的控制在15～18℃，并保持一定的溫度。來源：1.來自空氣中的毛霉孢子，2.直接接種優(yōu)良毛霉菌種時間：5天·加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加鹽而增加鹽量，接近瓶口外表的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右?！び名}腌制時，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，缺乏以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味·食鹽的作用：1.抑制微生物的生長，防止腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬，在后期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用，給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶?！づ渲汽u湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右?！?防止雜菌污染以防腐2.與有機(jī)酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味·香辛料的作用：1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進(jìn)發(fā)酵過程·過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。疑難解答〔1〕利用所學(xué)的生物學(xué)知識，解釋豆腐長白毛是怎么一回事？豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。〔2〕為什么要撒許多鹽，將長毛的豆腐腌起來？鹽能防止雜菌污染，防止豆腐腐敗?！?〕我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形?！?它對人體有害嗎？它的作用是什么？的"體〞，使腐乳成形。課題三制作泡菜·酸。分裂方式是二分裂。反響式為：CHO酶2CHO+能量 含抗生素牛奶不6 12 6 3 6 3常用于生產(chǎn)酸奶?！喯跛猁}為白色粉末，易溶于水，在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑。亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間〔d〕·30mg/kg，醬腌菜中亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間〔d〕一般在腌制10天后亞硝酸鹽含量開場降低，故在10天之后食用最好*測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反響后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測比擬，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題一微生物的實驗室培養(yǎng)·展微生物培養(yǎng)的物質(zhì)根底?！彩菑募t藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑〕后，制成瓊脂固體那么常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。成分是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成，常用于實際工業(yè)生產(chǎn)。用途是指在培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基類別的微生物。·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源、生長因子等?！ぬ荚矗耗転槲⑸锏拇峁┨荚氐奈镔|(zhì)。如CO、NaHCO等無機(jī)碳源；糖類、石油、2 3花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。·氮源：能為微生物的代提供氮元素的物質(zhì)。如N、NH、NO-、NH+〔無機(jī)氮源〕蛋白2 3 3 4質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨〔有機(jī)氮源〕等。只有固氮微生物才能利用N。2·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是那么需要提供無氧的條件·無菌技術(shù)·獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，要注意以下幾個方面：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)展清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)展滅菌。③為防止周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)展。④實驗操作時應(yīng)防止已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？答：無菌技術(shù)還能有效防止操作者自身被微生物感染?！は九c滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體外表或部一局部對人體有害的微生。滅菌。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。比擬項 理化因素的作用強(qiáng)度 消滅微生物的數(shù)量 芽孢和孢子能否被消比擬項 理化因素的作用強(qiáng)度 消滅微生物的數(shù)量 芽孢和孢子能否被消消毒 較為溫和 局部生活狀態(tài)的微生物 不能滅菌 強(qiáng)烈 全部微生物 能制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基〔1〕方法步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板?！?〕倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿翻開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基〔約10～20mL〕倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上?！さ蛊桨宀僮鞯挠懻撆囵B(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50溫度？可以進(jìn)展倒平板了。為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？培養(yǎng)微生物嗎？為什么？培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌〔1〕微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。〔2逐步稀釋的子細(xì)胞群體，這就是菌落?！?〕稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)展一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表，進(jìn)展培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。〔4〕用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基外表形成單個的菌落，以便于純化菌種?！?〕平板劃線法操作步驟：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并翻開棉塞。③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管通過火焰并塞上棉塞⑥左手將皿蓋翻開一條縫隙右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。⑦灼燒接種環(huán)，其冷卻后，從第 一區(qū)域劃線的末端開場往第二區(qū)域劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域劃線。注意不要將最 后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。·平板劃線操作的討論需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開場劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開場，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落?！?〕涂布平板操作的步驟：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基外表。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基外表。