生藥學(xué)課件 4-生藥的鑒定

第三章生藥的鑒定第一篇總論

第一節(jié)生藥鑒定的意義

定義：生藥鑒定（identificationofcrudedrug）就是依據(jù)國家藥典、有關(guān)資料規(guī)定或有關(guān)專著對生藥作真實性、純度及品質(zhì)優(yōu)良度的檢定。

目的：保證生藥品種的真實性、用藥的安全有效及發(fā)掘利用新藥源。人工牛黃是以牛膽汁酸、膽紅素、膽固醇與無機鹽（硫酸鎂、硫酸亞鐵和磷酸三鈣）為原料，與淀粉混合而成；培植牛黃是利用活牛體，以外科手術(shù)的方法在牛的膽囊內(nèi)插入致黃因子，使之生成牛黃；而體外培育牛黃則是以牛的新鮮膽汁作母液，加入去氧膽酸、膽酸、復(fù)合膽紅素鈣等制成。謝宗萬教授《中藥材品種論述》《中藥材品種本草考證的思路與方法》《本草綱目藥物彩色圖鑒》各省(市、自治區(qū))衛(wèi)生廳批準(zhǔn)執(zhí)行的藥品標(biāo)準(zhǔn)。第二節(jié)鑒定依據(jù)鑒定依據(jù)國家頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn)各省(市、自治區(qū))制訂的藥品標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》《進出口藥品質(zhì)量暫行標(biāo)準(zhǔn)》國家標(biāo)準(zhǔn)部頒標(biāo)準(zhǔn)國家標(biāo)準(zhǔn)一級二級一、《中國藥典》的版本及基本內(nèi)容1953年版：收載藥品531種，多數(shù)為原料藥。1963年版：分為2部。常用生藥643種(藥材446種)。1977年版：內(nèi)容較大變動，生藥1152種，藥材882。

1985年版：生藥713種（藥材506種）。1990年版：生藥784種（藥材509種）。

1995年版：生藥920種（藥材522種）。

2000年版：生藥992種（藥材534種）。2005年版：分三部：生藥（1146）、西藥、生物制品。2010年版：分三部：生藥（2165），其中新增1019種（包括439個飲片標(biāo)準(zhǔn)）、修訂634種，西藥、生物制品。共九版二、地方藥品標(biāo)準(zhǔn)地方標(biāo)準(zhǔn)收載國家標(biāo)準(zhǔn)中尚未收載的藥品，或雖有收載但規(guī)格有所不同的本?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）生產(chǎn)的藥品，它具有地區(qū)性的約束力。第三節(jié)鑒定的一般程序送檢單位送檢日期鑒定目的樣品數(shù)量樣品包裝一般狀態(tài)一樣品登記二、取樣

估計取樣——就是將整批的生藥抽出一部分有代表性的供試品進行分析、觀察，從而得出規(guī)律性的一種方法。

一般性檢查感觀比較常出現(xiàn)的問題

1取樣前的準(zhǔn)備工作2抽取樣品的原則中藥材破碎的、粉末狀的或大小在1cm以下的藥材，每一包件至少在不同部位抽取2～3份樣品，包件少的抽樣總量應(yīng)不少于實驗用量的3倍。

包件多的，取樣量一般按下列規(guī)定：

一般藥材500～1000g；粉末狀藥材25g；貴重藥材5～10g。總包件在100件以下：取樣5件100～1000件：按5%取樣超過1000件：超過的按1%取樣貴重藥材及不足5件：一般藥材，逐件取樣。用取樣器(如探針)或手從包件的四角及中間或頂部、中部和底部分別取樣。某些固體藥材，可將其倒出，攤成正方形，依對角線劃“×”字形，分成四等份，取對角2份，再如上操作，即連續(xù)四等分法取樣。亦可采用連續(xù)二分法取樣。液體藥材混合均勻后取樣，不易混勻者按不同部位取樣。3取樣的方法（1）方法：保證樣品具有足夠的代表性。由每一包件中取得混合樣品稱為“袋樣”。大批藥材全部袋樣混合均勻所取得的樣品，即為“混合袋樣”，也叫“初樣”。將初樣根據(jù)不同種類按上述方法反復(fù)數(shù)次取樣，直至最后剩余的藥材量足夠完成必要的試驗以及留樣數(shù)為止，此為平均樣品。貴重藥不取平均樣品，逐件取樣。取得的平均樣品量一般不得少于檢驗所需的3倍數(shù)，即1/3供檢驗用，另1/3供復(fù)核用，其余的1/3留樣保存。（2）樣品的處理個體重量較大的藥材，其取樣量應(yīng)比個體較小的為多，因為個體樣品的代表性主要取決于取樣的個數(shù)。對各類一般藥材的平均樣品量可按《中國藥典》的規(guī)定執(zhí)行。（3）樣品的代表性和取樣數(shù)量之間的關(guān)系鑒定目的主要可分為3個方面：真?zhèn)舞b別，純度檢查(檢查雜質(zhì)有機物和一般雜質(zhì))，品質(zhì)鑒定。鑒定程序通常按上述排列依次進行。藥典規(guī)定，生藥材主要有下列內(nèi)容：來源→性狀→鑒別→檢查→含量測定。三、鑒定的項目及程序1一般程序及主要項目首先要觀察樣品的類別、藥用部分是否與送檢時提供的情況相符。其是屬植物藥、動物藥、礦物藥，還是加工品。其藥用部位是否相符，有無非藥用部位，是否符合產(chǎn)地加工的要求等。（1）來源主要是與生藥標(biāo)準(zhǔn)中描述的特征相對照，看其有無差異。必要時與標(biāo)準(zhǔn)藥材相比較。（2）性狀包括經(jīng)驗鑒別、顯微鑒別和理化鑒別。一般鑒別試驗只能體現(xiàn)某一藥材的某一特性，而不能將某一個鑒別試驗作為鑒定的惟一依據(jù)，應(yīng)結(jié)合其他項目全面考察。例如化學(xué)鑒別試驗，只能反映某類或某種成分的存在。（3）鑒別主要是對藥材的純凈與否的限度檢查，以控制其質(zhì)量。檢查內(nèi)容是指藥材在加工、生產(chǎn)和貯藏過程中可能含有并需要控制的物質(zhì)。其中有有害物質(zhì)、水分、灰分或浸出物等需測定的項目。（4）檢查含量測定是控制生藥質(zhì)量的主要方法之一。主要用于有效成分已經(jīng)明確藥材的品質(zhì)鑒定。（5）含量測定鑒定目的鑒定項目觀察現(xiàn)象實驗數(shù)據(jù)鑒定方法實驗結(jié)果2鑒定記錄及結(jié)果判斷生藥的雜質(zhì)檢查就是鑒定生藥中可能混入的各類雜質(zhì)以及雜質(zhì)的數(shù)量是否超過規(guī)定的限度，也稱為“純度鑒定”。第四節(jié)生藥的雜質(zhì)檢查一、定義對于保證臨床用藥的安全與有效具有十分重要的意義。二、意義三、來源來源性雜質(zhì)摻入性雜質(zhì)指來源與規(guī)定相同，但其性狀或藥用部位與規(guī)定不符。指來源與規(guī)定不同的物質(zhì)。如在采收、加工和貯藏等過程中混入的無機物或人為摻入的非藥用物質(zhì)。人為摻入的雜質(zhì)多見于貴重生藥。由于貯藏不當(dāng)，導(dǎo)致生藥被蟲蛀和霉變等變質(zhì)的部分亦作為雜質(zhì)處理。較小可篩分的雜質(zhì)，可用適當(dāng)?shù)暮Y子將雜質(zhì)篩出；個別肉眼難以識別的雜質(zhì)，可采用顯微或化學(xué)分析的方法進行檢查；各類雜質(zhì)確定后，應(yīng)分別稱重，計算出被檢生藥中雜質(zhì)的含量。四、檢查方法通常用肉眼或放大鏡進行觀察，較大的雜質(zhì)可以直接檢出。第五節(jié)生藥鑒定的方法基源鑒定法性狀鑒定法理化鑒定法生物鑒定法顯微鑒定法生藥鑒定的方法五大鑒定法第四節(jié)

