第十一章革蘭氏陰性需氧桿菌詳解演示文稿

第十一章革蘭氏陰性需氧桿菌詳解演示文稿當(dāng)前1頁，總共52頁。優(yōu)選第十一章革蘭氏陰性需氧桿菌當(dāng)前2頁，總共52頁。第一節(jié)布氏桿菌屬（Brucella）布氏桿菌是多種動物和人布氏桿菌病的病原。該菌不僅危害畜牧生產(chǎn)，而且嚴(yán)重?fù)p害人類健康，因此在醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域都極為重視。當(dāng)前3頁，總共52頁。一、主要生物學(xué)特性

（一）形態(tài)及染色

球桿狀或短桿狀，長0.6～1.5μm，多單在。不形成芽孢和莢膜，無鞭毛不運(yùn)動。革蘭氏染色陰性。柯氏染色法布氏桿菌呈紅色，其他菌呈綠色或藍(lán)色。當(dāng)前4頁，總共52頁。布氏桿菌當(dāng)前5頁，總共52頁。（二）生長要求與培養(yǎng)特性

生長要求初代分離營養(yǎng)要求較高，培養(yǎng)基中常需加入血清、血液、肝湯、葡萄糖或泛酸鈣和赤蘚醇等。需氧，適溫37℃，最適pH6.6～7.4。流產(chǎn)布氏桿菌和綿羊布氏桿菌初代分離時尚需5％～10％CO2環(huán)境。當(dāng)前6頁，總共52頁。培養(yǎng)特性

初次分離時生長緩慢，需5～10d甚至20～30d才能長出菌落，但實(shí)驗(yàn)室傳代保存的菌株，培養(yǎng)48～72h即可生長良好。肝湯肉湯呈輕微渾濁生長，無菌膜。但培養(yǎng)日久，可形成菌環(huán)。血清肝湯瓊脂形成無色透明、隆起、光滑、濕潤、有光澤、邊緣整齊的圓形小菌落。直徑0.5～1.0mm。當(dāng)前7頁，總共52頁。（三）生化反應(yīng)

本菌能分解尿素，能產(chǎn)生硫化氫。根據(jù)不同生物型產(chǎn)生硫化氫的情況、脲酶作用時間和對堿性染料抑制作用的敏感性不同，可鑒別不同種型的布氏桿菌。當(dāng)前8頁，總共52頁。（四）種和生物型

種

型流產(chǎn)布氏桿菌（Br.abortus）1、2、3、4、5、6、7型

馬爾他布氏桿菌（Br.melitensis）1、2、3型豬布氏桿菌（Br.suis）1、2、3、4、5型綿羊布氏桿菌（Br.ovis）1個沙林鼠布氏桿菌（Br.neotomae）1個犬布氏桿菌（Br.canis）1個田鼠布氏桿菌（Br.microti）？牛布氏桿菌（Br.ovis）？海豹布氏桿菌（Br.pinnipediae）

？海豚布氏桿菌（Br.cetacease）

？當(dāng)前9頁，總共52頁。（五）抗原性布氏桿菌具有A和M兩種表面抗原，兩者的含量在不同的種型間有差異。流產(chǎn)布氏桿菌以A抗原為主，馬爾他布氏桿菌以M抗原為主，而豬布氏桿菌兩種抗原含量相近。A抗原和M抗原分別能與相應(yīng)的單相抗血清發(fā)生凝集反應(yīng)?？捎媚囼?yàn)鑒別兩種不同的抗原。當(dāng)前10頁，總共52頁。

