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文檔簡(jiǎn)介
第八章
臨床自動(dòng)生物化學(xué)分析儀器
教學(xué)目標(biāo)和要求掌握
自動(dòng)生化分析儀的分類、基本結(jié)構(gòu)及其特點(diǎn)、分析原理熟悉
影響自動(dòng)生化分析儀的因素和分析儀性能指標(biāo)。了解
分析儀的工作過(guò)程和操作方法,常用分析儀的分析性能。某些分析參數(shù)的特殊意義概述自動(dòng)生物化學(xué)分析儀(automaticbiochemicalanalyzer)的發(fā)展史1957年Technicon公司第一臺(tái)單通道連續(xù)流動(dòng)式60年代連續(xù)流動(dòng)式70年代電子計(jì)算機(jī)嶄新的時(shí)期80、90年代后各種自動(dòng)生物化學(xué)分析儀競(jìng)相發(fā)展21世紀(jì)新技術(shù)得到廣泛應(yīng)用取樣
加試劑
去干擾物
混合
保溫反應(yīng)
測(cè)定
數(shù)據(jù)處理
打印報(bào)告
清洗
生化檢驗(yàn)的一般過(guò)程
第一節(jié)
自動(dòng)生物化學(xué)分析儀的分類
1.按反應(yīng)裝置
連續(xù)流動(dòng)式(continuous
streamingmovement
style)
離心式(centrifugationstyle)
分立式(discrete
style)
干片式
(dryingstyle)2.按自動(dòng)化程度
全自動(dòng)
半自動(dòng)型
3.按同時(shí)可測(cè)定項(xiàng)目
單通道多通道
4.按儀器的復(fù)雜程度及功能
小型中型大型
5.按測(cè)定程序可否更改程序固定程序可變
第二節(jié)
自動(dòng)生化分析儀的基本結(jié)構(gòu)
和工作原理基本原理
分光光度法程序控制基本結(jié)構(gòu)分光光度計(jì)計(jì)算機(jī)一、連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀
連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀是第一代自動(dòng)分析儀,在測(cè)定過(guò)程中各待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)均在同一管道內(nèi)流動(dòng)的過(guò)程中完成(一)儀器結(jié)構(gòu)
樣品盤比例泵混合器透析器恒溫器檢測(cè)裝置其它1.樣品盤
組成可轉(zhuǎn)動(dòng)的圓盤,圓盤上置放聚乙烯塑料杯(或試管)、采樣探頭、循環(huán)洗滌裝置作用置放待測(cè)樣品標(biāo)準(zhǔn)液質(zhì)控物空白液對(duì)照液工作原理在程序控制器的控制下,轉(zhuǎn)盤的移動(dòng)與采樣管上塑料軟管探頭的活動(dòng)同步。
2.比例泵
組成
金屬壓板泵管轉(zhuǎn)軸彈簧空氣調(diào)節(jié)器作用類似心臟的“舒”
“縮”功能,吸入樣品、試劑、空氣。排出廢液等3.混合器
組成是一種由玻璃制成的螺旋管(見圖)作用是將比重不同的液體充分混合,代替手工操作中的攪拌、振搖或倒轉(zhuǎn),使流經(jīng)的液體各組分達(dá)到充分混勻的目的。
4.透析器
是連續(xù)流動(dòng)式分析儀的特殊部件組成2快相對(duì)塑料板及中間透析膜(見圖)作用去除反應(yīng)管道中大、小分子干擾物,特別是小分子物質(zhì)的測(cè)定時(shí)常用透析器除去蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)以免其干擾實(shí)驗(yàn)。工作原理5.恒溫器維持反應(yīng)溫度6.檢測(cè)器7.計(jì)錄儀8.微處理器-計(jì)算機(jī)9.功能監(jiān)視器-顯示屏(二)工作原理