基源鑒定法（又稱“來源鑒定法”），就是應(yīng)用植物、動物或礦物形態(tài)和分類學(xué)等方面的知識，對生藥的來源或原料藥進行鑒定，確定其正確的學(xué)名（或礦物的名稱）或中成藥的原料組成，以保證在應(yīng)用中品種準(zhǔn)確的一種方法。一、基源鑒定法第四節(jié)采用先觀察整體、后觀察局部形態(tài)的原則，掌握形態(tài)上的共性和特性。描述時要準(zhǔn)確使用植物形態(tài)學(xué)知識及專業(yè)術(shù)語，認(rèn)真的觀察、解剖和描述之后，方可進行下一步工作，以達(dá)到確定品種的目的。檢品不齊全的，須深入產(chǎn)地調(diào)查和采集實物，了解其相關(guān)信息，否則就無法著手鑒定。1鑒定步驟及方法（1）觀察及描述第四節(jié)通過查閱有關(guān)植物資料或植物分科、分屬的檢索表，確定其科屬。對于某些未知品種鑒定特征不全或缺少有關(guān)資料者，直接查閱與中藥鑒定、藥用植物等相關(guān)的綜合性書籍或圖鑒。即與收藏的已經(jīng)確定學(xué)名的標(biāo)本核對。在有條件的情況下，若能與模式標(biāo)本(發(fā)表新種時所被描述的植物標(biāo)本)核對，對正確的鑒定更為有利。

（2）查閱文獻(xiàn)資料（3）標(biāo)本核對鑒定第四節(jié)通常用于原植物鑒定的標(biāo)本類型有：蠟葉標(biāo)本、液浸標(biāo)本和干燥標(biāo)本。（4）標(biāo)本的采集與制備自學(xué)2學(xué)名的鑒定第四節(jié)性狀鑒定法也叫“直觀鑒定法”，是用感觀來鑒定中藥性狀是否與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ掌废喾系囊环N方法。它是由傳統(tǒng)鑒別方法與現(xiàn)代生物和礦物形態(tài)學(xué)相結(jié)合而形成的。具體地說，就是用眼看、手摸、鼻嗅、口嘗、感試等十分簡便的方法來鑒別中藥的真?zhèn)?、純度或粗略估計品質(zhì)的優(yōu)劣。二、性狀鑒定法第四節(jié)1性狀特征描述方法藥材形狀藥材大小藥材顏色表面特征藥材質(zhì)地斷面特征藥材之氣藥材之味藥材性狀包括通常采用兩種方法描述第四節(jié)一是使用生物學(xué)或礦物學(xué)的形態(tài)、組織學(xué)等名詞，便于掌握藥材鑒定的規(guī)律性，便于分類和推廣。二是采用廣大醫(yī)藥工作者在長期實踐中積累起來的生動、形象的經(jīng)驗鑒別術(shù)語，語言簡單，好記易懂，針對性強，但不易掌握其規(guī)律性。第四節(jié)

觀察形狀時，亦可用下列術(shù)語描述，如：

頭（指根及根莖的上部）。

蘆（指根頂端短縮的根莖）。

身（指根的主根）。

梢（指根的下部或支根）。

須（指小根或須根）。

連珠（指根及根莖膨大部分呈連珠狀）。

疙瘩（指突起不規(guī)則）等。2性狀鑒定的內(nèi)容（1）形狀：指藥材的形狀，一般較為固定，其與藥用部位密切相關(guān)。第四節(jié)常用術(shù)語野山參“蘆長碗密棗核丁，緊皮細(xì)紋珍珠須”黨參“獅子盤頭”防己“彎曲有橫溝，形似豬大腸”黃連“雞爪連”、“過橋桿”三七“銅皮、鐵骨、獅子頭”防風(fēng)“蚯蚓頭”辛夷“毛筆頭”海馬“馬頭、蛇尾、瓦楞身”松貝“懷中抱月”青貝“觀音合掌”黃芪

黃芩三棱(圓柱形)(圓錐形)

(扁卵狀圓錐形)半夏類球形麥冬紡錘形桃仁扁長卵形不規(guī)則塊狀熟地厚樸卷筒狀黃柏板片狀野山參

“蘆長碗密棗核丁、緊皮細(xì)紋、珍珠須”防風(fēng)蚯蚓頭海馬石決明夏枯草單位多用“cm”

