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【基本原理】常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗體,依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有:①正向定型:用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定:凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽性,呈散在游離狀態(tài)為陰性。

當(dāng)前1頁,總共30頁。一、血型BloodGroup/type血型:是對(duì)血液分類的方法,血細(xì)胞(紅細(xì)胞)膜上存在的特異抗原性物質(zhì)的類型。當(dāng)前2頁,總共30頁。血型分類的依據(jù)是紅細(xì)胞表面是否存在某些可遺傳的抗原物質(zhì)。紅細(xì)胞凝集Agglutination:血型不相容的血液混合后,其中的紅細(xì)胞聚集成簇并溶血。當(dāng)前3頁,總共30頁。當(dāng)前4頁,總共30頁。造成凝集的機(jī)制是抗原-抗體反應(yīng)紅細(xì)胞表面上含有的特異性糖蛋白抗原物質(zhì)統(tǒng)稱為凝集原Agglutinogen。在血漿中則含有與之相應(yīng)的特異性抗體,稱為凝集素Agglutinin。當(dāng)前5頁,總共30頁。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并為國(guó)際輸血協(xié)會(huì)承認(rèn)的血型系統(tǒng)有30種,包括超過600種抗原,其中大部分都非常罕見,最重要的兩種為“ABO血型系統(tǒng)”和“Rh血型系統(tǒng)”。血型系統(tǒng)對(duì)輸血具有重要意義,以不相容的血型輸血可能導(dǎo)致溶血反應(yīng)的發(fā)生,造成溶血性貧血、腎衰竭、休克以至死亡。當(dāng)前6頁,總共30頁。二、ABO血型系統(tǒng)1901年Landsteiner首先發(fā)現(xiàn)分類依據(jù):血型 凝集原 凝集素A型 A 抗BB型 B 抗AAB型 A+B 無O型 無 抗A+抗B當(dāng)前7頁,總共30頁。當(dāng)前8頁,總共30頁。血型與遺傳當(dāng)前9頁,總共30頁。A、B抗原的前體物質(zhì)是H抗原,受H基因控制,H基因產(chǎn)物為L(zhǎng)-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶-1IA基因產(chǎn)物為N-乙酰-D-半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶,IB基因產(chǎn)物為D-半乳糖轉(zhuǎn)移酶隱性純合體hh個(gè)體,特殊的O型——孟買型。當(dāng)前10頁,總共30頁。前驅(qū)物質(zhì)H抗原A抗原B抗原半乳糖N-乙酰葡萄糖胺半乳糖葡萄糖當(dāng)前11頁,總共30頁。按一般血型遺傳規(guī)律,O型和AB型雙親只能生下A型或B型子女。而在深圳,一對(duì)O型和AB型夫婦生下了罕見的O型和AB型的孩子。當(dāng)前12頁,總共30頁?!酇B♀A×♂A♂AB♀O×♀O♂O♂ABOB(A)當(dāng)前13頁,總共30頁。血型與性格A型人小時(shí)候比較任性,年輕時(shí)性格果斷剛毅,時(shí)時(shí)處處要強(qiáng)。走向社會(huì)后,隨著年齡的增長(zhǎng)和社會(huì)經(jīng)驗(yàn)的積累,他們開始克制自己的情緒,表現(xiàn)出穩(wěn)重謙虛的態(tài)度,容易成為不愿過份表現(xiàn)自己的謹(jǐn)慎派。A型人在老年時(shí),則顯得很固執(zhí)。當(dāng)前14頁,總共30頁。B型人大都有一個(gè)天真浪漫的幼年期,隨著年齡的增長(zhǎng),逐漸分成心直口快和不擅交際應(yīng)酬型兩種傾向。B型人由于性格自幼到老變化不大,相對(duì)來說會(huì)讓人感到他們?cè)交钤侥贻p。當(dāng)前15頁,總共30頁。O型人年少時(shí)比較溫順,但隨著年齡的增長(zhǎng),他們會(huì)積極地呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的自我主張和自我表現(xiàn),甚至成為非常有魄力的人。O型人從小至老的變化是最大的,往往是少年溫順,老來強(qiáng)硬。當(dāng)前16頁,總共30頁。AB型人大多小時(shí)候怕陌生人,很閉塞,但長(zhǎng)大以后善交朋友,交際廣泛。AB型人因過于自信,容易自滿,老年時(shí)給人感覺很傲慢。不過他們兼具A型與B型的特質(zhì),做事有計(jì)劃,但沒有耐性,容易沖動(dòng),直覺敏銳,不喜歡墨守成規(guī),性情多變,有時(shí)表現(xiàn)極端的個(gè)性。善于待人接物,很注意合情合理性,討厭口是心非的人,具有強(qiáng)烈的批評(píng)精神。AB型是不講人情,不談愛情的,男女關(guān)系在AB型看來是件極具單純的事情,不會(huì)像其他血型的人弄得那樣復(fù)雜。性格=遺傳+后天環(huán)境當(dāng)前17頁,總共30頁。血型的成因人類的血型是由飲食和進(jìn)化決定的。O狩獵血型A農(nóng)耕血型B游牧血型AB混合血型當(dāng)前18頁,總共30頁。血型鑒定(正定型法)用已知的IgM類特異抗體(標(biāo)準(zhǔn)血清)與被檢紅細(xì)胞在室溫條件下、鹽水介質(zhì)中反應(yīng),根據(jù)紅細(xì)胞是否出現(xiàn)凝集現(xiàn)象來測(cè)定被檢紅細(xì)胞膜上有無與血型抗體相對(duì)應(yīng)的抗原,從而判斷和鑒定被檢者的血型。當(dāng)前19頁,總共30頁。當(dāng)前20頁,總共30頁。三、Rh血型系統(tǒng)

