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體液葡萄糖檢驗(yàn)第一頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日1本章內(nèi)容概要:第二節(jié)體液葡萄糖測(cè)定第一節(jié)概述第二頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日2本章教學(xué)要求:1、掌握血糖、糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白測(cè)定的推薦方法及臨床意義,口服葡萄糖耐量試驗(yàn)的程序和臨床應(yīng)用。2、熟悉糖尿病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目和診斷程序3、了解血糖濃度的調(diào)節(jié)機(jī)制、糖代謝紊亂。。第三頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日31、氧化供能:分解代謝提供人體75%能量;

2、人體組成成分之一:糖占人體干重的2%;

合成糖原儲(chǔ)存在肝臟與肌肉中;形成糖蛋白和蛋白多糖(激素、酶、受體等)、糖脂(神經(jīng)組織和細(xì)胞膜重要組分);3、轉(zhuǎn)變:其它糖及糖衍生物(核糖、脫氧核糖、氨基多糖);非糖物質(zhì)(脂肪、氨基酸和核酸)。

糖的生理功能(能量資源和結(jié)構(gòu)材料)糖代謝紊亂

一系列代謝變化第四頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日4體液糖的測(cè)定項(xiàng)目:①血糖濃度測(cè)定②口服糖耐量試驗(yàn)③糖化血紅蛋白試驗(yàn)④糖化血清白蛋白測(cè)定⑤胰島素測(cè)定⑥C-肽測(cè)定等第五頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日5第一節(jié)概述血糖及正常血糖水平:血糖:指血液中的葡萄糖.正常血糖濃度:

空腹波動(dòng)在3.89~6.11mmol/L(70~110mg/dl)餐后2h內(nèi)應(yīng)≤7.8mmol/L(≤140mg/dl)。第六頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日6

第七頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日7(一)血糖的來(lái)源、去路和調(diào)節(jié)一、血糖的來(lái)源、去路和調(diào)節(jié)3.89~6.11第八頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日8二、血糖濃度的調(diào)節(jié)1、肝臟調(diào)節(jié)作用:

雙向調(diào)控功能:從器官水平通過(guò)神經(jīng)-激素的作用,使肝細(xì)胞內(nèi)各種糖代謝的酶活性改變。升糖調(diào)節(jié)1:具有活性很高的葡萄糖-6-磷酸酶,可促進(jìn)肝糖原水解,補(bǔ)充和升高血糖。升糖調(diào)節(jié)2:肝臟具有活性高且易誘導(dǎo)的糖異生酶類(lèi),禁食或饑餓時(shí)能將非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖(占55-90%)。降糖調(diào)節(jié):促進(jìn)組織攝取葡萄糖,促進(jìn)肝糖原和脂肪合成、和抑制肝糖原分解、抑制糖異生。第九頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日92、激素調(diào)節(jié)作用降低血糖濃度的激素

①胰島素②胰島素樣生長(zhǎng)因子

升高血糖濃度的激素①胰高血糖素②腎上腺素③生長(zhǎng)激素④皮質(zhì)醇

⑤甲狀腺激素第十頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日10

胰島素胰島素結(jié)構(gòu)胰島素作用于靶細(xì)胞的機(jī)制影響胰島素生物活性效應(yīng)的因素胰島素功能第十一頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日11

胰島β細(xì)胞前胰島素原

胰島素

C肽

有活性

無(wú)活性胰島素結(jié)構(gòu):51個(gè)aa的蛋白類(lèi)激素

等摩爾第十二頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日12胰島素作用于靶細(xì)胞的機(jī)制第十三頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日13胰島素的生物活性效應(yīng)取決于:1、靶細(xì)胞上胰島素受體的絕對(duì)或相對(duì)數(shù)量2、到達(dá)靶細(xì)胞的胰島素濃度3、胰島素與靶細(xì)胞受體的親和力4、胰島素與受體結(jié)合后的細(xì)胞內(nèi)改變情況胰島素降血糖機(jī)理:

1、加快葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)速率2、促進(jìn)糖原合成3、加速糖氧化分解4、促進(jìn)糖轉(zhuǎn)化為脂肪5、抑制糖異生第十四頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日143、神經(jīng)調(diào)節(jié)作用部位

1、下丘腦2、自主神經(jīng)(交感和副交感神經(jīng))

方式:

1、直接作用于肝臟;

2、調(diào)節(jié)激素的分泌而影響血糖。內(nèi)臟神經(jīng)迷走神經(jīng)第十五頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日15糖代謝紊亂:高血糖癥與糖尿病低血糖癥酮癥半乳糖血癥二、

糖代謝紊亂第十六頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日16(一)高血糖癥與糖尿?。?、高血糖癥:空腹血漿血糖(FPG)>6.11

mmol/L(130mg/dl)生理性:包括飲食性(高糖飲食)或情感性(情緒緊張,腎上腺分泌增加)病理性:見(jiàn)于糖尿??;內(nèi)分泌腺(甲狀腺、腎上腺皮質(zhì)或髓質(zhì)、胰島細(xì)胞功能亢進(jìn));顱內(nèi)壓升高刺激血糖中樞;嘔吐、腹瀉、高熱等引起的脫水。尿糖:若血糖濃度高于腎糖閾值9.0mmol/L,出現(xiàn)尿糖。第十七頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日172、糖尿?。╠iabetesmellitus,DM)

定義:是一種慢性、復(fù)雜的代謝紊亂性疾病,系胰島素相對(duì)或絕對(duì)不足,或利用缺陷引起。臨床特征:血糖持續(xù)升高,甚至出現(xiàn)糖尿。長(zhǎng)期患有糖尿病常有脂類(lèi)、蛋白質(zhì)代謝紊亂以及眼、腎的微血管病變及神經(jīng)病變等并發(fā)癥。嚴(yán)重者還可出現(xiàn)水、電解質(zhì)紊亂及酸堿平衡紊亂,表現(xiàn)為高脂血癥,酮癥酸中毒等,重者可致死亡。第十八頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日18第十九頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日19發(fā)病機(jī)制:1、胰腺β細(xì)胞的自身免疫性損傷2、機(jī)體對(duì)胰島素的作用產(chǎn)生抵抗DM的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目:

血糖測(cè)定、尿糖測(cè)定、OGTT、血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白測(cè)定、胰島素與胰島素抗體測(cè)定、C肽測(cè)定、胰島素釋放試驗(yàn)以及相關(guān)代謝產(chǎn)物測(cè)定。

第二十頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日20糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn):,不主張作第三次OGTT試驗(yàn)。第二十一頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日21(二)低血糖癥

1、概念:低血糖癥

是指血糖濃度低于3.89mmol/L(葡萄糖氧化酶法)時(shí)臨床出現(xiàn)一系列因血糖濃度過(guò)低引起的癥候群。發(fā)病原因:來(lái)源<去路①激素效應(yīng):升血糖激素缺乏,降血糖激素過(guò)剩。②肝病變:肝功嚴(yán)重?fù)p傷致肝糖原減少和糖異生嚴(yán)重障礙。③長(zhǎng)期饑餓或劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)代謝率增加,血糖消耗過(guò)多。第二十二頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日22分類(lèi):低血糖癥空腹性低血糖刺激性低血糖反應(yīng)性低血糖癥外源性低血糖癥酒精性低血糖癥半乳糖性低血糖癥餐后性低血糖癥功能性低血糖癥Ⅱ型糖尿病或糖耐量受損伴有的低血糖癥營(yíng)養(yǎng)性低血糖第二十三頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日23(三)酮癥1、概念:酮體:乙酰乙酸、β-羥丁酸及丙酮三者統(tǒng)稱(chēng)為酮體20%78%2%酮血癥:酮體形成過(guò)多引起血中含量增高,稱(chēng)為酮血癥。酮體形成過(guò)多的原因糖尿?。禾菙z取不足:脂肪動(dòng)員糖原貯積?。褐緞?dòng)員堿中毒:代償?shù)诙捻?yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日242、酮體的生成:糖代謝障礙脂肪酸分解3、酮體的測(cè)定及臨床意義:(不能同時(shí)檢測(cè)酮體三種成分)Gerhardt’s氧化鐵試驗(yàn)乙酰乙酸硝普納反應(yīng)丙酮測(cè)定臨床意義:1、如有酮體存在,需確定酮酸中毒狀態(tài)

2、酮血癥的診斷對(duì)指導(dǎo)胰島素治療最有價(jià)值。第二十五頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日25(四)半乳糖血癥1、概念:

半乳糖血癥是機(jī)體不能轉(zhuǎn)化利用半乳糖及其中間代謝產(chǎn)物的一種常染色體隱性遺傳病,主要特征為血和尿中半乳糖增高。2、生化缺陷:酶的缺陷半乳糖半乳糖-1-磷酸葡萄糖-1-磷酸UDPGUDP-半乳糖葡萄糖-6-磷酸半乳糖激酶半乳糖-1-磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶(最常見(jiàn))UDP-半乳糖-4-差向酶臨床表現(xiàn):酶缺乏導(dǎo)致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉積在肝臟、腎腦、眼晶狀體和紅細(xì)胞中,引起相應(yīng)的病變。代謝過(guò)程:第二十六頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日26第二節(jié)體液葡萄糖測(cè)定一、血糖測(cè)定測(cè)定方法無(wú)機(jī)化學(xué)法有機(jī)化學(xué)法酶法第二十七頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日27(一)無(wú)機(jī)化學(xué)法:Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的還原性(二)有機(jī)化學(xué)法:鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等Cu2+OH-Cu+Glu磷鉬酸顯色鄰甲苯胺+Glu葡萄糖基胺希夫氏堿藍(lán)綠色化合物縮合脫水分子重排特異性差干擾因素多(三)酶法(1)己糖激酶法(HK)(2)葡萄糖氧化酶法(GOD法)第二十八頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日28

葡萄糖+ATP

HK葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖內(nèi)酯+NADPH

NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加與標(biāo)本中的葡萄糖濃度成正比。原理:評(píng)價(jià):本法特異性高,靈敏度高,干擾因素少,適用于自動(dòng)化分析,為葡萄糖測(cè)定的參考方法,但是試劑較貴。1、己糖激酶法(HK法)

第二十九頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日29

操作簡(jiǎn)單,特異性較高,是血糖測(cè)定的首選方法.但溶血、GSH、Vc、膽紅素,GSH可引起測(cè)定結(jié)果負(fù)偏差。2、葡萄糖氧化酶法(GOD)原理:

葡萄糖+O2+H2OGOD

葡萄糖酸內(nèi)酯+H2O2

2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD

紅色醌類(lèi)化合物+H2O+O2

評(píng)價(jià)第三十頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日30二、血糖測(cè)定的臨床意義(一)生理性高血糖見(jiàn)于情緒激動(dòng)時(shí)交感神經(jīng)興奮促使腎上腺素等分泌增加,也可見(jiàn)于一次性食入大量糖。(二)病理性高血糖1.糖尿病血糖測(cè)定是糖尿病最簡(jiǎn)單的篩查試驗(yàn)糖尿病治療效果評(píng)價(jià)血糖水平監(jiān)控有利于糖尿病患者調(diào)整飲食攝入量和胰島素注射量,對(duì)降低其長(zhǎng)期并發(fā)癥有積極作用。2.內(nèi)分泌腺功能障礙

甲狀腺功能、腎上腺皮質(zhì)及髓質(zhì)功能亢進(jìn)等引起的升高血糖的激素分泌過(guò)多出現(xiàn)高血糖。3.顱內(nèi)壓增高:4.脫水引起的高血糖嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。第三十一頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日31

葡萄糖耐量試驗(yàn)概念適應(yīng)證操作方法葡萄糖耐量曲線臨床意義第三節(jié)糖耐量試驗(yàn)第三十二頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日32一、糖耐量和葡萄糖耐量試驗(yàn)(一)糖耐量