。對鑒定部分藥材具有重要意義。（2）大?。合抵杆幉牡拇笮　⒋旨?xì)、厚薄等。牛膝川牛膝第四節(jié)有些藥材以顏色命名如黃芩、紫草等。藥材的色澤可作為其質(zhì)量的標(biāo)志，如玄參要黑、茜草要紅、黃連要黃。（3）顏色：常指商品藥材的色澤，一般較為固定。紫草第四節(jié)色澤的變化與藥材的質(zhì)量有關(guān)，如綿馬貫眾久貯，根莖和葉柄基部斷面變?yōu)樽睾谏荒芩幱?；枸杞子和牛膝變黑后，就說明其已變質(zhì)。第四節(jié)藥材的顏色，一般均為復(fù)合色調(diào)，描述的顏色應(yīng)以后一種色調(diào)為主，前一種為附助色調(diào)。如小茴香呈黃綠色，即以綠色為主，黃色為附。另有用“或”和“至”連接，如王不留行呈黑色或棕紅色(未成熟)、天冬的表面呈黃白色至黃棕色。第四節(jié)藍(lán)（膽礬）黃（蒲黃）紅（西紅花）白（僵蠶）黑（熟地）在描述復(fù)合色的藥材時，應(yīng)以后一種為主黃綠色（荊芥穗）紅棕色（何首烏）黃白色（川貝母）朱砂丹參紫色：紫草、紫蘇葉、紫石英；黑色：黑胡椒、黑芝麻、墨旱蓮、烏梅；黃色：黃連、姜黃；白色：白芷、白蘚皮、白芨、山藥；褐色：赭石；藍(lán)色：青黛；雜色：五花龍骨。（4）表面特征：指藥材的表面（包括外表面和內(nèi)表面、上表面和下表面）所能看到的特征。是否光滑是否粗糙有無皮孔有無毛茸有無鱗葉其它附屬物有無紋理有無褶皺有無槽溝有無節(jié)等第四節(jié)毛茸（辛夷）鉤刺（蒼耳子）縱皺紋（桔梗）環(huán)紋（防風(fēng)）光滑（相思子）防風(fēng)蚯蚓頭皮孔地衣斑塊釘狀物（皮刺）石菖蒲（毛鱗狀葉基）貫眾（葉柄殘基）白花前胡根頭部有葉鞘殘存的纖維毛狀物黃柏的栓皮烏梅的皺紋紋理王不留行的雕紋大黃的錦紋“松泡”表示質(zhì)輕而松，斷面多裂隙，如南沙參?！胺坌浴北硎竞幸欢康牡矸?，折斷時常有粉塵散落，如山藥。5

質(zhì)地：是指用于折試藥材所感知到的特征。描述質(zhì)地的各種術(shù)語，均有一定含義。南沙參山藥第四節(jié)“黏性”表示具黏液質(zhì)，如石斛嚼之則顯黏性?！坝蜐櫋北硎酒滟|(zhì)地柔軟，含油而有潤澤，如熟地黃“糟”表示枯朽，呈朽木狀，如川木香。熟地黃石斛川木香第四節(jié)“角質(zhì)”表示質(zhì)地堅實，斷面且呈半透明狀或有光澤（常因含多量淀粉，蒸煮時致使糊化而成），如法半夏。“柴性”表示纖維性強，木質(zhì)成分較多，折之如柴，敲之作響，如桑白皮。法半夏桑白皮第四節(jié)南沙參（松泡）防風(fēng)（松泡）當(dāng)歸（油潤）郁金（角質(zhì)）杜仲（膠絲）黃柏（纖維性）雞血藤（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切(或削)的平面。

是否易折斷，有無粉塵及斷面特征1．自然折斷面（1）平坦：主要由薄壁細(xì)胞組成（牡丹皮）（2）顆粒狀：富含石細(xì)胞（肉桂）（3）纖維狀：纖維束（桑白皮、合歡皮）（4）裂片狀：纖維束+薄壁細(xì)胞（苦楝皮、黃柏）2．橫切面：（1）與形狀相關(guān)的術(shù)語川芎切片“蝴蝶片”；枳殼“翻口似盆狀”（2）與組織構(gòu)造相關(guān)的術(shù)語粉防己“車輪紋”；黃芪“菊花心”－正常維管組織何首烏“云錦紋”；大黃“星點”；商陸“羅盤紋”；川牛膝“筋脈點”－異常維管組織；蒼術(shù)“朱砂點”-油室；檳榔“檳榔紋”（大理石狀花紋）-錯入組織（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切(或削)的平面?？嚅ぃǘ鄬颖∑┠档てぃㄆ教梗┐簏S（星點）何首烏（云錦花紋）菊花心車輪紋朱砂點川芎（蝴蝶片）枳殼（翻扣似盆狀）商陸（羅盤紋）（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切(或削)的平面?！熬栈ㄐ摹保褐父蚋o的橫切面的中心部位具有類似菊花瓣狀的放射狀紋理，如黃芪?！败囕喖y”：指藥材的斷面紋理呈車輻狀，如防已。

第四節(jié)（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切(或削)的平面?！坝忘c”：指具有紅色或紅棕色油室或油細(xì)胞，如當(dāng)歸.“星點”：指大黃髓部的異型復(fù)合維管束，如大黃。

第四節(jié)（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切（或削）的平面?！八被颉懊保褐杆幉奈龀龅慕Y(jié)晶，如茅蒼術(shù)。“云錦花紋”：指何首烏的花朵狀紋理(異型復(fù)合維管束，存在于皮層)，如何首烏?！敖鹁駲凇保褐改承└愃幉臄嗝鏈\棕黃色的形成層環(huán)與類白色的皮部，如桔梗。第四節(jié)羌活白芷防己莪術(shù)大血藤檳榔雞血藤何首烏大黃（7）氣：藥材的氣是由于含有揮發(fā)性物質(zhì)的緣故，有些藥材的氣十分特殊，可作為鑒別的主要依據(jù)。如阿魏具強烈的蒜樣臭氣；白蘚皮有似羊膻氣；