在計(jì)算機(jī)控制下,通過(guò)比例泵將標(biāo)本和試劑注入到連續(xù)的管道系統(tǒng)中,在一定的溫度下,在管道內(nèi)完成混合,去除干擾物;保溫,比色測(cè)定,信號(hào)放大,運(yùn)算處理,最后將結(jié)果顯示并打印出來(lái)。因?yàn)檫@種檢測(cè)分析是一個(gè)標(biāo)本接一個(gè)標(biāo)本在連續(xù)流動(dòng)狀態(tài)下進(jìn)行的,故稱之為連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀
(三)儀器特點(diǎn)
連續(xù)流動(dòng)式生物化學(xué)自動(dòng)分析儀在檢測(cè)過(guò)程中,樣品和樣品之間需用空氣進(jìn)行隔離,或用空白試劑或者是緩沖液來(lái)隔離。用空氣分隔的叫空氣分段式系統(tǒng)(air-segmentedsystem),用空白試劑或緩沖液分隔的叫非分段式系統(tǒng)(non-segmentedsystem)。
二、離心式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀
離心式生物化學(xué)分析儀是1969年發(fā)展起來(lái)的一種機(jī)型,它的全部檢驗(yàn)過(guò)程是在一個(gè)類似離心機(jī)轉(zhuǎn)頭樣的圓盤上完成(一)儀器結(jié)構(gòu)
1.加樣部分:樣品盤、試劑盤、吸樣臂、試劑臂和電子控制等。
2.分析部分:離心轉(zhuǎn)盤、溫控、光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、微機(jī)信息處理和顯示系統(tǒng)儀器的關(guān)鍵部分:轉(zhuǎn)盤(見圖)
轉(zhuǎn)盤具有粘水極少的特性。轉(zhuǎn)盤上有圓形排列的相同的12個(gè)凹槽組合,每個(gè)組合有2-3個(gè)凹槽,沿離心力方向相通
(二)工作原理
先將樣品和試劑分別置于轉(zhuǎn)盤相應(yīng)的凹槽內(nèi),當(dāng)離心機(jī)開動(dòng)后,受離心力的作用,試劑和樣品相互混合發(fā)生反應(yīng),經(jīng)適當(dāng)?shù)臅r(shí)間后,各樣品最后流入轉(zhuǎn)盤外圈的比色凹槽內(nèi),通過(guò)比色計(jì)檢測(cè)(三)特點(diǎn)1反應(yīng)器就是轉(zhuǎn)盤2同步分析(paralledanalysis)
在整個(gè)分析過(guò)程中的每一個(gè)步驟幾乎是同時(shí)完成的,不同于前“順序分析”(sequentialanalysis)。3微量分析樣品量和試劑量均為微量級(jí)(樣品1-50ul試劑120-130u1)4分析速度快
可達(dá)600test/h三、分立式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀
目前國(guó)內(nèi)外最多采用的設(shè)計(jì)模式特點(diǎn)各個(gè)樣品在各自的測(cè)定管或反應(yīng)杯中進(jìn)行(一)工作原理
分立式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀是按人工操作的方式編排程序,并以有序的機(jī)械動(dòng)作代替人工,按程序依次完成各項(xiàng)操作的自動(dòng)分析儀器。儀器操作過(guò)程中的各環(huán)節(jié)用傳送帶連接,按程序依次操作.如圖20-2所示(二)儀器結(jié)構(gòu)與功能
1.樣品、試劑系統(tǒng)
A.組成
樣品盤(架)和試劑盤、識(shí)別裝置、機(jī)械臂、加液器、攪拌器B.功能
模仿人工操作,識(shí)別樣品和試劑,并把它們加入到反應(yīng)器中(1)樣品盤、樣品架:
放置樣品管的裝置有條形碼的分析儀,可直接閱讀樣品管上的條形碼信息,指令分析儀進(jìn)行分析檢測(cè);無(wú)條形碼的分析儀,需人工輸入患者的有關(guān)信息及檢測(cè)的項(xiàng)目樣品盤、樣品架
