醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱

醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱課程編號：12031130課程名稱：醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)/MedicalGenetics課程屬性：必修實(shí)驗(yàn)屬性：獨(dú)立設(shè)課開課學(xué)期：第四學(xué)期學(xué)時(shí)：12學(xué)時(shí)適用專業(yè)：五年制臨床本科學(xué)分：1學(xué)分開課部門：醫(yī)學(xué)院生化與遺傳教研室考核要求：開卷考試、百分制(操作考試70%，平時(shí)考核30%)、及格線60分課程簡介：醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課是醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)課程的重要內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)課有助于加深和鞏固基礎(chǔ)理論知識，并進(jìn)一步了解和掌握本學(xué)科的基本實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和操作技能。在培養(yǎng)學(xué)生分析問題、綜合解決問題能力方面具有重要作用。為此，要求學(xué)生做到以下幾點(diǎn)：1、實(shí)驗(yàn)課前做好預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理。2、復(fù)習(xí)有關(guān)理論內(nèi)容。3、熟悉實(shí)驗(yàn)的主要步驟。4、初步估計(jì)和判定實(shí)驗(yàn)的可能結(jié)果。一、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置及學(xué)時(shí)分配項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型開出要求學(xué)時(shí)分配1人體外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備綜合聯(lián)合42人類染色體核型分析驗(yàn)證獨(dú)立43遺傳咨詢設(shè)計(jì)獨(dú)立4學(xué)時(shí)總計(jì)12二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及教學(xué)要求實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目1：人體外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備1、教學(xué)內(nèi)容（1）采血在采血前，對各種用品進(jìn)行清洗、無菌處理，配制、分裝并凍存培養(yǎng)液(5mL／瓶)用5mL注射器抽取肝素0.1mL，備用。常規(guī)消毒肘部皮膚，用抽取肝素的注射器靜脈采2mL，輕輕搖勻，待接種培養(yǎng)。（2）接種培養(yǎng)將事先配制凍存的裝有5mL培養(yǎng)液的鏈霉素培養(yǎng)瓶或其它培養(yǎng)瓶從冰箱中取出，置室溫融化，每瓶滴入約0.3mL肝素抗凝血，輕輕搖勻，置370C培養(yǎng)箱培養(yǎng)72（3）積累分裂中期細(xì)胞在終止培養(yǎng)前2小時(shí)，于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入濃度為20μg／mL秋水仙素1滴，終濃度為0.1-0.15μg/mL，搖勻，置370C溫箱繼續(xù)培養(yǎng)2小時(shí)后收集細(xì)胞、制片。（4）制片a收集細(xì)胞：b低滲：c預(yù)固定：d固定(一)：f固定(二)：g滴片：h染色和觀察：2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解：細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)生長、分裂所需條件。（2）熟悉：人類外周血淋巴細(xì)胞短期培養(yǎng)的方法（3）掌握：染色體標(biāo)本的制備技術(shù)。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目2：人類染色體核型分析1、教學(xué)內(nèi)容（1）正常人類染色體非顯帶的核型和G帶帶型識別的主要特征（2）正常人非顯帶和G顯帶核型分析A、每位同學(xué)發(fā)正常人外周血淋巴細(xì)胞非顯帶和G顯帶中期分裂相照片各1張。其中一張將染色體按其輪廓逐個(gè)剪下，根據(jù)其大小、帶型特點(diǎn)和著絲粒位置等，依次分組、配對，排放在核型分析紙上。擺放時(shí)短臂向上，長臂向下，著絲粒位于鉛筆畫的橫線上，多次調(diào)整檢查無誤后，方可進(jìn)行粘貼。B、將照片適當(dāng)剪小，粘貼在核型分析紙上方正中間。C、寫出分析結(jié)果。2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解非顯帶染色體的核型分析方法。