2020-2021學年生物人教版選修3學案：1動物細胞培養(yǎng)和核移植技術

2.2動物細胞工程2.1動物細胞培養(yǎng)和核移植技術知識導圖韌培襄動艙和枝應焙器細植克休嵇Jltift物榜術訪動#,技媵-知識導圖韌培襄動艙和枝應焙器細植克休嵇Jltift物榜術訪動#,技媵-I祗卷,瑾兼件,應用三贏建植概念:像她祀枝密植的過程學法指導［應用前景及存在的問國l構莖動物細胞培養(yǎng)的i流程圖.區(qū)分原代培赤和傳i代培耙.理解時物甑.胞康.養(yǎng)的i#條件，北其是需加勃物也精濯的目的、C5的作用等；ip.結合高產彬牛的克性:過程.住捏動朝俅細胞枝裱!殖技術O訪翰細施培養(yǎng)的過程和條i件，動物體相胞核移植的過程、|克隆動物的特征與應用等是高i?？忌目拯c7試掘中常擠動；物細胞培養(yǎng)與植物期蛆培養(yǎng)比|程相比較，將敵材班胞睛養(yǎng)的!條件與克窿動物的奇宵及其應i用相結合進行考查.充分俅理i科學黑珍和社身責住第生物學!核心素裁。士課堂探究破重難， 本欄目通過課堂陪冗動T好叫.剖析難點.全線突觸知識點一動物細胞培養(yǎng)?研讀教材夯基礎.動物細胞培養(yǎng)的概念從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。.動物細胞培養(yǎng)的過程取動物 剪碎一單個加培養(yǎng)液,細胞組織塊胰蛋白酶或膠原蛋百面處1鏟細胞 *懸液原代培養(yǎng),細胞貼咦蛋目酶或一細胞傳代培養(yǎng)細胞T壁生長膠原蛋白酶斑直懸液 T群體說明：胰蛋白酶的作用是消化細胞間的蛋白，使組織分散成單個細胞。.動物細胞培養(yǎng)中的相關概念(1)細胞貼壁：將培養(yǎng)液中分散的動物細胞放入培養(yǎng)瓶中，置于適宜的條件下培養(yǎng)，細胞很快會貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。(2)接觸抑制：當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制。注意：①打破接觸抑制現象的方法：將貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。②癌變細胞沒有接觸抑制現象。(3)原代培養(yǎng)：將動物組織通過酶或機械方法分散成單個細胞后進行的初次培養(yǎng)。(4)傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細胞生長、繁殖一定時間后，由于空間不足或細胞密度過大導致營養(yǎng)枯竭，影響細胞的生長，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進行分瓶擴大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。(5)細胞株：細胞培養(yǎng)過程中存活10代到40?50代的傳代細胞。(6)細胞系：動物細胞培養(yǎng)過程中存活超過50代的細胞，這時細胞帶有癌變特點，能在培養(yǎng)條件下無限分裂下去。.動物細胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具要進行無菌處理；通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染；應定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。(2)營養(yǎng)：主要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。在使用含有上述成分的合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等天然成分。(3)溫度和pH：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數細胞生存的適宜pH為7?2?7?4。(4)氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2,O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。.動物細胞培養(yǎng)技術的應用(1)生產有重要價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。(2)獲取基因工程的受體細胞。(3)用于檢測有毒物質及其毒性。(4)用于生理、病理、藥理等方面的研究，如用于篩選抗癌藥物等,為治療和預防癌癥及其他疾病提供理論依據。跟隨名師解疑難植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的異同