樣品盤(specimendisc):放置待測(cè)樣品的轉(zhuǎn)盤,可放置一定數(shù)量的樣品杯(specimencup)或不同規(guī)格的采血試管,通過(guò)樣品盤的轉(zhuǎn)動(dòng)來(lái)控制不同樣品的進(jìn)樣。
樣品架(specimenstock):每個(gè)樣品架可放數(shù)只樣品杯或采血試管(多為5只或10只)。樣品架的移動(dòng)通過(guò)樣品傳送帶來(lái)進(jìn)行。樣品架上的條形碼(barcode)或編碼孔可識(shí)別樣品架號(hào)及樣品位置號(hào)。樣品架的優(yōu)點(diǎn)①隨著樣品架移動(dòng)及樣品的被檢測(cè),可不斷追加已放置樣品杯或采血試管的樣品架;②通過(guò)樣品架的移動(dòng)能將樣品傳送到另一個(gè)分析模塊(analysis
die-block)甚至另一臺(tái)分析儀上再進(jìn)行分析。
(2)試劑室和試劑瓶
轉(zhuǎn)盤式試劑室(reagentchamber):內(nèi)裝放置試劑瓶的轉(zhuǎn)盤,一般可放置20種以上具有一定形狀的塑料試劑瓶,大型分析儀可放置30~45種試劑瓶。試劑瓶容量一般為10~100ml。通過(guò)試劑轉(zhuǎn)盤的轉(zhuǎn)動(dòng)來(lái)選用不同試劑。
試劑架式試劑室:可放置容量為250ml~500ml的任意形狀的試劑瓶,試劑瓶不能轉(zhuǎn)動(dòng),但每個(gè)試劑瓶?jī)?nèi)引出一條試劑管路及其噴嘴,即每種試劑均有專用的加試劑裝置,因而不同試劑間無(wú)交叉污染。但試劑管路較長(zhǎng)使試劑存在一定的死體積,因而適宜用于使用頻率高、消耗試劑量大的檢測(cè)項(xiàng)目。
大型分析儀同時(shí)備有第一試劑室和第二試劑室,即具備對(duì)同一檢測(cè)項(xiàng)目添加兩次試劑的功能,個(gè)別分析儀還具有加入第三試劑的功能。對(duì)有條形碼裝置的儀器可將帶條形碼的試劑瓶放在試劑室轉(zhuǎn)盤上的任意位置,儀器能自動(dòng)識(shí)別試劑的種類、批號(hào)和有效期。試劑室均具有冷藏裝置,可將試劑保存在4~10℃。
(3)加液器:加液器由定量吸量器和加樣針組成。由機(jī)械臂控制加液器的移動(dòng),根據(jù)儀器的指令機(jī)械臂攜帶加液器運(yùn)動(dòng)至指定位置。吸量器是用特殊的硬質(zhì)玻璃(塑料)制成,包括閥門吸量器和閥門。分立式生物化學(xué)分析儀的加液器由采樣器和加第一試劑的加液器組合而成,也稱稀釋器,結(jié)構(gòu)如圖所示。
①.取樣裝置(sampling
assembly):由取樣針、取樣臂、取樣管路、取樣注射器和閥門組成,能定量吸取樣品并加入到反應(yīng)杯。不同分析儀的取樣容量有不同的范圍,一般為2~35μl,步進(jìn)0.1微升不等。
取樣針設(shè)有電子液面感應(yīng)器,取樣針于樣品上方下降,一旦接觸到樣品液面即停止下降而開始吸樣。適用于不同的采血試管上機(jī)測(cè)定
多數(shù)加樣裝置設(shè)有防撞功能,遇到阻礙時(shí)取樣針立即停止運(yùn)動(dòng)并報(bào)警。某些取樣針還設(shè)有阻塞報(bào)警功能,當(dāng)取樣針被樣品中的凝塊、纖維蛋白等物質(zhì)阻塞時(shí),機(jī)器會(huì)自動(dòng)報(bào)警、沖洗取樣針,并跳過(guò)當(dāng)前樣品,進(jìn)行下一個(gè)樣品的取樣檢測(cè)。
取樣針?lè)澜徊嫖廴荆╟rossing
contamination)措施
絕大多數(shù)采用水洗方式(又有瀑布式和涌泉式之分),在吸取另一個(gè)樣品前對(duì)接觸樣品的樣品針內(nèi)外壁進(jìn)行沖洗;也有采用化學(xué)惰性液(chemicalinertia
fluid)膜的方式來(lái)隔絕樣品與取樣針內(nèi)外壁之間的接觸。②.加試劑裝置
加試劑裝置用于定量吸取試劑加入反應(yīng)杯,可加入試劑容量一般為20~350μl。步進(jìn)1~5微升不等,取樣精度在1微升左右。
注射器方式:組成部件與取樣裝置類似,其液面感應(yīng)系統(tǒng)能檢測(cè)并提示試劑剩余量。
