(4.2)-第七章細菌感染的檢測方法與防治原則

醫(yī)學微生物學（第9版）1.下列關(guān)于細菌內(nèi)毒素的敘述錯誤的是（

）。A.主要由革蘭陰性菌產(chǎn)生B.其化學成分是LPSC.對熱不穩(wěn)定D.不能制成類毒素2.具有黏附作用的細菌結(jié)構(gòu)（）。A.鞭毛B.普通菌毛C.質(zhì)粒D.性菌毛3.內(nèi)毒素不具有的毒性作用是（）。A.食物中毒B.發(fā)熱C.休克D.DIC4.關(guān)于內(nèi)毒素，下述錯誤的是（）。A.來源于革蘭陰性菌B.能用甲醛脫毒制成類毒素

C.其化學成分是脂多糖D.性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱5.關(guān)于外毒素，下述錯誤的是（）。A.多由革蘭陽性菌產(chǎn)生B.化學成分是蛋白質(zhì)

C.耐熱D.經(jīng)甲醛處理可制成類毒素醫(yī)學微生物學（第9版）6.外毒素的特點之一是（）。A.多由革蘭陰性菌產(chǎn)生B.可制備成類毒素

C.多為細菌裂解后釋放D.化學組成是脂多糖7.帶菌者是指（）。A.體內(nèi)帶有正常菌群者B.病原菌潛伏在體內(nèi)，不向體外排菌者

C.體內(nèi)帶有條件致病菌者D.臨床癥狀消失，但不斷向體外排菌者8.構(gòu)成細菌毒力的是（）。A.基本結(jié)構(gòu)B.特殊結(jié)構(gòu)C.侵襲力和毒素D.細菌素9.細菌僅僅是一時性或間斷性侵入血流，但未在血中繁殖稱為（）。A.菌血癥B.毒血癥C.敗血癥D.膿毒血癥10.機體抗感染的第一道防線是（）。A.屏障結(jié)構(gòu)B.巨噬細胞C.體液免疫D.細胞免疫11.抗胞內(nèi)菌感染的主要機制是（）。A.吞噬細胞B.細胞免疫C.體液免疫D.屏障結(jié)構(gòu)第七章

細菌感染的檢測方法與防治原則thedetectionmethodandcontrolprincipleofbacterialinfection第一節(jié)細菌感染的實驗室診斷第二節(jié)細菌感染的特異性防治第三節(jié)細菌感染的抗菌藥物治療原則重點難點熟悉了解掌握1.細菌感染的實驗診斷方法的原理與應用2.疫苗的種類3.細菌感染的特異性預防1.細菌感染的實驗室檢驗流程2.常用疫苗的特點

細菌感染的抗菌藥物治療原則醫(yī)學微生物學（第9版）細菌感染的實驗室診斷l(xiāng)aboratorydiagnosisofbacterialinfection第一節(jié)含菌標本可疑細菌感染血液（雙份）形態(tài)學檢查細菌分離培養(yǎng)與鑒定細菌成分檢測特異性抗體檢測免疫學技術(shù)分子生物學技術(shù)質(zhì)譜分析法生物芯片技術(shù)細菌培養(yǎng)生物化學檢查血清學鑒定藥物敏感試驗動物（毒力）試驗等凝集試驗免疫熒光試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗免疫印跡試驗等核酸雜交聚合酶鏈反應高通量測序技術(shù)等基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）固態(tài)芯片、液態(tài)芯片蛋白質(zhì)芯片、基因芯片等凝集試驗補體結(jié)合試驗中和試驗免疫熒光試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗等細菌感染的實驗室檢測方法醫(yī)學微生物學（第9版）一、臨床標本的采集與運送原則早期采集無菌操作選感染部位最佳時間采集雙份血清標本采集做好標記置于密閉容器內(nèi)盡快送檢標本運送醫(yī)學微生物學（第9版）

二、細菌的形態(tài)學檢查暗視野顯微鏡相差顯微鏡主要用于檢查在生活狀態(tài)下細菌的動力及其運動情況不染色標本

二、細菌的形態(tài)學檢查細菌的染色革蘭染色抗酸染色熒光金胺O染色其他特殊染色醫(yī)學微生物學（第9版）葡萄球菌（革蘭染色陽性）大腸埃希菌（革蘭染色陰性）醫(yī)學微生物學（第9版）革蘭染色結(jié)果細菌檢查的一般程序