比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)區(qū)別原理植物細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基固體或半固體培養(yǎng)基，包括礦質元素、蔗糖、維生素、瓊脂、植物激素等液體培養(yǎng)基,包括無機鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸、動物血清等培養(yǎng)條件再分化階段需先不需光細胞來源離體植物器官、組織或細胞胚胎或幼齡動物組織、器官結果獲得新個體或細胞產品大量產生細胞或細胞產物用途①快速繁殖名貴花卉和果樹②培養(yǎng)無病毒植株、轉基因植物③大規(guī)模生產細胞產品如藥物、食品添加劑、香料、色素等①生產蛋白質制品如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等②檢測有毒物質③研究生理、藥理、病理相同點①都需要人工條件下的無菌操作，無菌培養(yǎng)②都是合成培養(yǎng)基③都需要適宜的溫度、pH等條件④都進行有絲分裂【典題精練1】關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.用于培養(yǎng)的細胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B.將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成細胞懸液D,動物細胞培養(yǎng)只能傳50代左右，如繼續(xù)培養(yǎng)，細胞會衰老死亡【解析】選取胚胎或幼齡動物的器官或組織是因為它們的分裂能力較強。動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質，易被胰蛋白酶催化分解，從而使細胞分離開來。當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時細胞就會停止分裂增殖，需要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來，配成細胞懸液。動物細胞培養(yǎng)傳至50代左右，部分細胞的遺傳物質會發(fā)生改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c，能在培養(yǎng)條件下無限制地分裂下去?！敬鸢浮緿解題歸納（1）植物組織培養(yǎng)可獲得新個體，體現了細胞的全能性，而動物細胞培養(yǎng)只能得到細胞，沒有體現細胞的全能性。（2）植物組織培養(yǎng)中需要加入植物激素等促生長因子，而動物細胞培養(yǎng)基中需要加入血清、血漿?！镜漕}精練21下列關于細胞培養(yǎng)的敘述正確的是（）A.動物細胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是動物受精卵B.動物細胞培養(yǎng)液中需要O2,不需要CO2C.細胞系在實驗室中被廣泛應用是因為其遺傳物質保持了長時間的穩(wěn)定D.動物細胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理【解析】動物細胞培養(yǎng)大都取自動物胚胎或剛出生不久動物的組織或器官；動物細胞培養(yǎng)液中需要適量的CO2，以維持培養(yǎng)液的pH；細胞系的細胞遺傳特征發(fā)生變化，具有無限增殖的特點；用胰蛋白酶處理使動物細胞分散，不會出現接觸抑制現象?！敬鸢浮緿知識點二動物體細胞核移植技術和克隆動物

研讀教材夯基礎.動物核移植的概念將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。哺乳動物核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植。.體細胞核移植的過程取具有優(yōu)良性狀 ^細胞_J共體個體的供體細胞—"培養(yǎng)"細胞|一細胞_構建重收集卵巢，采―—體外逑數曼［生去核的卵,T融合一^且胚胎集卵母細胞T培養(yǎng)分裂中期T母細胞得到克隆動物(與供體的.

得到克隆動物(與供體的.

遺傳物質基本相同)*移入受體(代孕)母體內注意：動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，因為與胚胎細胞相比，動物體細胞分化程度高，恢復其全能性十分困難。.動物體細胞核移植技術中的注意點(1)受體細胞一般選用卵母細胞，因為卵母細胞體積大，易操作，而且含有促使細胞核表達全能性的物質和營養(yǎng)條件。(2)動物體細胞核移植產生的新個體的親本有三個:體細胞核供體、卵母細胞細胞質供體、代孕母體。新個體細胞核基因型與體細胞核供體完全一樣，因此新個體性狀與體細胞核供體基本相同。代孕母體沒有為新個體提供遺傳物質，新個體性狀與代孕母體基本沒有聯系。(3)用核移植技術得到的動物，并不是對體細胞供體的動物進行100%的復制，因為克隆動物絕大部分DNA來自供體細胞，但其細胞質中還有少量DNA,即線粒體中的DNA是來自受體卵母細胞的。此外，動物的一些行為、習性的形成與所處環(huán)境也有很大關系。4.體細胞核移植技術的應用前景(1)加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育；(2)增加瀕危動物的存活數量；(3)生產珍貴的醫(yī)用蛋白；(4)用于組織器官的移植(由轉基因克隆動物提供或由人的核移植胚胎干細胞經過誘導分化形成的組織、器官提供)；(5)用于科學研究。5.體細胞核移植技術存在的問題(1)成功率非常低；(2)克隆動物存在健康問題；(3)克隆動物食品的安全性存在爭議等。跟隨名師解疑難克隆動物的遺傳物質的兩個來源(1)核遺傳物質來源于供核細胞。(2)細胞質遺傳物質來源于提供細胞質的細胞。【典題精練3】實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()實驗小鼠三皮膚組織三皮膚細胞懸液旦細胞群體1工細胞群體2A.