無菌檢查方法驗證報告(最終)

XXXXX材料科技有限公司文件類別：驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：1of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告XXXXX無菌檢查方法驗證報告驗證項目XXXXX無菌檢查方法驗證報告方案編碼VR-15-2018驗證報告審核單

XXXXX材料科技有限公司文件類別：驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：2of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告起草部門職務簽字日期質(zhì)量部無菌檢驗員審核部門職務部門職務質(zhì)量部主管簽字日期批準部門職務簽字日期生產(chǎn)技術(shù)部管理者代表目錄XXXXX材料科技有限公司文件類別：驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：3of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告目的范圍確認依據(jù)驗證組員和相關(guān)職責確認過程驗證結(jié)果及評價偏差與處理8再確認1.目的通過對培養(yǎng)基的無菌性檢查、靈敏度檢查，對產(chǎn)品的無菌檢查方法適用性進行試驗，證明該方法適用于產(chǎn)品無菌檢查日常檢測。XXXXX材料科技有限公司文件類別：驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：4of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告1.范圍適用于本公司產(chǎn)品的無菌檢查方法的建立和確認。2.確認依據(jù)中國藥典2015版3.驗證組員和相關(guān)職責4.1驗證組員審核和批準驗證方案組織協(xié)調(diào)驗證方案的實施記錄相關(guān)方案的修訂和偏差記錄和檢查方案實施過程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)根據(jù)變更控制，偏差的要求，組織相關(guān)的調(diào)查、糾正及預防協(xié)助質(zhì)量控制QC,質(zhì)量保證QA執(zhí)行所有和設(shè)備相關(guān)的驗證審核和批準方案的修訂和偏差審核和批準相關(guān)驗證試驗結(jié)果和驗證總結(jié)報告4.2質(zhì)量部QC編制驗證方案確保所有儀器儀表及測試設(shè)備在驗證之前校準根據(jù)變更控制偏差的要求,制定相關(guān)的偏差報告,參與調(diào)查,糾正及預防按照方案實施驗證,負責取樣檢測4.3質(zhì)量部主管審核驗證方案為方案實施提供支持提供支持驗證的相關(guān)SOP根據(jù)變更控制,偏差的要求,組織制定有關(guān)報告,進行相關(guān)的調(diào)查、糾正及預防審核相關(guān)方案的修訂和偏差XXXXX材料科技有限公司文件類別：驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：5of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告審核驗證試驗結(jié)果和驗證總結(jié)報告4.4管理者代表最終審核和批準的所有驗證方案最終審核和批準所有驗證總結(jié)報告最終審核和批準驗證過程中發(fā)生的所有偏差、變更等4.確認過程A儀器設(shè)備設(shè)備名稱設(shè)備編號設(shè)備型號設(shè)備狀態(tài)高壓蒸汽滅菌器PL-012LDZX-75KB-II□未檢定0已檢定在有效期內(nèi)生化培養(yǎng)箱PL-004LRH-150F□未檢定0已檢定在有效期內(nèi)霉菌培養(yǎng)箱PL-003MJ-150F-I□未檢定0已檢定在有效期內(nèi)旋渦混合器/VORTEX-5/B操作環(huán)境微生物限度檢查應在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。C稀釋液：0.9%無菌氯化鈉溶液D器具:一次性槍頭（已滅菌）移液器培養(yǎng)基的適用性檢查無菌檢查用的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基等應符合培養(yǎng)基的無菌性檢查及靈敏度檢查的要求。本檢查可在供試品的無菌檢查前或與供試品的無菌檢查同時進行。5.1.1培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基批號：1075511生產(chǎn)廠家：廣東環(huán)凱微生物科技有限公XXXXX材料科技有限公司文件類別：驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：6of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告司胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基批號：1076931生產(chǎn)廠家：廣東環(huán)凱微生物科技有限公司5.1.2無菌性檢查：每批培養(yǎng)基隨機取不少于5支(瓶)，置各培養(yǎng)基規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天，應無菌生長。5.1.3培養(yǎng)基的靈敏度檢查菌種:培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代(從菌種保存中獲得的冷凍干燥菌種為第0代)，試驗用菌種應采用適宜的菌種保存技術(shù)進行保存，以保證試驗菌株的生物學特性。金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(CMCC(B)26003)銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa(CMCC(B)10104)枯草芽抱桿菌(Bacillussubtilis)CMCGB63501)生抱梭菌(Clostridiumsporogenes)(CMCC(B)64941)白色念珠菌(Candidaalbicans)CMCC(F)98001)黑曲霉(Aspergilusnigen)CMCC(F)98003)5.1.4菌液制備接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上，接種生抱梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，30-35°C培養(yǎng)18-24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，20-25C培養(yǎng)24-48小時，上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每lml含菌數(shù)小于100cfu(菌落形成單位)的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基上，20-25C培養(yǎng)5-7天，加人3-5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液，將抱子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出抱子懸液至無菌試管內(nèi)用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含抱子數(shù)小于100cfu的抱子懸液。菌懸液若在室溫下放置，應在2小時內(nèi)使用，若保存在2-8C可在24小時XXXXX材料科技有限公司文件類別:驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：7of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告內(nèi)使用。黑曲霉抱子懸液可保存在2-8°C，在驗證過的貯存期內(nèi)使用。5.1.5培養(yǎng)基接種取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基7支，分別接種小于lOOcfu的金黃色葡藥球菌、鋼綠假單胞菌、生抱梭菌各2支，另1支不接種作為空白對照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基7支，分別接種小于100cfu的枯草芽抱桿菌、白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對照，培養(yǎng)5天。逐日觀察結(jié)果。5.1.6結(jié)果判定：空白對照管應無菌生長，若加菌的培養(yǎng)基管均生長良好，判定該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定。見附件無菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查記錄無菌檢查方法驗證試驗當建立產(chǎn)品的無菌檢查法時，應進行方法的驗證，以證明所采用的方法適合于本產(chǎn)品的無菌檢查。若本產(chǎn)品的組分或原檢驗條件發(fā)生改變時，檢查方法應重新驗證。驗證時，按“中國藥典2015版四部1101無菌檢查法”的規(guī)定進行操作。對每一試驗菌應逐一進行驗證。菌種及菌液制備金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、生抱梭菌、枯草芽抱桿菌、白色念珠菌、黑曲霉同培養(yǎng)基靈敏度檢查。直接接種法5.2.3.1醫(yī)用膠及配套無菌吸管的無菌檢測A樣品組:取0.5ml醫(yī)用膠迅速加入50ml已滅菌的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、或鹽酸硫乙醇流體培養(yǎng)基中，用旋渦混合器震蕩1分鐘，制成樣品組供試液。在每瓶供試液中加入10-100cfu試驗菌，作為醫(yī)用膠樣品組；用滅過菌的剪刀將配套無菌吸管剪碎全部投入另外一組50ml已滅菌的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、或鹽酸硫乙醇流體培養(yǎng)基中，步驟同醫(yī)用膠樣品組的制備，作為無菌吸管樣品組。B陽性對照組（菌液組）：取50ml已滅菌的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、或鹽酸硫乙醇流體培養(yǎng)基，往每瓶里面加入10T00cfu試驗菌，作為陽性對照組。XXXXX材料科技有限公司文件類別:驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：8of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告C陰性對照組：取一瓶50ml已滅菌的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，另外一瓶為50ml已滅菌的鹽酸硫乙醇流體培養(yǎng)基，作為陰性對照組。結(jié)果判斷與陽性對照組比較，樣品組中的試驗菌均生長良好，表明樣品的該檢驗量在該檢驗條件下其抑菌活性可以忽略不計。陰性對照組無菌生長，否則實驗無效。見附件無菌檢查方法驗證試驗記錄6驗證結(jié)果及評價通過培養(yǎng)基無菌性檢查、培養(yǎng)基靈敏度檢查、無菌檢查方法驗證，結(jié)果表明，制定的無菌檢查方法適用本公司的產(chǎn)品。評價人/日期：7偏差與處理在驗證實施過程中如出現(xiàn)偏差或變更，填寫“驗證偏差報告”對偏差進行調(diào)查和處理，并在“驗證偏差記錄表”中記錄本項驗證實施過程中發(fā)生的所有偏差。驗證周期8.1當培養(yǎng)基批號改變時須對培養(yǎng)基進行適用性檢查（無菌檢查、靈敏度檢查）8.2產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境或原料發(fā)生改變時須進行實驗方法的驗證8.3當檢測環(huán)境發(fā)生改變時須重新驗證附件