白蘚皮第四節(jié)氣味：無：石膏、珍珠微：山藥清香：大黃、牛黃、熊膽、冰片芳香：八角茴香、蜂蜜香烈：肉桂、砂仁、麝香臭：九香蟲、紫草、蕪荑、蜘蛛香特殊氣味羊膻味：白蘚皮、羊紅檀焦糖氣：黃精腥味：紫河車蒜臭：薤白、雄黃、阿魏苯甲醛臭：丹皮硫臭氣：硫磺黨參臭：桔?？扑幉碾u屎臭：雞屎藤樟腦臭：大關(guān)木通（粗皮摩擦）打嚏：蟾酥、豬牙皂（8）味：是用味覺來識別藥材，又稱嘗法。如五味子，甘草。藥材的味也是評價質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)之一。黃連、黃柏以味越苦越好；烏梅以酸質(zhì)量為佳。第四節(jié)味道：淡：石膏酸：烏梅、山楂、木瓜甘：龍眼肉、黨參、桂圓肉麻：細(xì)辛辛、辣：干姜刺喉：半夏、南星咸：大青鹽苦：龍膽、鴉膽子、黃連、穿心蓮五味：五味子澀：五倍子苦澀：大黃苦而回甜：牛黃、熊膽吸舌：龍骨、竹黃粘性：黃精、玉竹、茯苓涼：薄荷、冰片砂礫感：大黃、地楓（9）水試：利用某些藥材在水中產(chǎn)生各種特殊的變化來鑒別藥材。第四節(jié)如紅花水浸泡后，水液變成金黃色，其花色不褪。如蘇木投入熱水中，呈鮮艷的桃紅色透明溶液。番紅花：水浸泡后，水液染成金黃色；沉香：進口沉香放入水中下沉，浮在水面的一般為國產(chǎn)沉香葶藶子、車前子：加水浸泡，種子變粘滑，且體積膨脹；胖大海：加水浸泡膨大成海綿狀，可達(dá)原體積的6～8倍；蘇木：投熱水中，水顯鮮艷的桃紅色；血竭：浮于水面，加熱軟化但不溶解，水不染色；菟絲子：加熱至種皮破裂，露出白色卷旋狀的胚，形如吐絲；牛黃：掛甲。秦皮：水浸出液在日光下可見藍(lán)色熒光。（10）火試：是指用火燒、煅藥材，觀察所產(chǎn)生的現(xiàn)象，以鑒別藥材。血竭粉置白紙上，火烤即熔化，色澤鮮紅如血，透明無殘渣。海金沙點燃發(fā)出爆鳴聲及閃光，可區(qū)別相似品松花粉及蒲黃。第四節(jié)麝香：火燒有輕微爆鳴聲，起油點如珠，似燒毛發(fā)但無臭氣，灰為白色；海金沙：點燃產(chǎn)生爆鳴聲及閃光；血竭：于錫紙上加熱，融化后色鮮紅如血而透明，且無殘渣；珍珠：火燒有爆裂聲，呈層狀破碎，內(nèi)外色澤一致，無氣味；朱砂：用1根火柴挑朱砂粉末少許，用另1根火柴點燃有藥末的火柴，可見到焦火柴桿上細(xì)小的水銀球；青黛：燃燒時產(chǎn)生紫紅色煙霧，并產(chǎn)生草腥氣。

顯微鑒定法就是利用顯微鏡、顯微技術(shù)及顯微化學(xué)方法等對中藥進行分析鑒定，以確定其真?zhèn)?、純度、品質(zhì)以及鑒別依據(jù)。三、顯微鑒定法第四節(jié)顯微鑒定的內(nèi)容分類：1.組織鑒定：

（1）完整藥材的鑒別（性狀特征不明顯)；

（2）外形相似而組織構(gòu)造不同的類似品、混淆品、代用品、偽品）；（3）多來源藥材的對比鑒別；（4）確定某種化學(xué)成分的存在部位。2.粉末鑒定：

（1）粉末藥材；（2）外形較大，難以制作組織切片，或組織構(gòu)造無鑒別意義，而粉末具有顯著的特征的藥材；

（3）已經(jīng)破碎，性狀鑒定難以區(qū)分的藥材；

（4）中成藥，如丸、散、片、膠囊等粉末制劑。橫切片：觀察組織的排列特征。

縱切片：觀察莖木類中藥的某些細(xì)胞組織。

磨片：堅硬藥材如骨、貝殼類。1顯微標(biāo)本片的制備永久制片半永久片臨時制片分類粉末片：多用于觀察組織碎片、細(xì)胞及后含物等。解離組織片：觀察某些細(xì)胞的形狀，如纖維等。表面片：觀察葉、花、全草、果實和種子表面特征。第四節(jié)（一）粉末制片法

1．粉末的制備選取有代表性的樣品適量，剪成約0.1cm的小段置50-60℃的烘箱中干燥(含揮發(fā)油的藥材溫度應(yīng)更低，控制在30-40℃)，然后用粉碎器粉碎，粉末過40—80目篩，中成藥則應(yīng)過100目篩，置干凈瓶中備用。制備粉末時應(yīng)注意不得有其他雜物混入，樣品應(yīng)全部過篩，不得留有殘渣，過篩后的粉末需充分混勻方可裝片。常用顯微制片方法（一）粉末制片法

2．制片方法根據(jù)需要不同，可作成臨時或永久制片。

(1)臨時制片作臨時觀察用，隨用隨制，通常僅能保存1-2天。不經(jīng)任何處理。直接用封藏液裝片后即可觀察，常用的封藏刑有以下幾種：①水常用蒸餾水。用于觀察淀粉粒等多糖類物質(zhì)，但易引起淀粉粒膨脹變形，欲測淀粉粒大小時則不宜用水作封藏劑。②稀甘油用于觀察糊粉粒、淀粉粒及其他多糖類物質(zhì)，為顯微制片中最常用封藏劑。常用顯微制片方法（一）粉末制片法③50％甘油酒精適用范圍同前，透明度較前者強；斯氏液(甘油醋酸液)專用于觀察淀粉粒的形態(tài)，是目前觀察淀粉粒最理想的封藏劑?？墒沟矸哿１３衷瓉淼臓顟B(tài)而不膨脹變形，便于測定其大小。