灌注式:具有許多條試劑管路及其噴嘴,每種試劑單獨(dú)使用一條試劑管路和噴嘴,不存在各試劑間的交叉污染。
大型自動(dòng)生化儀多具有兩組加試劑裝置,可分別從兩個(gè)試劑室吸取同一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的第一試劑和第二試劑,大多數(shù)分析儀所有檢測(cè)項(xiàng)目加入第二試劑的時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)一固定為1個(gè)或2個(gè)點(diǎn),也有分析儀有3個(gè)加入時(shí)間點(diǎn)可供選擇。
(4)攪拌器:攪拌器由電機(jī)和攪拌棒組成,電機(jī)運(yùn)動(dòng)帶動(dòng)攪拌棒高速轉(zhuǎn)動(dòng),使反應(yīng)液被充分混勻。攪拌棒的下端是一個(gè)扁的金屬桿,金屬桿表面涂有一層不粘性材料,也有采用特殊的防粘附清洗劑,其作用是減少攜帶率,從而降低交叉污染率。
2.檢測(cè)系統(tǒng)
(1)
光學(xué)系統(tǒng):1)光源鹵素?zé)舨ㄩL(zhǎng)325-800nm
氙燈波長(zhǎng)285-750nm
產(chǎn)熱較嚴(yán)重,安裝水冷裝置,提高光源的使用壽命2)光路系統(tǒng)是由一組透鏡、聚光鏡、光徑(比色杯)和分光元件等組成。有前分光和后分光之分.
前分光光路與一般分光光度計(jì)相同
光源分光元件樣品檢測(cè)器
后分光光路光源樣品分光元件檢測(cè)器其光源是先照射到樣品杯,然后通過(guò)光柵分光,再用檢測(cè)器檢測(cè)任何一個(gè)波長(zhǎng)的吸光度,見圖20-5。優(yōu)點(diǎn)不需移動(dòng)儀器的任何部件,可同時(shí)選用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定,降低了噪聲,提高了分析的精度和準(zhǔn)確度,減少了故障率。前分光與后分光的主要區(qū)別前分光先分出多個(gè)單色光,再照射到比色杯窗口。后分光可連續(xù)不斷檢測(cè)不同波長(zhǎng)的反應(yīng),但光強(qiáng)度過(guò)高時(shí)可引起血清膽紅素降低;前分光一般不能進(jìn)行不同波長(zhǎng)項(xiàng)目的不間斷檢測(cè),通常只能單項(xiàng)一次測(cè)完后,再測(cè)第二項(xiàng)。全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀多采用后分光半自動(dòng)生物化學(xué)分析儀也有少數(shù)采用后分光原理。
①分光裝置
干涉濾光片
(interferencefilter)
插入式可旋轉(zhuǎn)式常帶有340、380、405、500、550、600、660nm等幾種濾光片
光柵分光(raster)光柵分光
分為全息反射式光柵、蝕刻式凹面光柵二種形式。全息反射式光柵是在玻璃上覆蓋一層金屬膜后制成,有一定程度的相差,且易被腐蝕;蝕刻式光柵是將所選波長(zhǎng)固定地刻制在凹面玻璃上(1mm內(nèi)可以蝕刻4000—10000條線),有耐磨損、抗腐蝕、無(wú)相差等優(yōu)點(diǎn)。光柵分光較干涉濾光片有明顯優(yōu)點(diǎn),尤其采用340m波長(zhǎng)的酶類測(cè)定結(jié)果更穩(wěn)定可靠。
②比色杯(反應(yīng)杯)
比色杯的厚度有l(wèi).0cm、0.6cm和0.5cm三種。光徑小的可以節(jié)省試劑,減少樣品用量。光徑小于lcm時(shí),儀器能自動(dòng)校正為lcm。比色杯有分立式和流動(dòng)池式兩種形式分立式比色杯
比色杯的數(shù)量與檢測(cè)速度有關(guān),一般都在100個(gè)左右。有些組合式分析儀可由雙圈比色杯組成,其數(shù)量更多,速度更快。反應(yīng)過(guò)程分別在各自比色杯中直接完成,經(jīng)吸光度檢測(cè)后計(jì)算出結(jié)果。比色結(jié)束后比色杯作自動(dòng)反復(fù)沖洗、吸干,自動(dòng)檢查試劑杯空白,合格后繼續(xù)循環(huán)使用。未通過(guò)自動(dòng)檢查的比色杯,儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警提示,有些分析儀還會(huì)自動(dòng)停止工作。全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀的多采用此類比色杯,流動(dòng)池式比色杯