二、致病性本菌致布氏桿菌病，可感染60多種動物，包括人類、各種家畜、野生哺乳動物、嚙齒動物、鳥類、爬蟲類、兩棲類和魚類。細(xì)菌通過皮膚、口腔、眼結(jié)膜、陰道粘膜等部位侵入體內(nèi)。多數(shù)動物為隱性感染。實(shí)驗(yàn)動物中，豚鼠最易感，小鼠和家兔也可感染。當(dāng)前11頁，總共52頁。本病特征母畜生殖器官和胎盤發(fā)炎，引起流產(chǎn)、不孕和多種組織的慢性炎癥（如慢性子宮內(nèi)膜炎、乳房炎、關(guān)節(jié)炎等）。公畜睪丸炎、副睪炎幼畜關(guān)節(jié)炎當(dāng)前12頁，總共52頁。流產(chǎn)母牛從陰道排出污灰色或棕紅色有惡臭的分泌物當(dāng)前13頁，總共52頁。病母牛流產(chǎn)，產(chǎn)出發(fā)育較為完全的死胎當(dāng)前14頁，總共52頁。病牛流產(chǎn)，產(chǎn)出發(fā)育不全的胎兒，全身腫脹，有出血斑當(dāng)前15頁，總共52頁。流產(chǎn)的胎兒及胎衣當(dāng)前16頁，總共52頁。胎衣水腫增厚，呈膠樣浸潤，子葉上有出血當(dāng)前17頁，總共52頁。感染羊陰囊脹大、水腫當(dāng)前18頁，總共52頁。病公豬睪丸腫大當(dāng)前19頁，總共52頁。病豬睪丸萎縮當(dāng)前20頁，總共52頁。當(dāng)前21頁，總共52頁。當(dāng)前22頁，總共52頁。當(dāng)前23頁，總共52頁。病豬關(guān)節(jié)腫脹當(dāng)前24頁，總共52頁。

三、微生物學(xué)診斷布氏桿菌病常表現(xiàn)為慢性或隱性感染，其診斷和檢疫主要依靠血清學(xué)檢查及變態(tài)反應(yīng)檢查。細(xì)菌學(xué)檢查僅用于發(fā)生流產(chǎn)的動物和其他特殊情況。當(dāng)前25頁，總共52頁。（一）細(xì)菌學(xué)檢查

1、病料

流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物、胎盤、羊水、陰道分泌物、乳汁和尿液等。

2、診斷方法病料柯氏染色涂片鏡檢分離培養(yǎng)純培養(yǎng)鑒定豚鼠血清抗體當(dāng)前26頁，總共52頁。（二）血清學(xué)檢查1、用已知抗體檢測抗原

用已知抗體檢查病料中的布氏桿菌，或鑒定分離菌是否為布氏桿菌可用：熒光抗體技術(shù)反向間接血凝試驗(yàn)間接炭凝集試驗(yàn)免疫酶組化法當(dāng)前27頁，總共52頁。2、用已知抗原檢測抗體

動物感染該菌7～15d出現(xiàn)抗體，檢測抗體是布病診斷和檢疫的主要手段。方法：玻板凝集試驗(yàn)虎紅平板凝集試驗(yàn)乳汁環(huán)狀試驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)當(dāng)前28頁，總共52頁。試管凝集試驗(yàn)