甲過程需要對實驗小鼠進行消毒B.乙過程需要用胰蛋白酶等處理皮膚組織，使細胞分散開C.丙過程表示原代培養(yǎng)，該過程中會出現接觸抑制現象D.丁過程表示傳代培養(yǎng)，細胞不能保持正常的二倍體核型【解析】離體動物細胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境，甲過程表示從實驗小鼠身上取下皮膚組織，該過程需要對小鼠進行消毒，A正確；皮膚細胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶等處理皮膚組織使細胞分散開，并制成細胞懸液，B正確；丙過程表示原代培養(yǎng)，該過程中會出現接觸抑制現象，C正確；丁過程表示傳代培養(yǎng)，該過程中少部分細胞的遺傳物質可能會發(fā)生變化，但其他細胞能保持正常的二倍體核型，D錯誤?！敬鸢浮緿解題歸納本題題干給出兩個重要信息：①小鼠皮膚細胞，屬于高等哺乳動物細胞，通常為有限細胞系，而連續(xù)細胞系大多數具有異倍體核型；②非克隆培養(yǎng)即不是從單個細胞開始進行的動物細胞培養(yǎng)，而未經克隆化的細胞系具有異質性?！镜漕}精練4】如圖表示動物體細胞核移植與克隆動物的相關圖解，下列有關敘述錯誤的是（）供體細胞①f細胞培養(yǎng)--供體細胞注入I\電剌激融合事蛆③-代至克隆采集卵培養(yǎng)至②期手楊_尹松）的/分一：發(fā)育尸胚胎—"母體—動物什刑州 母細胞A.圖示過程說明高度分化的動物體細胞的細胞核仍具有全能性B.用于核移植的供體細胞①一般都選用傳代10代以內的細胞。采集的卵母細胞培養(yǎng)到的②期表示減數第二次分裂后期D.選用去核的卵母細胞的主要原因是其細胞質可使體細胞核的全能性得以體現【解析】圖中顯示的是利用動物體細胞核移植技術克隆動物的過程，說明高度分化的動物體細胞的細胞核仍具有全能性，A正確；用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內的細胞，原因是此種細胞能保持正常的二倍體核型，B正確；圖中采集到的卵母細胞需培養(yǎng)到減數第二次分裂中期，C錯誤；動物體細胞核移植時常選用去核的卵母細胞作受體細胞，除卵母細胞體積大、易操作、能提供營養(yǎng)物質外，更主要的是去核的卵母細胞的細胞質可使體細胞核的全能性得以體現，D正確?！敬鸢浮緾4課堂對點達標繼_/ 科目通過課堂自主達標,巧姊經哌蟀基提他.全麗提升一、選擇題1.下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（C）A.用于培養(yǎng)的細胞多取自動物胚胎或幼齡動物的組織或器官B.培養(yǎng)過程中需要使用胰蛋白酶等，獲得離散的細胞C,動物細胞培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)液的組成成分相同D.動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎解析：動物細胞培養(yǎng)液中一般要加動物血清。.動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質。下圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結果。不能從該圖獲得的結論是（A）細臀 癌細胞（方血清）癌細胞（無血清）一正常細胞t有血清〕曲二 正常細胞（無血清）培養(yǎng)時間血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)的影響A.正常細胞與癌細胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細胞培養(yǎng)的影響不同C?培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞的培養(yǎng)影響不大解析：本題考查動物細胞培養(yǎng)所需要的條件和坐標曲線的識圖能力。在動物細胞培養(yǎng)過程中需要添加一定量的血清。從坐標曲線我們可以看出：正常細胞在有血清的情況下細胞數目多于沒有血清的情況，癌細胞在有血清的情況下細胞數目多于沒有血清的情況但差值不太大；在相同培養(yǎng)條件下癌細胞的數目多于正常細胞數，說明癌細胞增殖速率高于正常細胞。.下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（D）A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數細胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數通常是無限的D.惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)解析：本題考查動物細胞的培養(yǎng)和克隆等知識點，意在考查考生對動物細胞培養(yǎng)知識的理解。由于接觸抑制，培養(yǎng)的動物細胞在培養(yǎng)瓶壁貼壁生長，只能形成單層細胞，A錯誤；未經克隆化的細胞系具有異質性，經過克隆以后的細胞的后裔細胞群，由于來源于一個共同的祖細胞，稱為純系，其遺傳性狀均一，故基因型相同，B錯誤；二倍體細胞通常為有限細胞系，連續(xù)細胞系可認為是發(fā)生轉化了的細胞系，大多數具有異倍體核型，C錯誤；惡性細胞系屬于連續(xù)細胞系，具有異體致瘤性，可進行傳代培養(yǎng)，D正確。.