人類紅細(xì)胞含有一種與恒河猴Rhesusmacacus的紅細(xì)胞相同的凝集原稱為Rh因子含Rh因子(8種,主要是D抗原)──Rh陽性不含Rh因子──Rh陰性當(dāng)前21頁,總共30頁。Rh血型的臨床意義輸血溶血新生兒溶血當(dāng)前22頁,總共30頁。分娩后72h內(nèi)進(jìn)行Rh抗體被動(dòng)免疫胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體即被破壞(不能誘導(dǎo)母親抗Rh免疫反應(yīng))Rh+Rh–初孕健康新生兒

健康新生兒Rh–再孕Rh+新生兒溶血的預(yù)防?當(dāng)前23頁,總共30頁?!酒鞑呐c試劑】載玻片、記號(hào)筆、刺血針、消毒牙簽、酒精棉球、干棉球A型和B型標(biāo)準(zhǔn)血清離心機(jī)、顯微鏡當(dāng)前24頁,總共30頁。【方法與步驟】(1)標(biāo)記玻片:取潔凈的載玻片或白瓷板1塊,用蠟筆畫出小格,標(biāo)明抗A、抗B。(2)加標(biāo)準(zhǔn)抗血清:在玻片已標(biāo)記的區(qū)域內(nèi)分別滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清各l滴。當(dāng)前25頁,總共30頁。(3)加被檢紅細(xì)胞:在滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清的小格中分別加被檢者血液各1滴,不斷輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)玻片或用牙簽使血清與紅細(xì)胞充分混勻,連續(xù)約1~5min,室溫放置15~30min。當(dāng)前26頁,總共30頁。(4)觀察結(jié)果:肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應(yīng),再用低倍鏡觀察,判定陰性、陽性和陽性強(qiáng)度。凝集判斷標(biāo)準(zhǔn):如紅細(xì)胞呈均勻分布,無凝集顆粒,顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在,無凝集靠攏現(xiàn)象為陰性;紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集為陽性。當(dāng)前27頁,總共30頁?!咀⒁馐马?xiàng)】1.所用器材必須干燥清潔、防止溶血;為避免交叉污染,各器皿均一次性使用為佳。2.被檢血液標(biāo)本新鮮,無細(xì)菌污染。。3.玻片等均應(yīng)嚴(yán)格標(biāo)記。4.分型血清質(zhì)量性能合格,從冰箱取出待其平衡至室溫后再用,用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存,減少細(xì)菌污染;一般先加血清,然后再加紅細(xì)胞。當(dāng)前28頁,總共30頁。5.玻片法定型時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)玻片動(dòng)作要輕。注意防止懸液干涸,以免將玻片邊緣干涸引起的紅細(xì)胞凝集誤認(rèn)為抗原抗體反應(yīng)凝集。玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min,否則較弱凝集不能出現(xiàn),造成假陰性。6.理論上IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng),但為了防止冷凝集

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