XXXXX材料科技有限公司文件類別:驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：9of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告無菌檢查方法驗證試驗記錄樣品名稱：樣品批號檢測日期：樣品數(shù)量試驗方法：依據(jù)中國藥典2015年版四部1101無菌檢查法：方法驗證試驗□薄膜過濾法□直接接種法硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基：30-35°C培養(yǎng)3天1醫(yī)用膠樣品組2無菌吸管樣品組3菌落組現(xiàn)象描述培養(yǎng)天數(shù)123451234512345金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌生抱梭菌陰性對照注：“+”為生長，“-”為不生長胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基：20-25C培養(yǎng)5天1醫(yī)用膠樣品組2無菌吸管樣品組3菌液組現(xiàn)象描述培養(yǎng)天數(shù)123451234512345枯草芽抱桿菌白色念珠菌

XXXXX材料科技有限公司文件類別:驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：10of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告碟號24小時48小時平均菌落數(shù)結(jié)論123結(jié)論：復核者/日期：檢驗者/日期：復核者/日期：無菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查記錄

被測培養(yǎng)基名稱批號來源被測培養(yǎng)基名稱批號來源一儀器XXXXX材料科技有限公司XXXXX材料科技有限公司文件類別:驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：11of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告版本號：00丨頁碼：11Of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告儀器名稱：生化培養(yǎng)箱型號：編號儀器名稱:霉菌培養(yǎng)箱型號：編號:二、檢驗方法培養(yǎng)基的無菌性檢查每批培養(yǎng)基隨機取不少于5支，培養(yǎng)14天,逐日觀察結(jié)果。培養(yǎng)基的靈敏度檢查□硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基：取每管裝量為12mL的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基7支，分別接種小于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、生抱梭菌各2支，另1支不接種作為空白對照。于30?35°C培養(yǎng)3天，逐日觀察結(jié)果。□胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基：取每管裝量為9mL的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基7支，分別接種小于100cfu的枯草芽抱桿菌、白色念珠菌、黑曲菌各2支，另1支不接種作為空白對照。于20?25C培養(yǎng)5天，逐日觀察結(jié)果。三、檢驗結(jié)果□培養(yǎng)基的無菌性檢查培養(yǎng)溫度：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基C胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基C咖氓甘培養(yǎng)基名稱官數(shù)培養(yǎng)時間（天）備注1234567891011121314硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基12345胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基12345

XXXXX材料科技有限公司文件類別:驗證報告文件編碼：VR-15-2018版本號：00頁碼：12of12XXXXX無菌檢查方法驗證報告結(jié)論□符合規(guī)定□不符合規(guī)定注：“+”為生長，“-”為不生長□培養(yǎng)基的靈敏度檢查細菌培養(yǎng)溫度°C3天霉菌及酵母菌培養(yǎng)溫度°C5天菌種類型培養(yǎng)基管數(shù)（支）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（天）空白對照123金