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)展無菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證"無菌〞。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。菌種的保存〔1〕對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。①臨時保藏方法放入4℃的冰箱中保藏。以后每3～6個月，都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。②缺點：這種方法保存的時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異?！?〕對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20℃的冷凍箱中保存。疑難解答〔1〕生物的營養(yǎng)生殖所需的外源物質(zhì)。人及動物的營養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。植物的營養(yǎng)物質(zhì)：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類?！?〕確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2天，無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否那么需要重新制備。課題二土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計數(shù)尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的篩選菌株〔1〕實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有利于目的菌株生長的條件〔包括營養(yǎng)、溫度、pH等〕，同時抑制或阻止其他微生物生長?！?〕選擇性培養(yǎng)基?！?〕配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)物；參加高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計菌落數(shù)目〔1〕測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)?！?〕稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理般設(shè)置3～5個平板，選擇菌落數(shù)在30～300。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。采用此方法的考前須知：1.一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)展計數(shù)2.為了防止菌落蔓延，影響計數(shù)，可在培養(yǎng)基中參加TTC3.本法僅限于形成菌落的微生物設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。實驗設(shè)計等的綜合考慮和安排?！?pH≈7的土壤中取樣。鏟去3～8cm的土壤層取樣?！?〕樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實際操作中，通30~300測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104105106測定放線菌的數(shù)量，一般選用103 104105測定真菌的數(shù)量，一般選用102 103104〔3〕微生物的培養(yǎng)與觀察不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細(xì)菌30~37℃1~2天放線菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天每隔24疑難解答〔1〕如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)？3C/V*M其中，代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積〔ml〕，M代表稀釋倍數(shù)課題三分解纖維素的微生物的別離纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶〔1〕棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素?！?C1CX成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)。纖維素分解菌的篩選〔1〕篩選方法：剛果紅染色法。能夠通過顏色反響直接對微生物進(jìn)展篩選?！?〕剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。別離分解纖維素的微生物的實驗流程釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落〔1〕土壤采集選擇富含纖維素的環(huán)境?！?〕剛果紅染色法別離纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板〔3〕剛果紅染色法種類課題延伸固體發(fā)酵展定量的測定。疑難解答〔1〕為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境?！?〕將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集10cm左右腐殖土壤中?！?〕兩種剛果紅染色法的比擬-方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點是操作繁瑣，參加剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分?！?〕為什么選擇培養(yǎng)能夠"濃縮〞所需的微生物？專題三ＤＮＡ和蛋白質(zhì)技術(shù)課題一 ＤＮＡ的粗提取與鑒定·提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精?！NA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點？要使DNA溶解，需要使用什么濃度？要使DNA析出，又需要使用什么濃度？在0.14mol/L時溶解度最?。惠^高濃度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。·在溶解細(xì)胞中的DNA時，人們通常選用2mol/LNaCl溶液；將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水，以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機(jī)溶劑，但DNA卻不能溶于酒精〔特別是95％冷卻酒精〕，但細(xì)胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。DNA降解；DNA·采用DNA不溶于酒精的原理，可以到達(dá)什么目的？將DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)一步別離?！ぬ崛NA還可以利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時，應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值？蛋白酶，因為酶具有專一性，蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生影響。溫度值為60～80℃，因為該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀，而DNA不會變性。補(bǔ)充：DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋，其溫度在80℃以上，如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95℃?！は礈靹┰谔崛NA中有何作用？洗滌劑將細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，從而瓦解細(xì)胞膜?！ぎ?dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時，需要使用什么指示劑進(jìn)展鑒定？在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色。原理總結(jié)：通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以從細(xì)胞中提取和提純DNA劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。實驗材料的選取. z.-不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時，應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原那么。本實驗用雞血細(xì)胞做實驗材料有兩個原因。