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定標本膿/痰/尿等血液/腦脊液涂片、染色、鏡檢分離培養(yǎng)純培養(yǎng)染色鏡檢生化反應血清學鑒定藥敏試驗增菌醫(yī)學微生物學（第9版）1.細菌的分離培養(yǎng)：是微生物學診斷的金標準，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術(shù)（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分（2）酸堿度（pH）（3）培養(yǎng)時間（4）溫度（5）氣體環(huán)境

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定在血平板上的肺炎鏈球菌菌落醫(yī)學微生物學（第9版）血平板上的完全溶血環(huán)

細菌對糖類和蛋白質(zhì)的分解產(chǎn)物不完全一樣，故有關(guān)酶類和代謝產(chǎn)物可作為鑒別細菌的重要依據(jù)之一。2.生化試驗三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定腸道感染細菌在含鐵雙糖培養(yǎng)基上的生化反應醫(yī)學微生物學（第9版）3.血清學鑒定

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定（1）利用已知的特異性抗體檢查未知的純培養(yǎng)細菌（2）對細菌進行種、群、型的鑒定

沙門菌血清學鑒定醫(yī)學微生物學（第9版）4.抗菌藥物敏感試驗（antimicrobialsusceptibilitytest）最低抑菌濃度（minimuminhibitoryconcentration,MIC）能夠完全抑制培養(yǎng)基中細菌生長的最低藥物濃度最低殺菌濃度（minimumbactericidalconcentration,MBC）能夠殺死培養(yǎng)基中細菌的最低藥物濃度方法：紙片擴散法、稀釋法、E-test法……

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定醫(yī)學微生物學（第9版）4.抗菌藥物敏感試驗（1）紙片擴散法在瓊脂平板上接種待檢病原菌。貼含有定量抗生素的紙片后培養(yǎng)。紙片上的抗生素向周圍瓊脂中擴散，形成了逐漸減小的藥物濃度梯度。根據(jù)藥物紙片周圍抑菌環(huán)的有無和大小來判定試驗菌對該抗菌藥物耐藥或敏感。

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定醫(yī)學微生物學（第9版）4.抗菌藥物敏感試驗（2）稀釋法以一定濃度的抗菌藥物與含有待檢細菌的培養(yǎng)基進行一系列不同倍數(shù)稀釋（通常為雙倍稀釋），經(jīng)培養(yǎng)后觀察其最低抑菌濃度。方法瓊脂稀釋法——使用瓊脂培養(yǎng)基肉湯稀釋法——使用肉湯培養(yǎng)基

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定醫(yī)學微生物學（第9版）4.抗菌藥物敏感試驗（3）濃度梯度瓊脂擴散法（E-test法）：簡稱濃度梯度法將稀釋法和擴散法的原理相結(jié)合，使用預先設定的穩(wěn)定且連續(xù)的抗菌藥物濃度梯度，采用瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)以確定不同抗菌藥物對微生物的最低抑菌濃度（MIC）。

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定醫(yī)學微生物學（第9版）E-test試驗結(jié)果5.自動微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng)將培養(yǎng)基上分離的可疑致病菌配制成純菌液，放入自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)中，通過計算機自動掃描、讀數(shù)、分析、最后報告鑒定及藥敏結(jié)果。

三、細菌的分離培養(yǎng)與鑒定自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)醫(yī)學微生物學（第9版）藥敏檢測原理微型化的肉湯稀釋試驗根據(jù)CLSI標準得到相應敏感度：敏感、中度敏感和耐藥微生物數(shù)碼鑒定原理計算并比較數(shù)據(jù)庫內(nèi)每個細菌條目對系統(tǒng)中每個生化反應出現(xiàn)的頻率總和性能特點自動化程度較高、檢測速度快、可鑒定細菌種類及藥敏試驗種類多、數(shù)據(jù)處理軟件功能強大、結(jié)果準確可靠系統(tǒng)組成測試卡（板）、菌液接種器、培養(yǎng)和監(jiān)測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)醫(yī)學微生物學（第9版）四、細菌成分的檢測