④乙醇主要用于觀察菊糖及橙皮苷結(jié)晶。因乙醇極易揮發(fā)，故裝片后應(yīng)立即觀察、放置稍久則乙醇揮發(fā)，產(chǎn)生大量氣泡。

⑤水合氯醛一般作為透明劑，在觀察菊糖時，用其作為封藏液，不加熱，裝片后立即觀察，往往能得到比乙醇裝片更為理想的效果。常用顯微制片方法（一）粉末制片法在此特別值得一提的是水合氯醛透化片。用水合氯醛加熱處理可除去粉末中所含的淀粉粒、葉綠素、樹脂、蛋白質(zhì)、油脂、色素、揮發(fā)油等物質(zhì)，并使細(xì)胞膨脹、透明，以利于細(xì)胞及組織的觀察。這種方法用途廣、效果好、操作簡便。具體方法為：取水合氯醛溶液1-2滴于載玻片上，挑取粉末少許，混勻，于酒精燈上微熱透化，并以解剖針攪拌，補充2-3次水合氯醛溶液(勿使溶液蒸干)，透化好后加稀甘油1-2滴混合，蓋片，清除蓋玻片周圍多余的藥液即可。常用顯微制片方法（一）粉末制片法（2）特殊處理制片①漂白若粉末中色素太多，色澤太暗，不便觀察時，可預(yù)先用漂白劑浸漬處理，再以沸水及冷水洗滌，離心分離，然后挑取粉末適量，按前述方法制片。常用的漂白劑有過氧化氫、氯化堿液(由碳酸鈉與漂白粉混合而成)等。常用顯微制片方法（一）粉末制片法（2）特殊處理制片②脫脂一些含脂肪較多的中藥(如種子類中藥)，即使用水合氯醛透化也不便觀察，可預(yù)先進行脫脂，然后再按一般方法制片觀察。脫脂的方法有兩種，一種是將粉末放于兩層濾紙間擠壓以除去油脂；另一種是將粉末用某些溶媒如氯仿、乙醇和乙醚的混合液等浸漬處理。常用顯微制片方法（一）粉末制片法（2）特殊處理制片③解離若粉末中木化組織較多，細(xì)胞彼此不易分離時，可用5％氫氧化鉀浸泡幾小時或在水浴中加熱浸漬，使組織崩解后再制片觀察。常用顯微制片方法（一）粉末制片法(3)永久制片粉末永久制片方法較多，這里僅簡單介紹離心管操作法制片。①脫水取粉末0.3-0.5置離心管中，分步加入各級濃度的酒精進行脫水，每步3分鐘，用細(xì)玻棒攪拌，每次均用離心機沉淀，傾去酒精液。各級酒精濃度依次是30％、50％、70％。常用顯微制片方法（一）粉末制片法（2）特殊處理制片

②染色于70％酒精脫水后的粉末中加入番紅染色劑，攪勻，染30min。若為單子葉植物藥材或葉類、花類藥材，因其機械組織及輸導(dǎo)組織不發(fā)達(dá)，可將染色時間縮短為10-15min。離心分離，去上層染液，沉淀用70％酒精洗滌。染好色的粉末逐步用80％、95％、100％的酒精脫水，每步5min。常用顯微制片方法（一）粉末制片法（2）特殊處理制片

③透明與封片粉末逐步用25％、50％、75％、100％的二甲苯透明，每步3min，攪拌、離心分離。去上層二甲苯液，迅速加入加拿大樹膠(預(yù)先用二乙苯溶化好)約0.5-1ml，用玻棒攪拌均勻。用吸管吸取一滴于裁玻片上，加蓋玻片封藏，并貼上標(biāo)簽，低溫防塵干燥即可。常用顯微制片方法（二）徒手切片法

徒手切片法主要用于臨時制片。因切片過程中沒有經(jīng)過復(fù)雜的化學(xué)處理，可以真實地反映植物細(xì)胞、組織的本來面目，在顯微化學(xué)及一般的結(jié)構(gòu)觀察中極為有用。

1切片用具主要有切片

(一般使用普通的剃刀)、培養(yǎng)皿(用于盛片)、毛筆(用于取片)、切片板(木板或玻璃板)、夾持物(夾持物應(yīng)是堅固而易切的材料，常用的有萵筍、蘿卜、土豆等)等。常用顯微制片方法（二）徒手切片法

2.材料的軟化

對于新鮮的材料，多數(shù)無需軟化即能進行切片，但中藥大都為干材料，切片前必須經(jīng)過軟化處理。軟化的方法較多，使用時應(yīng)根據(jù)材料的性質(zhì)加以選擇。主要有熱水浸泡法(適用于纖細(xì)的根莖及根、全草、葉、花等質(zhì)軟而細(xì)薄的材料)、水煮法(適用于較硬的根、根莖、莖木類、皮類等材料)、醋酸煮沸軟化法(適用于堅硬的木化程度強的材料)、甘油蒸煮法(也適用于堅硬的木化材料)、濕氣密閉法(特別適用于含淀粉粒、菊糖、粘液質(zhì)等的材料)、氫氟酸軟化法(極硬的材料如果實、種子類藥材)等。常用顯微制片方法（二）徒手切片法

3．切片軟化好的材料經(jīng)分割成適當(dāng)?shù)拇笮『蠹纯汕衅?，切片方法主要有?/p>

1)手執(zhí)法用左手拇指和食指夾住材料，并用中指托著，右手持刀，使刀刃與材料的切面平行，移動右臂，向后斜拉切，不得來回拉切，標(biāo)本必須一次切下。刀刃及材料切面應(yīng)經(jīng)常用水或30％乙醇潤濕，切片放入培養(yǎng)皿中。常用顯微制片方法（二）徒手切片法

(2)夾持法取夾持物切成適當(dāng)大小、然后縱向剖開(但不完全切開)，將材料裝入，再按前法將夾持物與材料同時切下，除去夾持物即可。本法適用于葉片、花瓣、細(xì)小的須根等質(zhì)軟而不便手執(zhí)的材料。

(3)壓切法將材料放于切片板上，以左手中指反食指輕輕壓住材料，右手持刀自上面下均勻用力切削。本法適用于細(xì)小的果實、種子類以及某些較硬的材料。

4．裝片用毛筆挑取透明的薄片(形狀并不要求十分完整)，放于載玻片中央，于低倍鏡下觀察(不用蓋玻片)，若切片充分透明，可以看清個別細(xì)胞，則取下滴加1—2滴封藏劑或用水合氯醛透化，再加封藏劑，蓋上蓋玻片即可。常用顯微制片方法（三）解理組織制片法（離析法）

解離是利用化學(xué)試劑使組織各細(xì)胞之間的胞間層溶解，而使細(xì)胞相互分離。解離組織制片可用于觀察細(xì)胞的完整形態(tài)和立體結(jié)構(gòu)，特別適用于纖維、導(dǎo)管、管胞等在粉末中易于破碎的長形細(xì)胞及木化、栓化、角質(zhì)化等細(xì)胞彼此不易分離的組織的觀察。此外，若用逐層解理的方法(解離劑處理至細(xì)胞彼此能分開，但整個組織不散架，經(jīng)逐層分離后分別制片)，還可弄清某些特征存在的部位，如木纖維與韌皮纖維在形態(tài)、上有時很難嚴(yán)格區(qū)分，但經(jīng)逐層解離，木質(zhì)部與韌皮部分別制片，則易將二者分開。常用顯微制片方法（三）解理組織制片法（離析法）

