丹參藥材分析方法的確認

目錄概述確認目的適用范圍確認小組成員與職責確認方案的起草與審批確認內(nèi)容確認儀器及相關材料檢查鑒別（2）試驗的確認6.3.含量測定的確認偏差處理確認的結果與評價報告####丹參分析方法確認方案第1頁共6頁編號：文件編號：文件題目：丹參分析方法確認方案部門：GMP辦公室文件類型：修訂：寸起草：日期： 年月曰QA審閱：日期： 年月曰批準：日期： 年月曰頒發(fā)部門：GMP辦公室審核：日期： 年月曰執(zhí)行日期：年 月曰分發(fā)部門：質量管理部概述丹參藥材收載于《中國藥典》2010年版第二增補本，鑒別（2）及含量測定項下的檢驗方法有所改變，因此按照2010新版GMP要求，需要進行分析方法確認。本確認方案使用薄層色譜法對鑒別檢驗方法進行確認，再使用高效液相色譜儀對含量測定的檢驗方法進行確認，證明此方法在本公司實驗室的適用性。確認方式按2010年修訂版及2010年版藥品GMP指南質量控制實驗室與物料系統(tǒng)分析方法確認的確認方式中的（方式一）要求進行確認。確認目的建立丹參藥材鑒別（2）及含量測定方法的確認方案，在實驗過程中嚴格按照《中國藥典》2010年版第二增補本操作步驟實行，確保試驗結果真實可信，以確認大黃藥材按《中國藥典》2010年版第二增補本測定的方法是否適用于本實驗室。適用范圍適用于本公司的丹參藥材鑒別（2）及含量測定項下的檢驗方法確認。確認小組成員與職責部門及職務姓名確認工作中職責QC檢驗員確認執(zhí)行人：負責起草確認方案，執(zhí)行確認方案；負責驗證過程中相關的檢驗操作，收集整理數(shù)據(jù)，起草確認報告。QA監(jiān)督員負責確認全過程的監(jiān)控。####丹參分析方法確認方案第2頁共6頁編號：

質量保證部負責確認方案及確認報告的審核；審核確認過程中發(fā)生偏差的解決方案，以及米取糾正措施。QC主任確認組長：負責確認方案的審核并組織實施，審核確認報告。質量負責人確認總負責人：負責確認方案、報告的批準確認方案的起草與審批確認方案的起草與審批：確認方案由檢驗室起草，確認小組會審，質量負責人批準實施。確認方案的培訓確認方案起草人在方案經(jīng)質量管理部負責人批準后及確認方案實施前，對本次確認實施的相關人員組織培訓工作，由中心化驗室主任負責該次確認方案的培訓工作，并將該次的培訓記錄交至人力資源部歸檔。確認方案的修改：確認方案如需修改，由質量負責人批準實施，在確認報告中體現(xiàn)。確認內(nèi)容確認儀器及相關文件材料檢查6.1.1所用儀器：儀器名稱生產(chǎn)廠家型號校驗時間檢測項目咼效液相色譜儀含量測定電子分析天平稱量確認確認人：年月日復核人：年月日6.1.2對照品和樣品：品名批號含量有效期至儲存條件丹參酮IIA對照品丹參/確認人確認人： 復核人：年月日 年月日6.1.3確認前，對與此次確認相關的文件進行檢查（見下表）文件名稱文件編號是否現(xiàn)行文本檢驗方法驗證（確認）管理規(guī)程電子天平標準操作規(guī)程電子天平維護保養(yǎng)及清潔標準操作規(guī)程####丹參分析方法確認方案第3頁共6頁編號：咼效液相色譜系統(tǒng)標準操作規(guī)程高效液相色譜系統(tǒng)維護保養(yǎng)及清潔標準操作規(guī)程丹參藥材檢驗操作規(guī)程丹參藥材質量標準確認人：確認 年 月曰確認人：年 月 日試劑：乙腈（色譜純）、磷酸、乙醇、甲醇、甲苯、乙酸乙酯、甲酸、三氯甲烷、鹽酸、石油醚（60?90°C）其它均為分析純。可接受標準：儀器和用具經(jīng)校驗且在效期內(nèi)；對照品、試液、試劑與試藥符合驗證要求且在效期內(nèi)；所有文件都應為現(xiàn)行版本，且經(jīng)過批準；色譜柱、色譜儀使用狀態(tài)正常。鑒別試驗6.2.1操作方法：6.2.1.1取本品粉末lg,加乙醇5ml,超聲處理15分鐘，離心，取上清液作為供試品溶液。另取丹參對照藥材lg,同法制成對照藥材溶液。再取丹參酮IIA對照品，丹酚酸B對照品，加乙醇制成每lml含0.5mg丹參酮IIA和1.5mg丹酚酸B的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄VIB）試驗，吸取上述三種溶液各5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（6:4:8:1:4）為展開劑，展開，展至約4cm，取出，晾干，再以石油醚（60?90C）-乙酸乙酯（4：1）為展開劑，展開，展至約8cm，取出，晾干，分別再日光及紫外光（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點。可接受標準：由兩名檢驗人員，分別對同一批次的供試品進行取樣檢測。按照檢驗方法所述，制備供試品溶液和對照品溶液并檢驗，結果見下表。檢驗人員檢測結果標準要求應顯與對照藥材和對照品相同顏色的斑點或熒光斑點。結果評價確認確認人： 復核人：年月 日 年月 日含量測定6.3.l色譜條件色譜柱為C18以乙腈為流動相A，以0.02%磷酸溶液為流動相B，檢測波長為270nm；理####丹參分析方法確認方案第4頁共6頁編號：論塔板數(shù)按丹參酮IIA峰計算應不低于60000。按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫。時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)0?661396?2061-9039-1020?20.590-6110-3920.5?2061396.3.2對照品溶液的制備：取丹參酮IIA對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每lml含20ug的溶液，即得。(每lml含 ug的丹參酮IIA對照品溶液。)6.3.3供試品溶液的制備：取本品粉末(過三號篩)約0.3g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率140W，頻率42kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液。6.3.4測定法：分別吸取對照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀，測定。以丹參酮IIA對照品為參照物，以其相應的峰為S峰，計算隱丹參酮、丹參酮I的相對保留時間，其相對保留時間應在規(guī)定值±5%范圍之內(nèi)。相對保留時間及校正因子見下表：待測成分(峰)相對保留時間校正因子隱丹參酮0.751.18丹參酮I0.791.31丹參酮IIA1.01.0以丹參酮IIA的峰面積為對照，分別剩余校正因子，計算隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA的含量。本品按干燥品計算，含丹參酮IIA(CHO)、隱丹參酮(CH0)和丹參酮I(CH0)的總19183 19203 18123量計不得少于0.25%。可接愛標準由兩名檢驗人員，分別對同一批次的供試品各取2個樣進行平行實驗。按照檢驗方法所述，制備供試品溶液和對照品溶液并檢驗，計算4個檢驗結果的相對標準偏差來證明方法在本實驗室的適用性。兩人之間的相對偏差W2.0%。結果見下表。檢驗員取樣量檢驗項目檢測結果標準要求RSD(%)①丹參酮類含丹參酮IIA(CHO)、隱丹參19 183####丹參分析方法確認方案第5頁共6頁編號：②酮(CH0)和丹參酮I(CHO)19203 18 12 3的總量計不得少于0.25%。①②結果評價確認確認人：年 月 日復核人：年 月 日偏差處理確認過程中應嚴格按照本確認方案執(zhí)行，出現(xiàn)個別項目不符合標準結果時，應按偏差管理規(guī)程進行處理，有異常事項未解決時，不得進行下一步的工作