下列關于細胞工程的敘述中，錯誤的是（C）A.動物細胞體外培養(yǎng)應保證無菌無毒的環(huán)境B.動物細胞培養(yǎng)的營養(yǎng)液中應添加動物血清C,經細胞核移植培育出的新個體只具有一個親本的遺傳物質D.動物體細胞核移植技術可以獲得用于器官移植的供體器官解析：本題考查細胞工程的含義。細胞核移植是將供體細胞的核移植入受體細胞的去核細胞質中，該重組細胞獲得的遺傳物質來自兩部分，一部分來自于供體核物質，一部分來自于受體細胞質，所以將來發(fā)育成的個體具有兩個親本的遺傳物質。ABD選項從不同的角度闡述了動物細胞培養(yǎng)所需要的條件和體細胞核移植技術的應用。.關于動物細胞培養(yǎng)的有關敘述中，正確的是（D）A.細胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中.動物細胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、生長素和動物血清等C,動物細胞培養(yǎng)的目的只是獲得大量的細胞分泌蛋白D.動物細胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理解析：細胞癌變發(fā)生在傳代培養(yǎng)時；生長素是植物激素，不能用于動物細胞培養(yǎng)；動物細胞培養(yǎng)可獲得大量的細胞分泌蛋白，也可用于檢測有毒物質等；動物細胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）將組織分散成單個細胞，動物細胞培養(yǎng)過程中為防止接觸抑制，也需要用胰蛋白酶將細胞分散開來。6.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是（A）A,動物細胞培養(yǎng)是培養(yǎng)單個細胞，植物組織培養(yǎng)是培養(yǎng)組織B.動物細胞培養(yǎng)可以傳代，而植物組織培養(yǎng)不能傳代C,動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同D.動物細胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生遺傳物質的改變，而植物組織培養(yǎng)不能解析：動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都有細胞分裂過程，因而細胞與組織均能傳代。二者所用培養(yǎng)基的成分大致相同，都有營養(yǎng)物質，但也有成分不同，如動物細胞培養(yǎng)有血清，而植物組織培養(yǎng)不需要血清。植物組織培養(yǎng)過程中，由于受外界環(huán)境條件的影響，細胞分裂時也可能發(fā)生基因突變、染色體變異而引起遺傳物質改變。植物組織培養(yǎng)一般用分生組織培養(yǎng)。7.在克隆牛的過程中，需要將甲牛的去核卵母細胞與乙牛的體細胞核重組形成重組細胞，將此細胞培養(yǎng)至胚胎發(fā)育的早期，然后移入代孕母牛的體內，最后即可得到克隆動物。下列關于克隆動物的敘述,錯誤的是（D）A.克隆技術利用了動物細胞核的全能性B.代孕母牛與所獲得的克隆牛之間不存在真正意義上的親子代關系C,該過程體現的方法為拯救瀕危動物提供了一種新思路D.核供體相同的克隆動物之間若進行器官移植，則會發(fā)生免疫排斥反應解析：核移植技術培育動物個體的原理是利用動物細胞核的全能性；因為代孕母牛并沒有將遺傳物質傳給克隆牛，故從遺傳學角度來說，它們之間并沒有親子代關系；核移植（克?。┘夹g的應用之一是拯救瀕危物種，擴大其種群數量；核供體相同的克隆動物的核遺傳物質并沒有差別，若進行器官移植則不會發(fā)生免疫排斥反應。8.下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（C）A.培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和血清.傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代后就不易傳下去了C,動物細胞培養(yǎng)一般都能夠傳到40?50代，但其遺傳物質均發(fā)生了改變D.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質和獲得大量自身的健康細胞解析：動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，通常還需加入血清、血漿等一些天然成分，A正確。傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代后就不易傳下去了，一般來說，細胞在傳至10?50代時，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細胞的細胞核型可能會發(fā)生變化，當繼續(xù)傳代培養(yǎng)時，少部分細胞會發(fā)生突變，獲得不死性，B正確、C錯誤。動物細胞可以用于檢測有毒物質、判斷某種物質的毒性，此外還可以獲得大量自身健康細胞,D正確。.下列對動物核移植技術的描述不正確的是（C）A.體細胞核移植過程中通常采用去核的Mil期卵母細胞作為受體細胞B.