W23073微土壤有效磷的測(cè)定

土壤有效磷的測(cè)定生產(chǎn)環(huán)境與農(nóng)業(yè)投入品檢測(cè)

土壤中磷的形態(tài)及轉(zhuǎn)化1土壤有效磷測(cè)定方法2目錄

鹽酸-氟化銨浸提-鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量31土壤中磷的形態(tài)及轉(zhuǎn)化磷的形態(tài)磷的轉(zhuǎn)化土壤中磷的形態(tài)及轉(zhuǎn)化土壤含磷量主要取決于母質(zhì)類型。我國(guó)土壤全磷（P）含量一般為0.02～0.11%，并有從南到北漸增的地域變化趨勢(shì)。但耕地土壤受耕作施肥等人為因素的影響，全磷量的局部變異很大。土壤磷的形態(tài)可分為無(wú)機(jī)態(tài)磷和有機(jī)態(tài)磷兩大類。（一）磷的形態(tài)無(wú)機(jī)態(tài)磷無(wú)機(jī)態(tài)磷水溶態(tài)磷吸附態(tài)磷礦物態(tài)磷H3PO4H++H2PO4-

H2PO4-H++HPO42-

HPO42-H++PO43-

Fe-P（鐵磷）Al-P（鋁磷）Ca-P（鈣磷）O-P（閉蓄態(tài)磷）酸性土壤石灰性土壤有機(jī)態(tài)磷

一般占土壤表層全磷的15～80%，隨土壤有機(jī)質(zhì)含量增加而增加。一般需經(jīng)礦化為無(wú)機(jī)磷后才能被植物吸收利用。土壤有機(jī)磷的化學(xué)組成，目前大部分為未知，已知者主要有3種。有機(jī)態(tài)磷植素類核酸類磷脂類植酸與鈣、鎂等離子結(jié)合而成。一般占土壤有機(jī)磷總量的20～30%。含磷、氮的復(fù)雜有機(jī)化合物。占土壤有機(jī)磷總量的1～10%。醇、醚溶性的有機(jī)磷化合物，一般約占土壤有機(jī)磷總量的1%。容易分解礦化為磷酸。土壤中磷的形態(tài)及轉(zhuǎn)化（二）磷的轉(zhuǎn)化1．土壤磷的有效化過(guò)程

有機(jī)態(tài)磷和難溶性磷酸鹽在一定條件下，轉(zhuǎn)化為植物可以吸收利用的水溶性的磷酸鹽或弱酸溶性的磷酸鹽的過(guò)程是其有效性提高的過(guò)程，通常稱之為磷的釋放。2．土壤磷的無(wú)效化過(guò)程

易溶性或速效態(tài)磷酸鹽轉(zhuǎn)化為難溶性遲效態(tài)和緩效態(tài)的過(guò)程，通常稱之為磷的固定。土壤中磷的固定是非常普遍的。

土壤中磷的形態(tài)及轉(zhuǎn)化（二）磷的轉(zhuǎn)化?缺磷導(dǎo)致作物植株矮小，禾谷類作物分蘗減少，葉色暗綠。?土壤中有效磷含量：指能為當(dāng)季作物吸收的磷量。?土壤中磷的有效性：指土壤中存在的磷能為植物吸收利用的程度，有的比較難，有的比較容易。?有效磷：也稱速效磷，包括水溶性磷、部分或全部吸附態(tài)磷和易礦化有機(jī)磷以及某些易溶解的沉淀態(tài)磷酸鹽，測(cè)定時(shí)浸提劑不同測(cè)定結(jié)果也不同。能較好地反映土壤近期的供磷水平，但含量低，季節(jié)波動(dòng)大，需在生長(zhǎng)季定期監(jiān)測(cè)才能確切說(shuō)明問(wèn)題。因此：為了明確生長(zhǎng)季土壤供磷水平，獲得高產(chǎn)，測(cè)定土壤有效磷含量。2土壤有效磷測(cè)定方法影響有效磷提取的因素Olsen法Bray1法（一）影響有效磷提取的因素土壤有效磷測(cè)定方法1、提取劑的種類：

F->檸檬酸>HCO3->CH3COO->SO42->Cl-2、水土比例：水土比越大浸提磷量越大；3、振蕩強(qiáng)度：振蕩轉(zhuǎn)速、振蕩時(shí)間；4、溫度的影響：隨著溫度升高而增加。（二）Olsen法土壤有效磷測(cè)定方法中性和石灰性土壤有效磷測(cè)定—0.5mol·L-1NaHCO3法方法原理：石灰性土壤由于大量游離碳酸鈣存在，不能用酸溶液來(lái)提取有效磷。一般用碳酸鹽的堿溶液。由于碳酸根的同離子效應(yīng)，碳酸鹽的堿溶液降低碳酸鈣的溶解度，也就降低了溶液中鈣的濃度，這樣就有利于磷酸鈣鹽的提取。同時(shí)由于碳酸鹽的堿溶液，也降低了鋁和鐵離子的活性，有利于磷酸鋁和磷酸鐵的提取。此外，碳酸氫鈉堿溶液中存在著OH-，HCO3-，CO32-等陰離子有利于吸附態(tài)磷的置換，因此NaHCO3不僅適用石灰性土壤，也適應(yīng)于中性和酸性土壤中速效磷的提取。待測(cè)液中的磷用鉬銻抗試劑顯色，進(jìn)行比色測(cè)定。（三）Bray1法土壤有效磷測(cè)定方法酸性土壤有效磷測(cè)定—0.03mol·L-1NH4F-0.025mol·L-1HCl法方法原理：NH4F-HCl法主要提取酸溶性磷和吸附磷包括大部分磷酸鈣和一部分磷酸鋁和磷酸鐵，因?yàn)樵谒嵝匀芤褐蟹x子能與三價(jià)鋁離子和鐵離子形成絡(luò)合物，促使磷酸鋁和磷酸鐵的溶解。3鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量原理儀器、試劑操作過(guò)程（一）原理鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量用NH4F-HCl溶液浸提土壤有效磷，用鉬銻抗法定量浸出液中的磷。土液比為1:10，振蕩30min，溫度為20℃。