目前常用的解理方法有：

1.氫氧化鉀法(或氫氧化鈉法)本法適用于木化程度較低的柔軟材料的解離，解離劑不但可使細(xì)胞分離，而且具有透明作用，是目前透明、離析柔軟或稍硬材料最簡單的方法。對于較硬的材料尚可提高K0H(或NaoH)的濃度到6％-10％，或增長解離時間。

2.硝鉻酸法本法適用于木化組織較多或木化組織集結(jié)成群的材料。用此法解離的木化細(xì)胞壁將不再呈木化反應(yīng)。常用顯微制片方法（三）解理組織制片法（離析法）

目前常用的解理方法有：3.硝酸-氯酸鉀法本法適用于木化程度很強的材料，如莖木類、堅硬的果殼或種皮等。此法離析過程中有氯氣散出，故應(yīng)注意防止氯氣中毒，整個操作必須在通風(fēng)櫥內(nèi)進行。4.鹽酸-草酸銨離析法此法較為緩和，適用于草本植物的髓、薄壁組織、葉肉組織等的解離。將分割好的材料放入3：1的70％或90％酒精和濃鹽酸混合液中浸24h，然后用水洗滌，放入0.5％草酸銨水溶液中，時間隨材料性質(zhì)而定，到用玻璃棒輕壓即散為度，取山水洗3-5次，稀甘油裝片觀察。常用顯微制片方法（四）整體封固法

本法適用于扁平而薄或小的材料，如葉的表皮、花瓣、花粉粒、孢子以及藻類、菌類、纖細(xì)的苔蘚等，根據(jù)需要可作成臨時制片或永久制片。

1.臨時制片取材料適量，表皮、花瓣等較寬的材料應(yīng)切割成適當(dāng)大小的，放于載玻片中央，加1-2滴稀甘油或先經(jīng)水合氯醛透化處理后再加稀甘油，封片觀察。

2.永久制片根據(jù)脫水劑、透明劑、封固劑的不同而有多種方法，這里僅介紹兩種。常用顯微制片方法（四）整體封固法

2.永久制片

1)甘油法將材料放于載玻片中央，加一滴純甘油(甘油不可過多)，蓋上蓋玻片，用較稠的加拿大樹膠沿蓋玻片四周封邊即可。

2)冰醋酸法(孢粉制片法)此法為孢子和花粉粒的一般制片方法。分別用冰醋酸和醋酸與硫酸的混合液處理過孢子和花粉粒，其內(nèi)容物溶解，外壁及孔溝更加清晰。視情況可制成臨時或永久制片。常用顯微制片方法（五）表面制片法本法屬于整體封藏法的一種，比較常用。

1.撕取法一般用于表皮易于剝離的葉的表皮制片。

2.削取法對于表皮難于剝離的材料如多數(shù)植物葉的上表皮莖的表皮等，可采用此法。

3.解離法主要用于表皮不易剝離的葉的表面制片。4.整體造化封固法適用于扁平而薄，難于撕取表皮的葉片、花被片等的表面制片。（六）涂片法及壓片法此法是將材料涂抹或壓成一均勻的薄層，再作成臨時或永久制片，日前主要用于細(xì)胞遺傳學(xué)方面的研究，在中藥顯微鑒定中也有應(yīng)用，如漿果果肉的制片。常用顯微制片方法通過觀察生物藥的組織構(gòu)造特征來達(dá)到鑒定目的。主要用于個體較小的完整藥材鑒別。2顯微鑒定的主要內(nèi)容組織鑒定粉末鑒定顯微常數(shù)顯微化學(xué)顯微定量組織鑒定第四節(jié)通過觀察生藥的細(xì)胞、內(nèi)含物和顆粒物質(zhì)的性狀特征來達(dá)到鑒定的目的。粉末鑒定用于粉末藥材、外形較大或組織構(gòu)造無鑒別特征的藥材、破碎藥材、粉末性的中成藥。用途第四節(jié)主要有用于植物的葉類中藥鑒別的柵表細(xì)胞比、氣孔數(shù)、氣孔指數(shù)、脈島數(shù)和脈端數(shù)等。物理常數(shù)測定用顯微化學(xué)反應(yīng)來檢查中藥中細(xì)胞壁和細(xì)胞內(nèi)含物的化學(xué)物質(zhì)的性質(zhì)來達(dá)到鑒定的目的。顯微化學(xué)鑒定第四節(jié)——顯微化學(xué)反應(yīng)：主要用于藥材的臨時切片或粉末，主要進行：細(xì)胞壁的鑒別：如木質(zhì)化細(xì)胞壁、木栓化細(xì)胞壁等。各類成分的鑒別：如多糖類（淀粉、菊糖、粘液等）、蛋白質(zhì)、脂肪油、鞣質(zhì)、草酸鈣、碳酸鈣結(jié)晶、生物堿等?！@微定位：就是用顯微化學(xué)的方法確定藥材中化學(xué)成分的存在部位(有效部位)，以此鑒定藥材的質(zhì)量和品種?；疽螅河行С煞置鞔_，選擇有效成分具有的特殊反應(yīng)。使之產(chǎn)生顏色或結(jié)晶，確定有效成分存在部位。具體方法：