1.免疫學檢驗技術(shù)醫(yī)學微生物學（第9版）用已知抗體檢測待檢標本中未知的顆粒性抗原。IgG的Fc段與金葡菌的SPA結(jié)合，F(xiàn)ab段與細菌抗原結(jié)合后，可使金葡菌發(fā)生肉眼可見的凝集現(xiàn)象。用已知的熒光抗體檢測待檢標本中的未知抗原，借助熒光顯微鏡觀察。用酶標抗體檢測特異性可溶性抗原。利用雙向瓊脂擴散與電泳技術(shù)相結(jié)合的方法。由于電泳和電滲作用，抗原向正極移動，抗體向負極移動，在比例合適處形成肉眼可見的沉淀線。凝集試驗協(xié)同凝集試驗免疫熒光試驗酶免疫技術(shù)對流免疫電泳2.分子生物學檢驗技術(shù)四、細菌成分的檢測醫(yī)學微生物學（第9版）聚合酶鏈式反應（PCR）可用于常規(guī)培養(yǎng)困難或耗時太長的病原體以及細菌毒素基因的檢測核酸雜交技術(shù)可從標本中直接檢出病原菌基因，對尚不能或難以分離培養(yǎng)的病原菌尤為適用高通量測序技術(shù)可用于病原菌的分類鑒定、菌群結(jié)構(gòu)和物種多樣性的分析和系統(tǒng)發(fā)育研究，具有檢測未知病原體的應用前景3.質(zhì)譜分析法（massspectrometry）質(zhì)譜法是將有機化合物的分子電離、碎裂，然后按照離子的質(zhì)荷比（m/z）大小把生成的各種離子分離，檢測其強度并排列成譜。根據(jù)細菌的蛋白質(zhì)質(zhì)譜圖，與數(shù)據(jù)庫中的細菌參考譜圖比對，對細菌的屬、種，甚至不同亞種進行鑒定與分類。常用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）。該技術(shù)具有簡便快速、準確度高、重復性好、低成本、自動化和高通量等特點。四、細菌成分的檢測醫(yī)學微生物學（第9版）4.生物芯片技術(shù)（biochiptechnology）將核酸片段、蛋白質(zhì)或酶、抗原或抗體、細胞及組織等生物樣品有序地固定于硅片、尼龍膜等固相支持物上，在一定的條件下進行生化反應。用化學熒光法、酶標法或同位素法顯示反應結(jié)果，通過特定的儀器讀取與收集數(shù)據(jù)，并用軟件進行數(shù)據(jù)分析，從而判斷樣品中靶分子的種類和數(shù)量。分類：液態(tài)芯片/固態(tài)芯片、蛋白芯片/基因芯片/糖芯片/細胞芯片等

四、細菌成分的檢測醫(yī)學微生物學（第9版）4.生物芯片技術(shù)用途微生物感染的快速診斷：對某些病原體多重快速檢查與鑒別微生物變異機制和耐藥機制的研究微生物基因分型及分子流行病學的調(diào)查微生物基因組及后基因組的研究：可研究病原體基因的序列、轉(zhuǎn)錄表達及抗原的表達抗微生物感染藥物的研制等

四、細菌成分的檢測醫(yī)學微生物學（第9版）用已知的細菌或其特異性抗原檢測病人血清或其他體液中的抗體及其效價的變化，可以作為感染性疾病的輔助診斷。由于本實驗多采取病人血清檢測抗體，故常稱為血清學診斷（serologicaldiagnosis）。一般適用于抗原性較強的細菌，以及病程較長的感染性疾病。也可用于調(diào)查人群對某病原菌的免疫應答水平以及檢測疫苗接種后的預防效果。

五、細菌感染的血清學診斷醫(yī)學微生物學（第9版）血清學試驗應用舉例直接凝集試驗腸熱癥（肥達試驗）間接凝集試驗鉤體病、梅毒免疫熒光技術(shù)炭疽、立克次體病、恙蟲病等多種細菌感染性疾病補體結(jié)合試驗慢性布魯氏菌病中和試驗風濕熱（抗O試驗）酶聯(lián)免疫吸附試驗鼠疫、梅毒、Q熱等多種細菌感染性疾病細菌性感染的血清學診斷醫(yī)學微生物學（第9版）細菌感染的特異性防治specificpreventionandtreatmentofbacterialinfection第二節(jié)機體獲得特異性免疫力的方式醫(yī)學微生物學（第9版）自然免疫主動免疫：隱性或顯性感染被動免疫：獲得母體的Ab(胎盤/初乳)人工免疫析主動免疫：疫苗被動免疫：抗毒素或丙種球蛋白等人工主動免疫（artificialactiveimmunization）是將疫苗接種于人體，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫應答，機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施，主要用于特異性預防。采用人工主動免疫方法通常稱為預防接種（prophylacticinoculation）或疫苗接種（vaccination）

