章免疫球蛋白與抗體

抗體與γ球蛋白大部分抗體存在于泳動速度最慢的血清組分，即γ球蛋白區(qū)帶，故曾有γ球蛋白（或丙種球蛋白）之稱。當(dāng)前1頁，總共30頁。免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）：指具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。

Ig=Ab+化學(xué)結(jié)構(gòu)類似物免疫球蛋白分泌型：抗體

膜型：B淋巴細胞膜上的抗原受體

Ab=IgIg≠Ab當(dāng)前2頁，總共30頁?？贵w與免疫球蛋白免疫球蛋白化學(xué)按化學(xué)性質(zhì)分IgM、IgG、IgA、IgD、IgE。不一定有抗原用化學(xué)方法提純化學(xué)方法（蛋白質(zhì)濃度）抗體免疫學(xué)，針對某種抗原很多不存在沒有抗原的抗體親和層析免疫學(xué)效價當(dāng)前3頁，總共30頁。第一節(jié)

免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)由二硫鍵相連的四條對稱的多肽鏈構(gòu)成的單體。形成一“Y”字形結(jié)構(gòu)。重鏈輕鏈當(dāng)前4頁，總共30頁。重鏈（Heavychain，H鏈）：含450-550aa，分子量為55-75KD。根據(jù)氨基酸組成、序列及結(jié)構(gòu)的差異，H鏈分為μ、γ、α、δ、ε五類,相應(yīng)的Ig分為五類，分別為IgM、IgG、IgA、IgD、IgE。（一）重鏈與輕鏈當(dāng)前5頁，總共30頁。輕鏈（Lightchain，L鏈）：含214aa，分子量為25KD

根據(jù)輕鏈氨基酸組成、序列及結(jié)構(gòu)的差異，可將輕鏈分為兩型：κ和λ型。正常人血清Ig的κ:λ=2:1。每一Ig單體分子兩條重鏈必須同類，兩條輕鏈必須同型。當(dāng)前6頁，總共30頁。

（二）可變區(qū)和恒定區(qū)（variableregion，V區(qū)）（constantregion，C區(qū)）

據(jù)氨基酸的序列和組成是否變化，可分為可變區(qū)和恒定區(qū)。當(dāng)前7頁，總共30頁。1.可變區(qū)（variableregion，V區(qū)）近N端的1/2L鏈和1/4（或1/5）H鏈，氨基酸的組成及序列變化較大，而得名。⑴高變區(qū)（hypervariableregion，HVR）V區(qū)內(nèi)變化最為劇烈的特定部位。L鏈3個，H鏈3個。因其在空間結(jié)構(gòu)上可與抗原決定簇形成精密的互補，故又稱互補性決定區(qū)（complementaritydetermingregion，CDR）當(dāng)前8頁，總共30頁。

不同Ig分子在高變區(qū)結(jié)構(gòu)上各自具有獨特的氨基酸排序和構(gòu)型特點，也稱為Ig分子的獨特型決定簇（idiotypedeterminants，ID)

。

當(dāng)前9頁，總共30頁。

高變區(qū)（超變區(qū)HVR）、互補性決定區(qū)（CDR)和

獨特型決定簇（ID）指的是Ig分子中的同一結(jié)構(gòu)部位，只是從不同的角度闡述而已。當(dāng)前10頁，總共30頁。⑵骨架區(qū)（frameworkregion，F(xiàn)R）Ig分子V區(qū)高變區(qū)之外的部位，其氨基酸組成及排列相對保守。作用：主要是穩(wěn)定HVR的空間構(gòu)型，以利HVR與抗原表位精細的特異性結(jié)合。N端當(dāng)前11頁，總共30頁。2.恒定區(qū)（constantregion，C區(qū)）近C端的1/2L鏈及3/4（或4/5）H鏈。氨基酸組成在同一物種的同一類Ig中相對穩(wěn)定。N端V區(qū)C區(qū)當(dāng)前12頁，總共30頁。二、免疫球蛋白的功能區(qū)（結(jié)構(gòu)域）

每個結(jié)構(gòu)域約由110個氨基酸組成，呈球形結(jié)構(gòu)，具有特定功能，稱為Ig的功能區(qū)。

（一）功能區(qū)的名稱

L鏈：VL、CLH鏈：VH、CH1、CH2、CH3、CH4（IgM和IgE有）當(dāng)前13頁，總共30頁。（二）絞鏈區(qū)（hingeregion）位于CH1～CH2之間。富含脯氨酸，對蛋白酶敏感，易伸展彎曲。