樣品與試劑的反應(yīng)在圓盤式反應(yīng)杯中完成,吸液器將其吸入固定的比色杯,進(jìn)行比色后測(cè)定后再吸出,此為單通道比色系統(tǒng)。各測(cè)定之間需消耗一定時(shí)間,尤其是速率法檢測(cè)所耗時(shí)間更長(zhǎng),因此此類分析儀的工作速度難以提高。流動(dòng)池式比色杯多用于半自動(dòng)生物化學(xué)分析儀。
(2)信號(hào)檢測(cè)器
光學(xué)系統(tǒng)產(chǎn)生的光信號(hào)由信號(hào)檢測(cè)器接收,然后將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)并加以放大,再把它們傳送至數(shù)據(jù)處理單元。信號(hào)接收器:硅(矩陣)二極管信號(hào)傳送方式:有光電信號(hào)傳送和光導(dǎo)纖維傳送兩種,光導(dǎo)纖維傳送技術(shù)更先進(jìn),可消除電磁波對(duì)信號(hào)的干擾,傳送速度更快,目前新設(shè)計(jì)的高檔自動(dòng)生物化學(xué)分析儀均采用光導(dǎo)纖維傳送技術(shù)。
3.恒溫裝置
自動(dòng)生物化學(xué)分析儀通過(guò)溫度控制系統(tǒng)保持溫度的恒定,以保證反應(yīng)的正常進(jìn)行。
三種方式(1)干式恒溫器加熱:在比色杯與加熱器之間隔有空氣,干式恒溫的特點(diǎn)是方便,速度快,不需要特殊的防護(hù),但穩(wěn)定性和均勻性稍差。
(2)水浴式循環(huán)加熱式:在比色杯周圍充盈有水,加熱器控制水的溫度。特點(diǎn)是溫度準(zhǔn)確,可達(dá)±0.1℃,但需要特殊的防腐劑才能保證水質(zhì)的潔凈⑶恒溫液循環(huán)間接加熱:恒溫液循環(huán)間接加熱式,它的結(jié)構(gòu)原理是在比色杯周圍流動(dòng)著一種特殊的恒溫液(具有無(wú)味、無(wú)污染、不變質(zhì)、不蒸發(fā)等特點(diǎn)),在比色杯與恒溫液之間又有—個(gè)幾毫米的空氣夾縫,恒溫液通過(guò)加熱夾縫的空氣達(dá)到恒溫。其均勻性、穩(wěn)定性優(yōu)于干式,又有升溫迅速,不需特殊保養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。恒溫控制器可以對(duì)25℃、30℃和37℃三種溫度進(jìn)行恒溫,根據(jù)需要任意選擇。4.清洗裝置
(1)組成吸液針、吐液針、擦拭塊(2)工作流程吸出反應(yīng)液-注入清洗劑一吸干-注入純水一吸干一擦干(見圖)(3)清洗劑:有堿性和酸性兩種吐入的純水在一些大型儀器上可以加熱成溫水,并且可反復(fù)清洗2-3次,有些還可以風(fēng)干。這些功能有效地提高了洗滌效果,減少了交叉污染的程度以及測(cè)定的精密度和準(zhǔn)確度。
(三)儀器計(jì)算機(jī)系統(tǒng)核心作用標(biāo)本的識(shí)別混合恒溫?cái)?shù)據(jù)處理結(jié)果打印及校準(zhǔn)方法測(cè)定方法的選擇質(zhì)量監(jiān)控由于計(jì)算機(jī)的發(fā)展速度極快,新一代的儀器總比老一代的自動(dòng)化程度高,代替人工操作的功能多,試劑及樣品用量更少,可以不斷提高工作效率、降低成本。有以下功能
1.樣品及試劑的識(shí)別
貼在樣品管上的條形碼用于識(shí)別待測(cè)樣品,盛放試劑的瓶上的條形碼用于測(cè)定項(xiàng)目試劑的選擇,條形碼閱讀器將患者的鑒別信息和需要測(cè)定的項(xiàng)目輸入計(jì)算機(jī),再將條形碼信息轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的動(dòng)作,始終貫徹在整個(gè)測(cè)定過(guò)程中,直至最后報(bào)出結(jié)果。2.加樣及混合恒溫