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）疫苗的種類死疫苗（killedvaccine）：亦稱滅活疫苗（inactivatedvaccine）用物理、化學方法殺死病原微生物，但仍保持其免疫原性的生物制劑；常用的有：傷寒、霍亂、流行性腦膜炎、鉤端螺旋體病等?；钜呙纾╨ivingvaccine）：亦稱減毒活疫苗（attenuatedvaccine）是通過毒力變異或人工選擇法（如溫度敏感株）而獲得的減毒或無毒株，或從自然界直接選擇出來的弱毒或無毒株經(jīng)培養(yǎng)后制成的疫苗。常用的有：卡介苗、鼠疫、炭疽等細菌性減毒活疫苗。

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）區(qū)別點活疫苗死疫苗制品特點減毒或無毒的細菌，可在體內(nèi)增殖死菌，在體內(nèi)不增殖，但仍保持免疫原性制備方法通過自然篩選/非正常培養(yǎng)得到減毒株通過物理和/或化學方法使病原體失活接種次數(shù)和接種量1次，量小2～3次，量大接種反應類似輕型感染或隱性感染可出現(xiàn)發(fā)熱、全身或局部腫痛等反應免疫應答的類型體液免疫和細胞免疫體液免疫免疫維持時間1～5年或更長0.5～1年毒力回升與安全性有可能，對免疫缺陷者有風險不可能，安全性好疫苗的穩(wěn)定性相對不穩(wěn)定相對穩(wěn)定保存不易保存，存活2周，真空凍干可長期保存易保存，可保存1年以上活疫苗與死疫苗的比較疫苗的種類類毒素（toxoid）外毒素經(jīng)0.3%～0.4%甲醛處理后，失去了毒性但仍保持免疫原性的生物制品。加入吸附劑（佐劑）氫氧化鋁后便制成精制類毒素。吸附劑可延緩類毒素在體內(nèi)的吸收時間，刺激機體產(chǎn)生足量的抗毒素。舉例：白喉類毒素、破傷風類毒素

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）疫苗的種類多糖疫苗（carbohydratevaccine）提取純化細菌中能引起特異性保護作用的多糖成份制備而成。成分單一，不存在易引起免疫副反應的物質(zhì)，更為安全有效，已成為應用最多的疫苗之一。在臨床上被廣泛使用的莢膜多糖疫苗包括：肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌莢膜多糖疫苗等。

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）疫苗的種類多糖結(jié)合疫苗將細菌的聚糖共價連接到適當?shù)牡鞍纵d體上而制備形成。TI-Ag轉(zhuǎn)變TD-Ag，抗體IgM為主向IgG為主轉(zhuǎn)變，抗體親和力更強，效價更高，持續(xù)時間也更長。目前上市的細菌多糖蛋白結(jié)合疫苗有：b型流感嗜血桿菌、腦膜炎球菌和肺炎球菌等多糖結(jié)合疫苗。

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）疫苗的種類聯(lián)合疫苗（combinedvaccines）：由不同抗原組分混合制成的疫苗，包括多聯(lián)疫苗與多價疫苗。多聯(lián)疫苗：由兩種或兩種以上疫苗原液按特定比例配合制成的具有多種免疫原性的疫苗，可同時預防多種疾病。如：百白破疫苗（DTP）。多價疫苗：由同一種細菌的不同亞型或不同血清型抗原合并組成的含多價抗原成分的一種疫苗，典型的如23價肺炎球菌多糖疫苗。

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）疫苗的種類基因工程疫苗（geneengineeredvaccine）是利用基因工程技術(shù)將編碼病原體保護性抗原表位的目的基因?qū)朐嘶蛘婧吮磉_系統(tǒng)中，利用表達的抗原產(chǎn)物或重組體本身制成的疫苗?；蚬こ虂唵挝灰呙?、基因工程載體疫苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗等。

一、人工主動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）抗毒素（antitoxin）將類毒素或外毒素給馬免疫制成用途：外毒素所致疾病的治療和緊急預防精制破傷風、白喉和肉毒抗毒素以及多價精制氣性壞疽抗毒素等使用這些異種抗毒素時應注意避免Ⅰ型超敏反應的發(fā)生

二、人工被動免疫醫(yī)學微生物學（第9版）丙種球蛋白（gammaglobulin）血清丙種球蛋白、胎盤丙種球蛋白用途：某些感染性疾病的緊急預防、燒傷患者預防感染、丙種球蛋白缺乏癥患者、經(jīng)長期化療或放療的腫瘤患者等?？咕澹╝ntisera）已基本被淘汰對于由銅綠假單胞菌多重耐藥菌株所引起的嚴重燒傷疾病感染的治療，尚可以考慮試用。

二、人工被動免疫醫(yī)學微生物學