正常人由于體內(nèi)有一套完善的調(diào)節(jié)血糖濃度的機(jī)制,即使一次攝入大量的葡萄糖,血糖濃度也僅暫時(shí)升高,不出現(xiàn)糖尿,且于2h內(nèi)恢復(fù)到正常血糖水平,此即為耐糖現(xiàn)象。若調(diào)節(jié)功能失調(diào),口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后,血糖急劇升高,在一定時(shí)限內(nèi)不能恢復(fù)到原有水平,此種現(xiàn)象稱(chēng)為糖耐量降低。反之給予大量葡萄糖后,血糖升高不明顯,或緩慢地輕度上升,稱(chēng)糖耐量增加。第三十三頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日33口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)靜脈葡萄糖耐量試(IGTT)(二)葡萄糖耐量試驗(yàn)葡萄糖耐量試驗(yàn)是指口服或注射一定量葡萄糖后,每間隔一定時(shí)間測(cè)定血糖水平進(jìn)行分析。臨床常用OGTT,靜脈葡萄糖耐量試驗(yàn)是測(cè)定糖尿病患者胰島素分泌的反應(yīng)性和能力的試驗(yàn),但不適用于臨床常規(guī)診斷。第三十四頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日341、空腹血糖水平在臨界值(6~7mmol/L)而又疑為糖尿病患者;2、空腹或餐后血糖濃度正常,但有發(fā)展為糖尿病可能的人群;3、以前糖耐量異常的危險(xiǎn)人群;4、妊娠性糖尿病的診斷;5、臨床上出現(xiàn)腎病、神經(jīng)病變和視網(wǎng)膜病而又無(wú)法做出合理解釋者;6、作為流行病學(xué)研究的手段。OGTT試驗(yàn)適應(yīng)證:二、口服葡萄糖耐量試驗(yàn)第三十五頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日35

試驗(yàn)前三天,受試者每日食物中糖含量不應(yīng)低于150g,且維持正常活動(dòng).影響試驗(yàn)的藥物應(yīng)在三天前停用,受試前應(yīng)空腹10~16h.

坐位取血后5分鐘內(nèi)飲入250ml含75g無(wú)水葡萄糖的糖水,妊娠婦女用量為100g,兒童按1.75g/kg體重給予,不超75g。糖后每隔30分鐘取血1次,共4次。必要時(shí)可延長(zhǎng)時(shí)間,可長(zhǎng)達(dá)服糖后6小時(shí)。于采血同時(shí),每隔1小時(shí)留取尿液作尿糖試驗(yàn)。整個(gè)過(guò)程不可吸煙、和咖啡、喝茶或進(jìn)食。OGGT方法:WHO標(biāo)準(zhǔn)化曲線繪制:

一般應(yīng)有5次測(cè)定結(jié)果。以測(cè)定血糖的時(shí)間為橫坐標(biāo)(空腹時(shí)為0h),血糖濃度為縱坐標(biāo),繪制曲線。第三十六頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日36參考范圍:

空腹血糖<6.1mmol/L;服糖后30~60分鐘血糖升高達(dá)峰值,一般<10mmol/L;服糖后2小時(shí)內(nèi)恢復(fù)至空腹血糖水平。同時(shí)測(cè)定上述各時(shí)間的尿糖均為陰性。臨床意義:糖尿病性糖耐量糖耐量受損

空腹血糖濃度≥7.0mmol/L,服糖后30~60min血糖急劇升高,峰值超過(guò)10mmol/L,并出現(xiàn)尿糖;隨后血糖濃度恢復(fù)緩慢,2h后仍高于空腹水平。

空腹血糖濃度<7.0mmol/L,但2h血糖≥7.8mmol/L,<11.1mmol/L為糖耐量減退(IGT);空腹血糖濃度≥6.1mmol/L,但<7.0mmol/L,2h血糖<7.8mmol/L為空服血糖損害(IFG)。

第三十七頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日37三、妊娠期糖尿病診斷方法:

在孕24~28周內(nèi),口服50g葡萄糖后,測(cè)定1小時(shí)血糖濃度,若在7.8mmol/L以上者,則提示妊娠性糖尿病的可能性,應(yīng)作OGTT:測(cè)定空腹血糖濃度,糖負(fù)荷量100g,然后每小時(shí)檢測(cè)一次血糖濃度,連續(xù)3小時(shí)。診斷標(biāo)準(zhǔn):空腹>5.8mmol/L、1h>10.5mmol/L、2h>9.2mmol/L、3h>8.0mmol/L,2個(gè)結(jié)果超過(guò)以上檢測(cè)值,方可診斷為妊娠性糖尿病。第三十八頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日38四、糖尿病診斷程序7.87.87.8第三十九頁(yè),共四十四頁(yè),2022年,8月28日39

血清糖化血紅蛋白(GHb)的檢測(cè)*臨床意義:GHb可反應(yīng)測(cè)定前較長(zhǎng)時(shí)間(6~8周)的血糖水平

1.在糖尿病門(mén)診,常用GHb評(píng)價(jià)糖尿病患者血糖控制水平,當(dāng)糖尿病控制不佳時(shí)GHb可高達(dá)正常2倍以上。2.

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