第四節(jié)定義方法直接將生藥切片或粉末置載玻片上，滴加試液，加蓋玻片在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶、沉淀或顏色。生藥的提取物置載玻片上，滴加試液，加蓋玻片在顯微鏡下觀察反應(yīng)。顯微化學(xué)定位顯微化學(xué)反應(yīng)⑴切片：①綿馬貫眾切片＋1％香草醛醇溶液.濃硫酸→（鏡檢）細(xì)胞間顯紅色（綿馬酸及黃綿馬酸類）②香加皮＋冰醋酸.硫酸→（鏡檢）皮層及射線細(xì)胞顯黃色，在紫外燈下顯黃綠色熒光（4－甲氧基水氧醛）。③穿山龍＋冰醋酸.硫酸→（鏡檢）木栓層及中柱外側(cè)組織呈紫紅色（穿山龍皂甙的反應(yīng)）④穿心蓮葉＋3.5—二硝基苯甲酸（1克3.5—二硝基苯甲酸溶于50ml甲醇中，再加入2N氫氧化鉀溶液50ml用時新配）3—4滴→（鏡檢）葉肉顯紅或紫紅色（五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng)）。⑤浙貝母＋碘試液→表皮一圈仍為白色，其余顯藍(lán)紫色（檢查淀粉）。⑥苦參＋氫氧化鈉試液→（鏡檢）栓皮顯橙紅色，漸為血紅色，久置不消失木部不現(xiàn)色（色素）。⑦胡黃連＋無水乙醇：濃硫酸溶液1滴→（鏡檢）可見木栓、栓內(nèi)側(cè)、皮層顯黃綠色或藍(lán)綠色（皂甙的定位反應(yīng)）。⑵粉末：①肉桂用氯仿浸漬→浸液＋2％鹽酸苯肼→（鏡檢）黃色針狀、桿狀結(jié)晶（桂皮醛）②黃連用乙醇浸漬→＋30％硝酸或鹽酸→（鏡檢）黃色針簇狀結(jié)晶（檢查小檗堿）。③胡椒粉末用乙醇浸漬，浸液稍干后加水封藏→（鏡檢）可見蓋玻片邊緣處產(chǎn)生針狀結(jié)晶（胡椒堿）。④甘草粉末＋80％的硫酸（于白磁板上）→顯橙黃色（甘草甜素的反應(yīng)）。⑤檳榔粉末＋稀硫酸1滴，再加水3－4ml→微熱幾分鐘，取濾液于載物片上＋碘化鉍鉀試液→（鏡檢）混濁。放置片刻，可見石榴紅色球形或方形結(jié)晶（檳榔堿的反應(yīng)）。(3)浸出液試驗法（顯微結(jié)晶法）：用藥材粗粉＋適量試劑浸漬，吸取浸液于載物片上，加試劑后封藏、鏡檢，產(chǎn)生不同形態(tài)及顏色的結(jié)晶。①丁香＋氯仿浸漬→浸液于載物片上＋3％氫氧化鈉的氯化鈉飽和溶液→（鏡檢）簇狀細(xì)針形結(jié)晶（丁香酚）。②天仙子＋乙醚及氨試液浸漬→浸液于載物片上＋碘化鉍鉀試液→（鏡檢）顯黃紫色飛鳥狀結(jié)晶（莨菪堿結(jié)晶）。③黃藤＋乙醇浸漬→浸液于載物片上＋30％的硝酸或鹽酸→（鏡檢）可見黃色斷棒狀結(jié)晶（小檗堿）。微量升華法：生藥中某些成分在一定溫度下可以升華，鏡檢升華結(jié)晶及其形態(tài)鑒別生藥。必要時用熔點測定儀測其熔點或用化學(xué)反應(yīng)法進一步確定其成分種類。在升華器中加入少許的生藥粉末，勿要超出升華器的面，上面放一干凈的載物片，下面以酒精燈加熱，待玻片下凝結(jié)有升華物時，停止加熱，取下玻片反過來放置，待放涼后在置于顯微鏡下直接觀察。若無升華器時，可用兩張載物片中間以兩根火柴棒隔開，期間放少許粉末，也可獲得同樣的效果。①大黃（升華）→可見黃色梭針狀、羽毛狀結(jié)晶。若加氫氧化鈉試液，結(jié)晶消失并顯紅色（蒽醌類化合物）。②胡黃連（升華）→針狀、針簇狀、棒狀、板狀結(jié)晶或球狀結(jié)晶（香莢酸及桂皮酸）③徐長卿（升華）→柱狀、針狀、羽毛狀結(jié)晶。若加三氯化鐵溶液，結(jié)晶消失并呈暗紫色（牡丹酚）。④麻黃（升華）→微細(xì)針狀或顆粒狀無色晶體（麻黃堿）。⑤鹿銜草（升華）→無色羽毛狀結(jié)晶。若加三氯化鐵溶液，則顯示紫色（對苯二酚）。⑥斑蝥（升華）→白色柱狀、棱狀結(jié)晶。若加堿液，則結(jié)晶消失，若再加鹽酸，結(jié)晶復(fù)出（斑蝥素）。⑦龍腦冰片（升華）→棒狀或多角形結(jié)晶（右旋龍腦）。⑧補骨脂（升華）→針狀、簇針狀結(jié)晶（香豆精類）。利用顯微鏡及顯微測量的某些手段，對一定重量單味藥材粉末中的某些顯微特征數(shù)量進行分析，或測定粉末性中成藥中某個組分百分含量的一種方法。顯微定量本法亦適用于粉末中藥混存物的含量測定。顯微定量分析主要用于解決采用理化方法難以控制中藥質(zhì)量的一些問題。用途基本要求及方法第四節(jié)需定量的藥材應(yīng)呈細(xì)粉狀態(tài)，被測目的物一般需具備2個條件：一是應(yīng)輪廓清晰、可以計數(shù)的顆粒。二是應(yīng)易于檢識且遇常用的顯微化學(xué)試劑和封藏劑不發(fā)生形態(tài)變化。定重量、定面積法：該法是一種直接定量的方法。比率計數(shù)定量法：“石松子法”。第四節(jié)3顯微特征的觀察與描述一般描述方法粉末特征描述細(xì)胞形狀描述組織排列描述大小的描述顏色的描述數(shù)量的描述先多數(shù)后少數(shù)先特殊后一般先感觀后測試第四節(jié)4電子顯微鏡鑒定技術(shù)電子顯微鏡主要分為透射電鏡和掃描電鏡兩大類。在中藥鑒定工作中常使用掃描電子顯微鏡或分析電子顯微鏡。特點適用范圍自學(xué)自學(xué)第四節(jié)此處講述根、莖、葉、花、果實、種子、全草、菌類、礦物、動物類解剖鑒別要點。