操作按檢疫規(guī)程進(jìn)行。牛、馬、駱駝血清凝集價1:100時判為陽性，1:50為可疑。羊、豬、狗等血清凝集價1:50為陽性，1:25為可疑?？梢刹⌒笥?～4周后采血重檢，如仍為可疑反應(yīng)，牛、羊即可按陽性處理；豬、馬則須視情況而定。當(dāng)前29頁，總共52頁?；⒓t平板凝集試驗(yàn)取被檢血清和虎紅平板抗原各0.03ml，滴加于玻板上，混勻，在4～10min內(nèi)出現(xiàn)任何程度凝集者即為陽性反應(yīng)。乳汁環(huán)狀試驗(yàn)為檢查新鮮乳汁中抗體的方法，操作簡便，準(zhǔn)確性較高，常被用于畜群布氏桿菌病的監(jiān)測。當(dāng)前30頁，總共52頁。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)特異性和敏感性均較凝集試驗(yàn)高，是慢性布氏桿菌病一種可靠的診斷方法，已作為世界各國清除病畜的必要手段。規(guī)定1:10被檢血清阻止溶血在50％以上，即為陽性反應(yīng)。因補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)的操作方法復(fù)雜，只在特殊情況下才應(yīng)用。當(dāng)前31頁，總共52頁。（三）變態(tài)反應(yīng)檢查變態(tài)反應(yīng)現(xiàn)象一般在感染后的20～25d出現(xiàn)，因此不宜作早期診斷。本法適合于動物的大群檢疫，主要用于綿羊和山羊，其次為豬。檢測時，將布氏桿菌水解素0.2ml注射于羊尾根皺襞部或豬耳根部皮內(nèi)，24及48h后各觀察反應(yīng)一次。若注射部發(fā)生紅腫，即判為陽性反應(yīng)。此法對慢性病例的檢出率較高。當(dāng)前32頁，總共52頁。四、免疫防治我國目前用的疫苗：M5弱毒活菌苗可用于牛、羊和鹿布病的預(yù)防。皮下注射或氣霧免疫。免疫期羊1年半，牛、鹿各為1年。M90弱毒活菌苗同M5弱毒活菌苗。S2弱毒活菌苗可用于豬、羊、牛等動物，甚至可以接種懷孕動物而不引起流產(chǎn)。免疫方法采用飲水、氣霧和皮下注射3種。免疫期豬為1年，牛和羊均為2年。當(dāng)前33頁，總共52頁。第二節(jié)伯克氏菌屬（Burkholderia）是新建立的一個屬，該屬成員來自假單胞菌屬Ⅱ群，現(xiàn)有30多種細(xì)菌，對人畜致病的主要有鼻疽伯克氏菌及偽鼻疽伯克氏菌。當(dāng)前34頁，總共52頁。一、鼻疽伯克氏菌（B.mallei）鼻疽伯克氏菌，原名鼻疽假單胞菌，慣稱鼻疽桿菌，為馬、騾、驢等單蹄獸鼻疽病的病原體，也能感染人及其他家畜和多種野生動物。此病可呈急性或慢性經(jīng)過，病變特征為皮膚、鼻腔粘膜、肺臟及其他實(shí)質(zhì)器官形成典型的鼻疽結(jié)節(jié)和潰瘍。當(dāng)前35頁，總共52頁。（一）形態(tài)及染色

G－中等大小桿菌，無芽孢、無莢膜、不運(yùn)動。單獨(dú)散在。美藍(lán)染色可見異染顆粒，是本菌的形態(tài)特征。當(dāng)前36頁，總共52頁。（二）生長要求及培養(yǎng)特性

生長要求專性需氧，普通培養(yǎng)基中生長緩慢，加入適量甘油、血紅蛋白、血液、血清或葡萄糖可促進(jìn)生長，適溫37℃，最適pH為6.4～6.8。當(dāng)前37頁，總共52頁。培養(yǎng)特性

甘油肉湯均勻渾濁生長，并逐漸形成灰白色粘稠沉淀，10～15d后液面形成灰白色菌環(huán)或菌膜。甘油瓊脂24～48h后，形成灰白色至灰黃色中等大小菌落，直徑2-3mm。

馬鈴薯瓊脂斜面：48h后，可出現(xiàn)棕黃色蜂蜜樣的粘稠菌苔，隨著時間的延長色澤逐漸變深。當(dāng)前38頁，總共52頁。（三）致病性本菌在自然條件下主要感染馬、騾、驢等單蹄獸，引起鼻疽病。駱駝、犬、貓等家畜以及獅、虎、豹、狼、狐、貂等野獸也可感染。牛、豬、綿羊、山羊及禽類不感染。人類偶爾也可經(jīng)創(chuàng)傷或吸入含菌材料而受感染，并引起致死性疾病。當(dāng)前39頁，總共52頁。實(shí)驗(yàn)動物貓和倉鼠最易感，豚鼠次之。接種細(xì)菌于雄性豚鼠腹腔后可引起典型的睪丸炎，睪丸腫脹化膿而后破潰，此反應(yīng)稱為：Strauss反應(yīng)，具有一定診斷價值。