樣品和試劑的吸取、加入是由計(jì)算機(jī)控制的機(jī)械手完成的,機(jī)械手的一端裝有吸液針,加入液體可用注射器、蠕動(dòng)泵及氣動(dòng)泵方式進(jìn)行。吸液針的內(nèi)腔和外周用每次沖洗法清洗或采用惰性物質(zhì)包被,使它既不與樣品混合,又不影響檢測(cè),以免樣品間的交叉污染?;旌涎b置流動(dòng)式自動(dòng)分析儀;采用蠕動(dòng)泵和螺旋形混合管的裝置分立式分析儀;使用磁力、機(jī)械力攪拌混合。混合的力度和時(shí)間由計(jì)算機(jī)控制。恒溫溫度有37度、30度、25度。多用37℃。溫度的調(diào)控和恒定均由計(jì)算機(jī)控制完成。3.結(jié)果計(jì)算及打印
計(jì)算機(jī)通過(guò)檢測(cè)系統(tǒng)將檢測(cè)到的光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)計(jì)算出檢測(cè)結(jié)果,并將數(shù)據(jù)結(jié)果列成表格,再由計(jì)算機(jī)指令打印機(jī)打印結(jié)果發(fā)送病房或患者。4.?dāng)?shù)據(jù)處理
強(qiáng)大數(shù)據(jù)處理功能各種校準(zhǔn)方法測(cè)定方法多種質(zhì)控方式結(jié)果計(jì)算統(tǒng)計(jì)功能多種報(bào)告打印方式數(shù)據(jù)儲(chǔ)存、調(diào)用
四、干化學(xué)式自動(dòng)生物化學(xué)分析儀
定義采用干化學(xué)(drychemistry)方法,將發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng),轉(zhuǎn)移到一個(gè)固相載體上,利用分光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)的一類新型儀器。(一)特點(diǎn)
完全脫離了傳統(tǒng)的采用試管和吸管的分析方法,儀器操作簡(jiǎn)便,測(cè)定速度快,靈敏度和準(zhǔn)確度與典型的分立式儀器相近。不同于濕化學(xué)(wetchemistry),實(shí)際上,干化學(xué)也是在不同程度潮濕狀態(tài)下的化學(xué)反應(yīng)。
(二)工作原理1.采用多層薄膜的固相試劑技術(shù),僅需將樣品加在固相試劑上進(jìn)行測(cè)定2.分光檢測(cè)反射光度法(reflectancespectroscopy)離子擇電極(ISE)差示電位法(differenfialpotentiometry)熒光光度計(jì)臨床檢驗(yàn)中的固相化學(xué)法最具代表性的是多層膜法(multiplelayerfilm)。它集現(xiàn)代化學(xué)、光學(xué)、酶工程、化學(xué)計(jì)量學(xué)和計(jì)算機(jī)技術(shù)于一體,已使其作為定量方法達(dá)到了常規(guī)濕化學(xué)的水平。
(三)儀器的類型三種類型1.反射光度法系統(tǒng)(reflotronsystem)使用試條2.膠片涂層技術(shù)化學(xué)分析系統(tǒng)(vitroschemistrysystem)使用試劑片、塊狀試劑3.袋式分析儀采用干試劑包1.反射光度法系統(tǒng)
每一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目都有各自專用的試劑條,由3個(gè)主要部分組成①密碼磁帶:位于劑試條背面,是該項(xiàng)目的全部檢測(cè)程序,存貯了全部方法學(xué)所必需的資料,包括:英文縮寫符號(hào)、測(cè)試范圍、血漿分離時(shí)間、波長(zhǎng)選擇、反應(yīng)時(shí)間、換算因數(shù)和誤差自檢等,插入后即傳送給微機(jī)。②血漿分離區(qū):位于正面下部并標(biāo)以紅色,由玻璃纖維和紙層構(gòu)成。③反應(yīng)區(qū):位于試劑條的正面上部。