（2）熟悉G顯帶核型染色體特征（3）掌握G顯帶核型分析方法實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目3：遺傳咨詢1、教學(xué)內(nèi)容（1）分析下列系譜，判斷各系譜中單基因遺傳病的遺傳方式，并寫出患者及其他各成員的基因型(圖1～圖5)。（2）某女曾生育過一先天愚型患兒，現(xiàn)再次妊娠，懼怕再生同病患兒前來咨詢。應(yīng)該怎樣計(jì)算再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)？（3）某種遺傳病男女發(fā)病機(jī)會均等，而且發(fā)病的患者可出現(xiàn)在父母均正常的家庭中?，F(xiàn)有一對表現(xiàn)都正常的姨表兄妹，準(zhǔn)備結(jié)婚，雖然雙方父母正常，但他們的舅表兄患有此病，所以前來咨詢。a.請問此病的遺傳方式如何？b.這對姨表兄妹都是攜帶者的可能性有多大?c.他們婚后出生此病患兒的概率是多大?d.如果他們均為攜帶者，那么他們婚后生出此病患者的可能性有多大?(4)某男性，38歲，兩次結(jié)婚，第—妻妊娠8次均于妊娠2個(gè)月左右流產(chǎn)，故離婚，與第二妻婚后，女方受孕3次亦均在3個(gè)月內(nèi)流產(chǎn)。請分析流產(chǎn)的原因以及能否再次妊娠。(5)一對夫婦生有苯丙酮尿癥(PKU)的患兒，他們聽說是遺傳病后，前來咨詢，問題是：a.他們二人及家庭各成員中全無這種病的患者，這怎么能算遺傳病呢?b.是誰的問題?能不能治療?他們再生一個(gè)孩子患PKU的可能性是多大?如何預(yù)防患兒的出生?（6）一對新婚夫婦，由于女方的弟弟患有白化病，害怕今后會生育白化病患兒前來咨詢。（7）有一對外表正常的夫婦，懷孕4胎中，有兩次流產(chǎn)，存活的長女表型正常，但其染色體數(shù)目為45條，存活的男孩是一個(gè)具有46條染色體的先天愚型患者。a.請解釋男孩的發(fā)病原因。b.長女將來會發(fā)病嗎？婚后會生出先天愚型患兒嗎?如果能，是否能防止患兒的出生?（8）一對夫婦婚后，懷孕5次，其中4胎流產(chǎn)，1胎多發(fā)畸形。經(jīng)細(xì)胞遺傳學(xué)檢查丈夫?yàn)榈刮粩y帶者，他們還能否生出正常的孩子?如果能，表型正常的孩子的核型如何?（9）一位青年準(zhǔn)備與他的姑表妹結(jié)婚，他們認(rèn)為在他們的家系中從來沒有過遺傳病的患者，他們結(jié)婚對后代不會有影響。請你從我國人群的遺傳負(fù)荷是每人平均攜帶5個(gè)有害基因的角度說明他倆不宜結(jié)婚的原因。（10）如果苯丙酮尿癥的群體發(fā)病率為0.0001，表兄妹婚后后代患苯丙酮尿癥的概率有多大?是隨機(jī)婚配的多少倍?（11）一位女性表型正常，父母和兩個(gè)哥哥表型也正常，但因她的兩個(gè)舅舅患有假肥大型肌營養(yǎng)不良癥(XR)前來咨詢。a.她是攜帶者的可能性有多大?b.如她與正常男性結(jié)婚，婚后生男孩的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)是多大?生女孩的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)是多大?c.如果她婚后生了一個(gè)患者，如再生育，則生一個(gè)正常孩子的可能性是多少?(12)Huntington舞蹈癥為常染色體顯性遺傳病，25歲以前發(fā)病的占10％，40歲以后發(fā)病的占60％。一位25歲的男性，表型正常，其外祖父患有該病，他的母親現(xiàn)已45歲，表型也正常，請問他是攜帶者的可能性是多少?他將來的子女獲得致病基因的風(fēng)險(xiǎn)是多少?2、教學(xué)目標(biāo)（1）通過對單基因病(或性狀)的系譜分析，了解系譜分析的一般方法。（2）熟悉遺傳病再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)方法（3）掌握遺傳咨詢的一般過程三、考核方式及要求開卷考試、百分制(操作考試70%，平時(shí)考核30%)、及格線60分四、主要儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)材料項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱主要儀器設(shè)備及臺（套）數(shù)實(shí)驗(yàn)材料備注1人體外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備超凈工作臺2臺；CO2溫培養(yǎng)箱1只；離心機(jī)6臺；冰箱1只；水浴箱2只；烤箱1只人體外周血、人外周血培養(yǎng)液、胰蛋白酶、Hanks液、2％碘酒、75％酒精、NaHC03、秋水仙堿、KCl、Na2Hp04KH2P04甲醇、冰醋酸、Giemsa染液、載玻片、酒精燈、無水乙醇、火柴、豎式染色缸5mL吸管、直頭小吸頭、10mL刻度離心管、2mL或5mL一次性注射器、量筒、燒杯、試管架止血帶、棉簽、pH試紙等2人類染色體核型分析光學(xué)顯微鏡(附照相設(shè)備)2套；光學(xué)顯微鏡配油鏡頭50臺人染色體核型自制玻片和照片、生理鹽水、二甲苯、松柏油、記號筆、染色玻璃板吸水紙(濾紙)和擦鏡紙、剪刀、鑷子、核型分析紙、膠水、鉛筆和橡皮等3遺傳咨