一是因為雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富，材料易得；二是雞血細(xì)胞極易吸水脹破，而用動物肝臟細(xì)胞作實驗材料常常需要勻漿和離心，對設(shè)備要求較高，操作繁瑣，歷時較長。雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取過程中為了減少DNA的損失，最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細(xì)胞液。破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液·假設(shè)選用雞血和洋蔥作實驗材料，那么怎樣獲取含DNA的濾液？在雞血細(xì)胞液中參加一定量蒸餾水并用玻棒攪拌，過濾后收集濾液；切碎洋蔥，參加一定量洗滌劑和食鹽，攪拌研磨，過濾后收集濾液?！槭裁磪⒓诱麴s水能使雞血細(xì)胞破裂？再加上攪拌的機(jī)械作用DN?！ぴ谝陨蠈嶒炛校瑓⒓诱麴s水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？過濾時應(yīng)中選用〔濾紙、尼龍布〕。血細(xì)胞在蒸餾水量吸水而裂；洗滌劑瓦解細(xì)胞膜；食鹽溶解DNA物質(zhì)；選用尼龍布進(jìn)展過濾?！ぴ谔幚碇参锝M織時需要進(jìn)展研磨，其目的是什么？研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果？破碎細(xì)胞壁，使核物質(zhì)容易溶解在NaCl溶液中；研磨不充分會使DNA的提取量減少，影響實驗結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。。具體做法。10mL雞血＋20mL蒸餾水→同方向攪拌→3層尼龍布過濾→濾液去除濾液中的雜質(zhì)為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)？用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此，通過反復(fù)溶解與析出DNADNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)，需要進(jìn)一步提純DNA。方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。方案二與方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA別離。析出與鑒定·在濾液中仍然含有一些雜質(zhì)，怎樣除去這些雜質(zhì)呢？得到的DNA呈何顏色？濾液與等體積的冷卻酒精混合均勻，靜置2～3分鐘，析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色?！ぴ鯓予b定析出的白色絲狀物就是DNA呢？具體做法。試管2支，編號甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物，使之溶解→各加4mL二苯胺，混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化實驗操作. z.-制備雞血細(xì)胞液… 加檸檬酸鈉，靜置或離心↓破碎細(xì)胞，釋放DNA…加蒸餾水，同一方向快速通方向攪拌↓→過濾，除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等。溶解核DNA 參加NaCl至2mol/L，同一方向緩慢攪拌↓DNA析出… 加蒸餾水至0.14mol/L，過濾，在溶解到2mol/L溶液中↓→除去細(xì)胞質(zhì)中的大局部物質(zhì)。DNA初步純化… 與等體積95％冷卻酒精混合，析出白色絲狀物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鑒定… 二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍(lán)色料燒杯；使用尼龍布過濾；玻棒沿同一方向攪拌；玻棒攪拌要緩慢〔細(xì)胞破裂快速攪拌玻棒不要碰到燒杯壁；二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。課題二酵母細(xì)胞的固定化一、實驗原理1．使用固定化酶技術(shù)，將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上，再將這些酶顆粒裝到一個反響柱，柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔，而反響溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中，將葡萄糖溶液從反響柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反響柱，與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反響柱的下端流出。反響柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產(chǎn)本錢，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。2．固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。一般來說，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定，而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因為細(xì)胞個大，。固定化細(xì)胞優(yōu)點：本錢更低，操作更容易，可以催化一系列的化學(xué)反響。二、實驗步驟1稱取lg干酵母，放入50mL的小燒杯中，加人蒸餾水101h【注】活化：讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)2。配制物質(zhì)的量濃度為0.05mo1/L的CaCl溶液稱取無水CaCl0.83g。放人200mL的燒杯中，150mL3。配制海藻酸20.7g入50mL小燒杯中。加人10mL水，用酒精燈加熱，邊加熱邊攪拌，將海藻酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸餾水定容至10mL4將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加人已活化的醉母細(xì)胞，進(jìn)展充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，再轉(zhuǎn)移至注射器中?！咀ⅰ坷鋮s至室溫的目的：防止殺死酵母菌5。固定化酵母細(xì)胞以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl溶液中，觀察液滴在CaCl溶液中形成凝膠珠的情形。將這些凝膠珠在CaCl溶液中浸泡302in左右。 2【注CaCl溶液的作用：使膠體聚沉 26使用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵2-3將150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為200mL. z.--.z..z.酵母細(xì)胞，置于25℃下發(fā)酵24h。三、考前須知配制海藻酸鈉溶液：小火、連續(xù)加熱、定容，如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。海藻酸鈉溶液與酶母細(xì)胞混合：冷卻后再混合，注意混合均勻，不要進(jìn)入氣泡制備固定化酵母細(xì)胞：高度適宜，并勻速滴入剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCL2溶液中浸泡一段時間，以便Ca2+與Na+充分交換，形成的凝膠珠的顏色和形狀固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少要再作嘗試。一、實驗原理

課題三 血紅蛋白的提取和別離蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì)：形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別，由此提取和別離各種蛋白質(zhì)。凝膠色譜法〔分配色譜法〔1〕原理：分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒部，路程長，流動慢?！?〕凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖?！?〕別離過程：混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子＊洗脫：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。〔4〕作用：別離蛋白質(zhì)，測定生物大分子分子量，蛋白質(zhì)的脫鹽等。2．緩沖溶液〔1〕原理：由弱酸和相應(yīng)的強(qiáng)堿弱酸鹽組成〔如HCO－NaHCO，NaHPO4/NaHPO等，調(diào)節(jié)酸和鹽的用量，可配制不同pH的緩沖液。2 3

3 2 2 4〔2〕緩沖液作用：抵抗外界酸、堿對溶液pH的干擾而保持pH穩(wěn)定。3．凝膠電泳法：〔1〕原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、