F-的作用:

（1）F-能與Al3+、Fe3+形成絡(luò)合物（AlF63-），從而降低Al3+、Fe3+濃度，使磷浸出；（2）F-、Cl-等的交換作用（解吸作用），使吸附磷被浸出。3NH4F+3HF+AlPO4→H3PO4+(NH4)3AlF63NH4F+3HF+FePO4→H3PO4+(NH4)3FeF6（二）儀器、試劑鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量1.儀器2.試劑（1）分光光度計(jì)或紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)；恒溫（控溫20-25℃）往復(fù)式或旋轉(zhuǎn)式振蕩機(jī)，或放置在恒溫室內(nèi)的普通振蕩機(jī)，滿足180r·min-1±20r·min-1的振蕩頻率或達(dá)到相同效果；（2）塑料瓶：200mL；

（3）無(wú)磷濾紙。（二）儀器、試劑鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量1.儀器2.試劑1.氟化氨一鹽酸浸提劑［c(NH4F)＝0.03mol·L－1-c(HCL)＝0.025mol·L－1］；2.酒石酸銻鉀溶液[ρ（KSbOC4H4O6·?H2O）＝5g·L-1]；3.硫酸溶液[ψ（H2SO6）＝5％]；4.硫酸鉬銻貯備液，貯于棕色試劑瓶中;5.鉬銻抗顯色劑，此溶液有效期不長(zhǎng)，應(yīng)用時(shí)現(xiàn)配;6.磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液〔ρ(P)＝100μg·mL－1〕,該溶液放入冰箱可供長(zhǎng)期使用;7.磷標(biāo)準(zhǔn)溶液〔ρ(P)＝5μg·mL－1〕,該溶液用時(shí)現(xiàn)配;8.二硝基酚指示劑;9.氨水溶液（1：3）;10.硼酸溶液〔ρ（H3BO3)＝30g·L－1〕。（三）操作過(guò)程鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量稱取通過(guò)2mm孔徑篩的風(fēng)干試樣5.00g置于250mL塑料瓶中

加入20~25℃氟化氨-鹽酸浸提劑50.0mL在20~25℃恒溫條件下振蕩30min±1min（振蕩頻率180r·min-1

±20r·min-1)取出后立即用無(wú)磷濾紙干過(guò)濾于試管中。同時(shí)做空白試驗(yàn)。吸取濾液5.00或10.00mL（含磷5.00一20.00μg）

于50mL容量瓶中

加入l0mL30g·L－1硼酸溶液

搖勻

加水至30mL左右

再加入二硝基酚指示劑二滴

用5％硫酸溶液和1：3氨水溶液調(diào)節(jié)溶液剛顯微黃色

加入鉬銻抗顯色劑5.00mL用水定容至刻度

充分搖勻

在室溫高于20℃處放置30min，顯色。用1cm光徑比色皿在波長(zhǎng)700nm處比色，測(cè)量吸光度。浸提：顯色：測(cè)定：（三）操作過(guò)程鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量校準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液〔ρ(P)＝5μg·mL－1]0，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00mL于50mL比色管中，加入與吸取待測(cè)液等量體積的浸提劑，加入10mL30g·L-1硼酸溶液，搖勻，加水至30mL左右，再加入二硝基酚指示劑二滴，用5％硫酸溶液和1:3氨水溶液調(diào)節(jié)溶液剛顯微黃色。加顯色劑5.00mL，搖勻，加水定容至刻度。此系列溶液中磷的濃度依次為0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50，0.60μg·mL-1。在室溫高于20℃處放置30min后，用1cm光徑比色皿在波長(zhǎng)700nm處比色，用系列溶液的零濃度調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)進(jìn)行比色，測(cè)量吸光值，繪制校準(zhǔn)曲線或計(jì)算回歸方程。AmAAXmXm（三）操作過(guò)程鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量需注意：①本方法所規(guī)定的酸度及鉬酸銨濃度下，鉬銻抗法顯色以20-40℃為宜，如室溫低于20℃，可放置在30-40℃烘箱中保溫30min，取出冷卻后比色。②本法鉬藍(lán)顯色液比色時(shí)用880nm波長(zhǎng)比700nm更靈敏，但需用紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)。（四）結(jié)果計(jì)算鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量有效磷（P)，

mg·kg－1＝ρ·V·D×1000/（m×103）式中：ρ—查校準(zhǔn)曲線或求回歸方程而得測(cè)定液中P的質(zhì)量濃度，μg·mL－1V―顯色液體積，50mL；D―分取倍數(shù)，即試樣提取液體積／顯色時(shí)分取體積，本試驗(yàn)為50/(5-10)；103和1000―分別將μg換算成mg和將g換算為kg；m―風(fēng)干試樣質(zhì)量，g。平行測(cè)定結(jié)果以算術(shù)平均值表示。（四）結(jié)果計(jì)算鹽酸-氟化銨浸提鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量精密度：

平行測(cè)定結(jié)果的允許誤差：測(cè)定值（P,mg·kg－1）

允許差（P，mg·kg－1)<10絕對(duì)差值≤0.510-20絕對(duì)差值≤1.0>20相對(duì)相差≤5%

1.土壤中磷