甾體激素類藥物的分析藥物分析詳解演示文稿

甾體激素類藥物的分析藥物分析詳解演示文稿當(dāng)前1頁，總共66頁。（優(yōu)選）甾體激素類藥物的分析藥物分析當(dāng)前2頁，總共66頁?；窘Y(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷駢多氫菲ABCD12345678910111213141516171819概述當(dāng)前3頁，總共66頁。分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素當(dāng)前4頁，總共66頁。腎上腺皮質(zhì)激素氫化可的松當(dāng)前5頁，總共66頁。腎上腺皮質(zhì)激素醋酸地塞米松當(dāng)前6頁，總共66頁。腎上腺皮質(zhì)激素曲安息龍當(dāng)前7頁，總共66頁。腎上腺皮質(zhì)激素地塞米松磷酸鈉當(dāng)前8頁，總共66頁。雄性激素甲睪酮當(dāng)前9頁，總共66頁。雄性激素丙酸睪酮當(dāng)前10頁，總共66頁。蛋白同化激素苯丙酸諾龍當(dāng)前11頁，總共66頁。孕激素黃體酮當(dāng)前12頁，總共66頁。孕激素醋酸甲地孕酮當(dāng)前13頁，總共66頁。雌性激素炔雌醇當(dāng)前14頁，總共66頁。雌性激素雌二醇當(dāng)前15頁，總共66頁。炔諾酮此外當(dāng)前16頁，總共66頁。炔諾孕酮返回當(dāng)前17頁，總共66頁。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1.腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17

–

α–醇酮基還原性當(dāng)前18頁，總共66頁。2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17–

β–羥基可成酯當(dāng)前19頁，總共66頁。3.孕激素主要活性基團性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化納反應(yīng)當(dāng)前20頁，總共66頁。4.雌性激素主要活性基團性質(zhì)A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17–羥基可成酯返回當(dāng)前21頁，總共66頁。二、鑒別試驗（一）與強酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）當(dāng)前22頁，總共66頁。與硫酸顯色反應(yīng)

顯色熒光加水稀釋潑尼松龍深紅

絮狀↓灰潑尼松橙

黃→藍綠炔雌醚橙紅

黃綠

↓紅色

炔雌醇橙紅

黃綠

絮狀↓玫紅醋酸可的松黃或微褪色并澄

帶橙清當(dāng)前23頁，總共66頁。(二)官能團的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ1、C17

–

α–醇酮基還原性呈色反應(yīng)此外還有斐林試液、多倫試液當(dāng)前24頁，總共66頁。甾酮類激素藥物呈色羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼當(dāng)前25頁，總共66頁。具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物呈色亞硝基鐵氰化納間二硝基酚芳香醛3.甲酮基當(dāng)前26頁，總共66頁。黃體酮藍紫色亞硝基鐵氰化納其他甾體淡橙色不顯色當(dāng)前27頁，總共66頁。有機氟Fˉ有機破壞有機氯Clˉ4.有機鹵素茜素氟藍

硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色

當(dāng)前28頁，總共66頁。雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基當(dāng)前29頁，總共66頁。含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基的沉淀反應(yīng)↓當(dāng)前30頁，總共66頁。

(三)制備衍生物測定m.p.鹽酸氨基脲苯丙酸諾龍△縮氨基脲衍生物1.縮氨基脲的生成m.p.約180℃（分解）2.酯的水解丙酸睪酮堿性條件睪酮m.p.為150℃~156℃當(dāng)前31頁，總共66頁?！鳎?3-酮、苯環(huán)、其他共軛結(jié)構(gòu)（四）UV法1.結(jié)構(gòu)依據(jù)240nm左右280nm左右當(dāng)前32頁，總共66頁。2.示例曲安西龍丙酸倍氯米松溶劑甲醇乙醇20μg/ml濃度20μg/ml結(jié)果判斷在238nm處有最大吸收在239nm處有最大吸收，A為0.57～0.60，在239nm與263nm處的吸收度比值為2.25～2.45當(dāng)前33頁，總共66頁。結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇（五）IR法當(dāng)前34頁，總共66頁。1505cm-1ν3505cm-13300cm-1ν1590cm-13610cm-1ν酚羥基醇羥基1615cm-1苯環(huán)的骨架振動當(dāng)前35頁，總共66頁。黃體酮結(jié)構(gòu)特征：△４-3-酮、C17-酮基當(dāng)前36頁，總共66頁。1700cm-1C=O20位酮基1665cm-13位酮基1615cm-1870cm-1C-H雙鍵當(dāng)前37頁，總共66頁。（七）TLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別

方法：對照品法要求供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液的主斑點相同。當(dāng)前38頁，總共66頁。（八）HPLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）

方法：對照品法要求在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對照品峰的tR一致。返回當(dāng)前39頁，總共66頁。三、特殊雜質(zhì)檢查（一）其他甾體的檢查

檢查意義：其他甾體與甾體激素藥物結(jié)構(gòu)相似，也有一定的藥理作用而又互不相同.