Strauss反應(yīng)當(dāng)前40頁，總共52頁。（四）微生物學(xué)診斷包括細(xì)菌學(xué)檢查、血清學(xué)檢查和變態(tài)反應(yīng)檢查。在進(jìn)行大規(guī)模檢疫時主要采用臨床檢查、變態(tài)反應(yīng)和補(bǔ)反相配合的檢查方法，其中任何一種呈陽性，都定為鼻疽病馬。而細(xì)菌學(xué)檢查只有在特殊病例才被應(yīng)用。當(dāng)前41頁，總共52頁。1、變態(tài)反應(yīng)檢查是鼻疽診斷和檢疫最常用的方法，所用診斷試劑為鼻疽菌素（mallein）。馬感染鼻疽菌后2～3周,對鼻疽菌素呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，以后隨著病程的發(fā)展反應(yīng)逐漸增強(qiáng)。病馬保持變態(tài)反的時間有的可達(dá)8～10年，甚至終生。因此，該方法在鼻疽診斷、檢疫和流行病學(xué)調(diào)查上是一種必不可少的手段。當(dāng)前42頁，總共52頁。變態(tài)反應(yīng)診斷點(diǎn)眼反應(yīng)眼瞼試驗(yàn)皮下試驗(yàn)皮膚試驗(yàn)噴霧診斷其中以點(diǎn)眼法最為常用。為我國檢疫規(guī)程主要采用方法。當(dāng)前43頁，總共52頁。點(diǎn)眼法是將鼻疽菌素3～4滴滴入馬匹一則眼結(jié)膜囊內(nèi)，分別于點(diǎn)眼后3、6、9及24h觀察反應(yīng)。如眼結(jié)膜紅腫并排出膿性分泌物，即為陽性反應(yīng)；結(jié)膜無反應(yīng)或輕度潮紅、流淚或有少量的粘性分泌物判為陰性。當(dāng)前44頁，總共52頁。點(diǎn)眼法操作簡便，特異性和檢出率都很高，無論是對急性、慢性以及開放型和隱性感染的馬匹均可檢出。故此法最適合于畜群大批檢疫，尤其是以5～6d的間隔反復(fù)點(diǎn)眼，檢出率更高。所以點(diǎn)眼一般連續(xù)3次，每次間隔5～6天。點(diǎn)眼法對騾子的檢出率較低。驢的眼結(jié)膜對鼻疽菌素不敏感，一般檢不出。此外，1～2的幼馬駒眼結(jié)膜對鼻疽菌素也不敏感。當(dāng)前45頁，總共52頁。馬、騾三次點(diǎn)眼檢出率第一次（%）第二次（%）第三次（%）馬60～709598騾16.960.789.3當(dāng)前46頁，總共52頁。2、血清學(xué)檢查常用補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。此法特異性很高，凡補(bǔ)反呈陽性的馬，剖檢時95％～99％都有鼻疽病變。但本反應(yīng)檢出率較低，只能檢出大多數(shù)活動型鼻疽馬；而對于點(diǎn)眼陽性但無臨床癥狀的馬只能檢出10％～25％左右。因此，補(bǔ)反只能作為鼻疽菌素點(diǎn)眼的一種輔助診斷方法，用來檢出其中的活動型病馬，而不能代替鼻疽菌素點(diǎn)眼試驗(yàn)。當(dāng)前47頁，總共52頁。五、免疫防治對于鼻疽免疫，迄今為止還沒有研制出可供實(shí)用的有效菌苗。一般防制措施是采用全面檢疫，然后將檢出的開放性鼻疽病馬予以撲殺或隔離治療后劃地使役，將檢出的非開放性陽性病馬劃地隔離使役，并培養(yǎng)健康幼駒以更新畜群。當(dāng)前48頁，總共52頁。第三節(jié)

假單胞菌屬(Pseudomonas)假單胞菌為專性需氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。本屬細(xì)菌種類繁多，廣泛存在于土壤、水、植物及腐物中，多為條件致病菌，與多種食物的腐敗有關(guān)。與動物疾病有關(guān)的主要有銅綠假單胞菌。當(dāng)前49頁，總共52頁。一、銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌（P.aeruginosa），慣稱綠膿桿菌，因能產(chǎn)生綠色水溶性色素，感染創(chuàng)口時可形成綠色膿汁而得名。本菌分布廣泛，土壤和水中、人畜腸道及皮膚亦有存在是化膿性感染及燒傷感染的常見菌。當(dāng)前50頁，總共52頁。（一）主要生物學(xué)特性革蘭氏陰性桿菌1.5-3.0μm，無芽孢，