體細胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細胞中的細胞核C.哺乳動物核移植包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，動物體細胞核移植的難度明顯低于胚胎細胞核移植D.通過體細胞核移植方法生產的克隆動物沒有對供核動物進行100%的復制解析：體細胞核移植過程中通常采用去核的Mil期次級卵母細胞作為受體細胞，A正確；體細胞核移植的過程中，去除卵母細胞中的細胞核可采用顯微操作去核法，B正確；哺乳動物核移植包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，由于胚胎細胞的全能性高于體細胞，所以動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，C錯誤；通過體細胞核移植方法生產的克隆動物不是對供核動物進行了100%的復制，因為克隆動物還有一部分遺傳物質來自受體的細胞質，D正確。.下列與實驗相關的敘述不正確的是（B）A,培養(yǎng)動物細胞時，為防止細菌污染可加入適當抗生素B.植物組織培養(yǎng)時，接種前要對外植體進行滅菌處理以減少污染C,動物細胞培養(yǎng)時，需定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物D.植物組織培養(yǎng)時，適當調整植物激素的比例以利于愈傷組織形成和再分化解析：培養(yǎng)動物細胞時，為防止細菌污染可加入適當抗生素，A正確；植物組織培養(yǎng)時，接種前要對外植體進行消毒處理以減少污染,B錯誤；動物細胞培養(yǎng)時，需定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物，C正確；植物組織培養(yǎng)時，適當調整植物激素比例以利于愈傷組織形成和再分化，D正確。二、非選擇題11.回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：（1）用于動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液的成分有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相國鯉時，細胞會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制。此時，瓶壁上形成的細胞層數是單屋建二層）。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是胰蛋白酶（或邈蛋白酶）。（2）隨著細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現衰老甚至死亡的現象；但極少數細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發(fā)生改變而變成不死性細胞，該種細胞的黏著性降低細胞膜表面蛋白質（糖蛋白）的量減少。解析：（1）進行動物細胞培養(yǎng)，需要在培養(yǎng)液中加入一定量的動物血清，內含多種營養(yǎng)物質和生長因子。動物細胞培養(yǎng)中的兩個顯著特點是貼壁生長、接觸抑制。常用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理貼壁生長的細胞，以獲得分散的單個細胞。（2）傳代培養(yǎng)到一定代數后，大多數細胞會衰老死亡，少數細胞會因遺傳物質發(fā)生改變獲得不死性，這些細胞具有癌變的特點，細胞膜上的糖蛋白減少，細胞間的黏著性降低。12.科學家通過轉基因技術獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉基因奶牛的繁殖速度，可以對此轉基因奶牛進行克?。ㄈ缦聢D所示）。采集的卵母細胞轉入人生長激素基因的奶牛體細胞重組郎胞重組胚胎犢牛*細胞培養(yǎng)采集的卵母細胞轉入人生長激素基因的奶牛體細胞重組郎胞重組胚胎犢牛*細胞培養(yǎng)（1）在進行細胞培養(yǎng)之前，要對取自轉基因奶牛的組織進行分離，形成單個細胞，這一過程中需要利用胰量白酶處理，不能用纖維素酶與果膠酶的原因是酶具有專一性。（2）轉基因奶牛的克隆成功，說明動物細胞的細胞核具有全能性。（3）將進行細胞培養(yǎng)的供體細胞核注入去核的卵母細胞中，去掉卵母細胞核的目的是使犢牛的性狀主要由供體細胞核決定。（4）重組細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內會生出與供體奶牛遺傳性狀相同的犢牛，但也有可能出現性狀上的某些差異，原因可能是①生物的性狀受細胞核和細胞質共同控制；②生物的性狀還受環(huán)境因素的影響。（5）體細胞核移植技術得到的克隆牛從生殖方式上看屬于無隹生殖（選填“有性生殖”或“無性生殖”）。解析：（1）對動物組織進行分離，用胰蛋白酶處理，才能形成單個細胞。因為酶具有專一性，所以不能用纖維素酶和果膠酶將動物細胞分散開。（2）克隆動物的成功證明了動物細胞的細胞核具有全能性。（3）去掉卵母細胞核后，重組細胞的遺傳物質主要來自供體細胞核，其性狀主要由供體細胞核決定。（4）重組細胞發(fā)育而來的犢牛與供體奶牛不完全相同，因為重組細胞的遺傳物質主要來自供體細胞核，少量來自卵母細胞的細胞質，性狀還受環(huán)境的影響。