當(dāng)前14頁，總共30頁。三、免疫球蛋白的水解片段（一）木瓜蛋白酶的水解作用（二）胃蛋白酶的水解作用當(dāng)前15頁，總共30頁。（一）木瓜蛋白酶的水解作用木瓜蛋白酶

水解二個相同的單價抗原結(jié)合片段

（fragmentofantigen-binding，F(xiàn)ab段一個可結(jié)晶片段（crystalizablefragment，F(xiàn)c段）Fab段保留了特異性結(jié)合抗原的功能。Fc段保留了重鏈的抗原性和Ig相應(yīng)功能區(qū)的生物學(xué)活性當(dāng)前16頁，總共30頁。（二）胃蛋白酶的水解作用胃蛋白酶水解IgG一個與抗原雙價結(jié)合的F（ab’）2段小分子多肽碎片（pFc’）（無生物學(xué)活性）當(dāng)前17頁，總共30頁。第二節(jié)五類免疫球蛋白的特點與功能當(dāng)前18頁，總共30頁。（1）IgG：（單體）血清中主要的免疫球蛋白，含量最高（75%左右）。主要的抗感染抗體半衰期最長，是再次免疫應(yīng)答的主要抗體。分子量最小，唯一能通過胎盤的Ig，因此在新生兒

的抗感染免疫中起重要作用。當(dāng)前19頁，總共30頁。（2）IgM（五聚體或單體）五聚體IgM（分泌型IgM)：1.分子量最大，占血清Ig總量5%-10%.2.個體發(fā)育中合成最早的Ig,在早期感染中發(fā)揮重要免疫防御作用，有助于感染性疾病的早期診斷。3.血型抗體主要為IgM。當(dāng)前20頁，總共30頁。（2）IgM（五聚體或單體）單體IgM(膜型IgM,surfaceIgM,sIgM)：

SIgM為細胞膜表面型免疫球蛋白，是B細胞最早出現(xiàn)的重要表面標志。

當(dāng)前21頁，總共30頁。IgM

J鏈IgM抗體結(jié)構(gòu)分泌型IgM膜型IgMsIgM

IgaIgbIgaIgb血液中細胞膜表面穿膜序列當(dāng)前22頁，總共30頁。（3）IgA有血清型和分泌型。血清型IgA：單體，存在于血清中，占血清Ig的10-15%，免疫作用弱。分泌型IgA（SIgA）：雙體,存在于外分泌液中,初乳中含量較高。SIgA是粘膜局部免疫中起重要作用。當(dāng)前23頁，總共30頁。（4）IgD血清含量低（1%）為成熟B細胞膜上的抗原特異性分化受體，是B細胞發(fā)育分化成熟的標志。（5）IgE正常人血清中含量最低（0.002%），過敏患者可升高數(shù)倍。2.半衰期最短，最晚出現(xiàn)的Ig。3.對肥大細胞及嗜堿性粒細胞有高度的親和力。與Ⅰ型超敏反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)。當(dāng)前24頁，總共30頁。第三節(jié)人工制備的抗體

一、多克隆抗體

二、單克隆抗體三、基因工程抗體四、催化抗體當(dāng)前25頁，總共30頁。一、多克隆抗體由多個克隆細胞產(chǎn)生的多種抗體的混合物即多克隆抗體，也稱第一代人工抗體天然抗原（多個抗原表位）機體誘發(fā)多個B細胞克隆活化產(chǎn)生多種針對不同表位的相應(yīng)抗體（多克隆抗體）

由一個始祖細胞分化、增殖所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相同的細胞群稱為克隆（clone）。當(dāng)前26頁，總共30頁。多克隆抗血清或多克隆抗體輸給其他個體，受者會對該抗原產(chǎn)生短期的免疫力，稱為被動免疫。當(dāng)前27頁，總共30頁。多克隆抗體的優(yōu)缺點優(yōu)點:容易開發(fā)缺點：1.抗原使用量大，抗原必須是廉價、容易獲取的，抗原要求純度高。2.不同動物對同一抗原的反應(yīng)有個體差異，抗體質(zhì)量不易控制。3.會與不同抗原產(chǎn)生交