2.膠片涂層技術(shù)化學(xué)分析系統(tǒng)
(1)結(jié)構(gòu)4個(gè)功能層分布層(展開層)接受樣品中介層(試劑層)1-2個(gè)
以改變樣品的物理化學(xué)性質(zhì)指示劑層(顯色層)對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定量(2)反應(yīng)都在干片(多層膜片)內(nèi)進(jìn)行干片的測(cè)試方式,有單個(gè)干片進(jìn)行測(cè)試,也可對(duì)數(shù)十個(gè)單個(gè)干片進(jìn)行連續(xù)測(cè)試干化學(xué)的原理(a)反應(yīng)過(guò)程演示干化學(xué)的原理(b)
比色展開層試劑層顯色層支持層
接收器3.袋式分析儀
袋式試劑包由透明的雙層塑料薄膜制成,每袋均有不同的測(cè)定項(xiàng)目英文縮寫標(biāo)記。測(cè)定擇作開始時(shí)將試劑包放進(jìn)儀器,樣品及其稀釋液由探針刺孔注入包內(nèi).在反應(yīng)過(guò)程中的不同階段,試劑小袋經(jīng)破裂器擊碎.捏合及保溫,然后透明小袋經(jīng)機(jī)械碾壓形成比色杯用于制定,最后通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)換算結(jié)果并發(fā)出報(bào)告。第三節(jié)
自動(dòng)生化自動(dòng)分析儀的性能指標(biāo)與相關(guān)參數(shù)一、自動(dòng)生化自動(dòng)分析儀的性能指標(biāo)自動(dòng)化程度分析效率
應(yīng)用范圍分析準(zhǔn)確度
(一)自動(dòng)化程度
自動(dòng)化程度越高儀器功能越強(qiáng)自動(dòng)化程度高低取決于計(jì)算機(jī)功能根據(jù)儀器計(jì)算機(jī)功能的不同分為全自動(dòng)和半自動(dòng)(二)分析效率
指在測(cè)定方法相同的情況下不同分析儀的分析速度分析速度決定于一次測(cè)定中可測(cè)樣品多少和可測(cè)項(xiàng)目的多少不同類型的分析儀,其結(jié)構(gòu)和設(shè)計(jì)原理的不同,微機(jī)應(yīng)用程序不同造成自動(dòng)化程度的差異,也直接影響到分析儀的分析效率(三)應(yīng)用范圍
可測(cè)試的生化項(xiàng)目、其它項(xiàng)目反應(yīng)的類型、分析方法的種類如除了分光光度法外,還能進(jìn)行濁度比色法、ISE、熒光法(四)分析準(zhǔn)確度愈高愈好準(zhǔn)確度取決于各部件(加液、溫控、波長(zhǎng)、記時(shí)等)的加工精確度及其精確的工作狀態(tài)克服交叉污染保證測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確(五)其它儀器的壽命、儀器的維修保養(yǎng)方式和途徑、測(cè)定所需樣品和試劑的數(shù)量,以及配套試劑盒的供應(yīng)等,特別是儀器的性能價(jià)格比,在選用時(shí)都應(yīng)一并考慮,使選用的分析儀能夠物盡其用,且又經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,能夠取得最大的效益。
二、自動(dòng)生物化學(xué)分析儀相關(guān)參數(shù)
實(shí)驗(yàn)名稱樣品量試劑量分析方法校正方法反應(yīng)時(shí)間測(cè)定波長(zhǎng)控制因素
(一)實(shí)驗(yàn)名稱、樣品與試劑量測(cè)定項(xiàng)目標(biāo)識(shí)符(英文縮寫)樣品與試劑量的確定一般按照試劑說(shuō)明書上的比例,并結(jié)合儀器的特性進(jìn)行設(shè)置。儀器的特性有:樣品和試劑的最小加樣量及加量范圍、最小反應(yīng)液的體積等。亦可根據(jù)手工法按比例縮減或者重新設(shè)計(jì)。但要考慮到檢測(cè)靈敏度、線性范圍,盡可能將樣品稀釋倍數(shù)大些,以降低樣品中其他成分的影響