（5）體細胞核移植沒有經過兩性生殖細胞的結合，所以從生殖方式上看屬于無性生殖。―問題點撥【［尋根問底］P44胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？［提示］胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。［旁欄思考題］P44進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？［提示］用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質主要是蛋白質。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2?8.4。多數動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細胞培養(yǎng)時的消化。［旁欄思考題］P46為什么對動物細胞進行培養(yǎng)時通常要添加血清？［提示］血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種，是細胞合成蛋白質的基本成分，其中有些氨基酸動物細胞本身不能合成（稱為必需氨基酸），必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子（如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、類胰島素樣生長因子等）；血清還含有多種未知的促細胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質，能促進細胞的生長、增殖和貼附。因此，細胞培養(yǎng)時，要保證細胞能夠順利生長和增殖，一般需添加10%?20%的血清。［討論］P46多細胞動物和人體的細胞都生活在內環(huán)境中，根據你所學的內環(huán)境的知識，思考并討論以下問題：.體外培養(yǎng)細胞時需要提供哪些物質？［提示］充足的營養(yǎng)供給、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境。.體外培養(yǎng)的細胞需要什么樣的環(huán)境條件？提示］無菌、無毒的環(huán)境。討論］P49.在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細胞的核？［提示］為使核移植的胚胎或動物的遺傳物質全部來自有重要利用價值的動物提供的體細胞，在供體細胞的細胞核移至受體細胞之前，必須將受體細胞的遺傳物質去掉或將其破壞。.用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞，想一想，這是為什么？［提示］培養(yǎng)的動物細胞一般當傳至10?50代左右時，部分細胞核型可能會發(fā)生變化，其細胞遺傳物質可能會發(fā)生突變，而10代以內的細胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細胞核移植中，為了保證供體細胞正常的遺傳基礎，通常選用傳代10代以內的細胞。3.你認為用上述體細胞核移植方法生產的克隆動物，是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？［提示］克隆動物絕大部分DNA來自于供體細胞核，但其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細胞。所以，用教材中所述的方法克隆的動物不是供核動物完全相同的復制。此外，即便動物的遺傳基礎完全相同，但動物的一些行為、習性的形成與所處環(huán)境有很大關系，核供體動物生活的環(huán)境與克隆動物所生活的環(huán)境不會完全相同，其形成的行為、習性也不可能和核供體動物完全相同,從這一角度看,克隆動物不會是核供體動物100%的復制。［異想天開］P50有了體細胞核移植技術生產的器官，我們就可以像汽車壞了換零件一樣，換掉生病的器官，這樣一來，人類是否就可以長生不老了？［提示］不可以，盡管體細胞核技術已經在許多種動物中獲得成功，但其成功率仍然非常低，產下的活克隆動物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%?？寺〖夹g的各個環(huán)節(jié)也有待進一步改進。此外，絕大多數克隆動物還存在健康問題，許多克隆動物表現出遺傳和生理缺陷。總之，體細胞核移植技術的研究仍在繼續(xù)深入，人類對克隆技術的應用還有許多問題需要解決。期待在不遠的將來，克隆技術能更好地造福于人類。N習題解答［思考與探究］P50.幼齡與老齡動物的組織細胞比較，分化程度低的與分化程度高的組織細胞比較，哪一種更易于培養(yǎng)？思考一下，這是什么道理？［提示］細胞的衰老與動物機體的衰老有著密切的關系，細胞的增殖能力與供體的年齡有關，幼齡動物細胞增殖能力強，有絲分裂旺盛,老齡動物則相反。所以，一般來說幼年動物的組織細胞比老年動物的組織細胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細胞的分化程度越低，則增殖能力越強，所以更容易培養(yǎng)。.動物細胞培養(yǎng)要經過脫分化的過程嗎？為什么？［提示］脫分化又稱去分化,是指分化細胞失去特有的結構和功能變?yōu)榫哂形捶只毎匦缘倪^程。植物的任何一部分，甚至單個細胞都具有長成完整植株的能