當(dāng)前40頁，總共66頁。檢查方法（具有一定分離能力）TLC法（高低濃度對比法）HPLC法（類似高低濃度對比法）當(dāng)前41頁，總共66頁。（1）TLC法（高低濃度對比法）

判定方法：

規(guī)定雜質(zhì)斑點數(shù)目

規(guī)定雜質(zhì)斑點顏色當(dāng)前42頁，總共66頁。例：氫化可的松中其他甾體的檢查供試液：本品+氯仿-甲醇（9：1）濃度：3.0mg/ml對照液：供試液（3.0mg/ml）+氯仿-甲醇（9：1）60μg/ml層析：供試液點樣、展開、斑點檢出。

對照液判斷：供試液如顯雜質(zhì)斑點，不得多于3個，其顏色與對照液的主斑點比較，不得更深。當(dāng)前43頁，總共66頁。（2）HPLC法（主成分自身對照法）判定方法：

規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰面積當(dāng)前44頁，總共66頁。硒的檢查（二）來源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫有毒方法藥物氧瓶燃燒二氨基萘比色法測定當(dāng)前45頁，總共66頁。（三）有機溶劑殘留量的檢查（靈敏度法）甲醇不得出峰檢測限=3.1ng丙酮≤5.0%內(nèi)標法+校正因子以地塞米松磷酸鈉為例GC法當(dāng)前46頁，總共66頁。地塞米松磷酸鈉檢查甲醇和丙酮精密稱取本品0.16g，置10ml量瓶中，精密加內(nèi)標溶液2ml，加水稀釋至刻度，作為供試液；另精密量取甲醇10μl(≈7.9mg)與丙酮100μl(≈79mg)置100ml量瓶中，精密加內(nèi)標溶液20ml，加水至刻度，作為對照液。照氣相色譜法測定，含丙酮不得過5.0%，并不得出現(xiàn)甲醇峰。當(dāng)前47頁，總共66頁。（二）游離磷酸鹽的檢查地塞米松磷酸鈉對照品比色法供試液+鉬酸銨+1-氨基-2-萘酚-4-磺酸鉬藍：740nm對照液：同上當(dāng)前48頁，總共66頁。（對照液0.0035%KH2PO4）返回當(dāng)前49頁，總共66頁。（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多內(nèi)標法）（甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他甾體雜質(zhì)，對利用結(jié)構(gòu)特征設(shè)計的比色法有干擾）四、含量測定測定對象：甾體激素類藥物的原料和制劑。當(dāng)前50頁，總共66頁。示例：黃體酮的含量測定

色譜條件：固定相ODS，流動相甲醇-水（65:35），檢測波長254nm，內(nèi)標物己烯雌酚系統(tǒng)適用性試驗：n>1000，R符合規(guī)定。

當(dāng)前51頁，總共66頁。測定樣品：黃體酮原料、注射液。

定量方法：內(nèi)標法當(dāng)前52頁，總共66頁。（二）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素、口服避孕藥苯環(huán)280nm（±）雌激素當(dāng)前53頁，總共66頁。示例：醋酸地塞米松片的含量測定（1）配制供試液

（2）測定：240nm

（3）計算

當(dāng)前54頁，總共66頁。腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基（1）原理異煙腙（黃）酮基異煙肼-3CHCl（縮合）1.異煙肼比色法（三）比色法當(dāng)前55頁，總共66頁。異煙腙（黃色）當(dāng)前56頁，總共66頁。（2）方法對照品法55℃異煙肼?lián)]去乙醇對照液供試液A暗45′當(dāng)前57頁，總共66頁。（3）討論反應(yīng)速度（反應(yīng)專屬性）A.C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基當(dāng)前58頁，總共66頁。B.溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇當(dāng)前59頁，總共66頁。C.水分、溫度、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時→O2與光線無影響t℃↑→ν↑當(dāng)前60頁，總共66頁。D.酸的種類和濃度及異煙肼的濃度酸:異煙肼=2:1鹽酸濃度0.0074mol/L異煙肼濃度0.00365mol/L最大A當(dāng)前61頁，總共66頁。

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強還原性（1）原理2.四氮唑比色法有色甲瓚