(二)試劑的選擇1.單試劑法
在反應(yīng)過(guò)程中僅加一次試劑的方法,常見的有:
單試劑單波長(zhǎng)法單試劑雙波長(zhǎng)法標(biāo)本空白法
①單試劑單波長(zhǎng)法:
指在選定的溫度和某一特定的波長(zhǎng),讀取反應(yīng)一定時(shí)間時(shí)的吸光度的方法。單試劑法中最常見的方法反應(yīng)溫度常選擇37℃;
反應(yīng)時(shí)間:根據(jù)反應(yīng)特性和特定的儀器而定,為使儀器有效工作,以不超過(guò)儀器的一個(gè)分析周期為佳。根據(jù)反應(yīng)的特性,本法又可分為一點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)法、標(biāo)準(zhǔn)曲線法、非線性標(biāo)準(zhǔn)曲線法
②單試劑雙波長(zhǎng)法:?jiǎn)卧噭╇p波長(zhǎng)法主要是為了消除檢測(cè)體系或標(biāo)本的混濁而設(shè)置。自動(dòng)生物化學(xué)分析儀大部分終點(diǎn)分析均用此法
③標(biāo)本空白法:使用單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)均可,當(dāng)使用雙波長(zhǎng)還糾正不了混濁、色素、脂血等帶來(lái)的影響時(shí),常用本法來(lái)做終點(diǎn)分析。
2.雙試劑法雙試劑法可消除一些干擾和非特異性反應(yīng),特別當(dāng)試劑不穩(wěn)定時(shí),要分開配制和加入反應(yīng)系統(tǒng),以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確。常見的有:
雙試劑單波長(zhǎng)一點(diǎn)法雙試劑二點(diǎn)法雙試劑雙波長(zhǎng)法
①雙試劑單波長(zhǎng)一點(diǎn)法:
檢測(cè)試劑分成兩部分加入,只讀一次吸光度。對(duì)不宜采用單試劑的方法可用
②雙試劑雙波長(zhǎng)法:不同的儀器,功能不一樣,有的全用雙波長(zhǎng),有的可自行設(shè)置。實(shí)際工作中應(yīng)根據(jù)需要確定選用
③雙試劑二點(diǎn)法:
為了去掉標(biāo)本色素、濁度的影響,可用雙試劑,在加入第一試劑后讀取一次吸光度(此時(shí)試劑與標(biāo)本不發(fā)生反應(yīng),吸光度為標(biāo)本或試劑所產(chǎn)生),再加第二試劑,反應(yīng)一定時(shí)間后再讀取一次吸光度,依兩次吸光度之差計(jì)算結(jié)果。此法不但可避免試劑不穩(wěn)造成的影響,還可消除標(biāo)本帶來(lái)的某些影響。目前較多的全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀的終點(diǎn)分析均用此法。(三)分析方法的選擇
半自動(dòng)生物化學(xué)分析儀一般具備其中的一點(diǎn)終點(diǎn)、兩點(diǎn)終點(diǎn)(單試劑)。全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀的功能較全面,具有多種方法,可根據(jù)需要進(jìn)行選擇
(四)波長(zhǎng)的選擇
1.單波長(zhǎng)
單波長(zhǎng)是用一個(gè)波長(zhǎng)檢測(cè)物質(zhì)的光吸收強(qiáng)度的方法。當(dāng)測(cè)定體系中含有一種組分或在混合溶液中待測(cè)組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收波長(zhǎng)無(wú)重疊時(shí),可選用。如果一個(gè)物質(zhì)有幾個(gè)吸收峰,可選擇吸光度最大的一個(gè)波長(zhǎng),或者選擇在吸收峰處吸光度隨波長(zhǎng)變化較小的某個(gè)波長(zhǎng)
2.雙波長(zhǎng)
用兩個(gè)不同波長(zhǎng)檢
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