理化鑒定法就是利用中藥中存在某些化學(xué)成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，通過化學(xué)的、物理的或儀器分析的手段，鑒定其真?zhèn)?、純度、?nèi)在質(zhì)量，以及有害物質(zhì)的有無或含量多少。四、理化鑒定法第四節(jié)1理化鑒定的應(yīng)用范圍2理化鑒定的一般方法就是根據(jù)中藥具有的各種特殊成分的理化性質(zhì)，進行的真?zhèn)舞b別。包括物理分析法、化學(xué)分析法和物理化學(xué)分析法。就是根據(jù)中藥含有的功效成分或主要成分，測定其相對的含量，本法主要用于中藥的質(zhì)量評價和純度檢查。定性鑒別定量鑒別第四節(jié)一、微量升華的原理及方法二、在鑒定中的應(yīng)用2023/3/26139大黃微量升華——針晶大黃微量升華——羽毛狀結(jié)晶利用生藥含有蛋白質(zhì)帶電荷的成分，在同一電場作用下，由于各組分所帶電荷的性質(zhì)、電荷數(shù)目以及分子質(zhì)量不同，而泳動方向和速度不同，在一定時間內(nèi)，各成分的泳動率不同，結(jié)合譜帶數(shù)和染色不同達(dá)到鑒定的目的。利用某些化學(xué)試劑能與中藥中的某種或某類化學(xué)成分產(chǎn)生特殊的氣味、顏色、沉淀或結(jié)晶等反應(yīng)，來作為鑒別真?zhèn)蔚氖侄?。電泳分析法化學(xué)定性分析第四節(jié)生藥的化學(xué)定量分析是通過對中藥含有的某種有效成分、有效部位、雜質(zhì)或有害物質(zhì)的含量測定，來控制中藥質(zhì)量的一種方法。生藥化學(xué)定量分析通常包括重量分析法和容量分析法兩大類?；瘜W(xué)定量分析第四節(jié)它是通過測定中藥中被測物質(zhì)在某些特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。藥品分析一般用200～400nm的紫外光區(qū)；400～850nm的可見光區(qū)；2.5～15μm(或按波數(shù)計為4000～667cm-1)的紅外光區(qū)。光譜鑒定法紫外光譜法：利用中藥所含組分的不飽和程度及含量差異，導(dǎo)致紫外光譜峰位和峰強的差別來鑒定。第四節(jié)可見分光光度法：利用中藥溶液顏色對光的吸收度，以鑒定某種成分或組分含量的方法。紅外光譜法：通常測定中藥粉末、提取物或化學(xué)單體的紅外曲線反映中藥所含各組分官能團的差異。原子吸收光譜法：用于中藥中無機元素和雜質(zhì)檢查。第四節(jié)熒光光譜法:利用生藥中的某些成分在吸收自然光或紫外光后能發(fā)生熒光的性質(zhì)，對生藥及其所含成分進行鑒定的一種方法。例如：黃連飲片顯黃色熒光；浙貝母粉末顯亮淡綠色熒光；大黃粉末顯深棕色熒光。熒光效率主要與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān)，具有π-π共軛結(jié)構(gòu)的物質(zhì)才能產(chǎn)生較強的熒光，共軛結(jié)構(gòu)加長，熒光增強。含有黃酮、恩醌、香豆素、木脂素成分的生藥，一般具有較強的熒光反應(yīng)。第四節(jié)熒光分析法在生藥鑒定中的應(yīng)用定性分析紫外分析儀法1、觀察生藥整體2、觀察生藥的新鮮斷面或飲片3、觀察生藥粉末4、直接觀察生藥的某種溶劑浸出液5、將生藥提取液滴于濾紙上，揮干溶劑觀察6、生藥提取液與化學(xué)試劑作用后產(chǎn)生熒光7、多重觀察

日光法熒光顯微鏡法熒光光譜法定量分析：熒光分光光度法、薄層熒光掃描法熒光定量分析：利用被測物質(zhì)的熒光強度和溶液濃度成正比的關(guān)系，對中藥所含的成分進行含量測定。含有黃酮、恩醌、香豆素、木脂素成分的生藥，一般具有較強的熒光反應(yīng)。色譜鑒定法柱色譜法紙色譜法薄層色譜法薄層掃描法毛細(xì)管相鑒定法氣相色譜法高效液相色譜法質(zhì)譜鑒定法核磁共振光譜鑒定法熱分析法色譜光譜聯(lián)用分析法X射線衍射法聚類分析法第四節(jié)薄層色譜操作：選擇吸附劑制備薄層板點樣定性參數(shù)的選測定顯色展開（比移值Rf、相對比移值Rst）應(yīng)用：定性分析定量分析薄層色譜法

以Rf做定性的依據(jù)，因影響Rf因素多，需用標(biāo)準(zhǔn)對照品作對照。在兩種或兩種以上展開系統(tǒng)種展開，若樣品中斑點的Rf值與標(biāo)準(zhǔn)對照品的Rf值勻相同可基本肯定二者為同一化合物。定性鑒別用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照別標(biāo)準(zhǔn)對照品對照藥材用相對比移值鑒別用文字描述鑒別

原點中心至斑點中心的距離Rst=

原點中心至參考物質(zhì)斑點中心的距離定量鑒別分兩類：一是將待測物從薄層板洗脫后，選擇適宜的方法測定（洗脫法）；二是薄層展開后，用薄層掃描儀在薄層板上測定被分離組分的含量（薄層掃描法）。洗脫法分四步進行：待測組分的分離斑點定位斑點的收集及洗脫測定（多采用UV及可見光分光度法）薄層掃描法：波長的選擇（樣品波長、參比波長）測定方式的確立（透射、反射、熒光）掃描方式（直線式、鋸齒式）標(biāo)準(zhǔn)曲線線性化（與散射參數(shù)有關(guān)，硅膠薄層板SX=3，氧化鋁薄層板SX=7）定量前需考察的主要內(nèi)容：工作曲線、精密度、準(zhǔn)確度測定方法：外標(biāo)一點法，外標(biāo)二點法。HPLC

可用于定性和定量，色譜圖中各色譜峰的保留時間、色譜峰相對百分峰面積及主要色譜峰的UV吸收光譜，均可作為生藥真實性鑒定的指紋資料。是生藥及制劑質(zhì)量分析常用的方法。GC主要用于含揮發(fā)性成分的定性和定量。用于鑒定的數(shù)據(jù)主要是保留時間、相對百分峰面積。常常和質(zhì)譜聯(lián)用，快速鑒定成分電泳法帶電質(zhì)點（分子、離子或膠體顆粒）在電場作用下，向著與其所帶電荷相反的電極移動，稱為電泳。應(yīng)用：生物學(xué)和生物化學(xué)領(lǐng)域。生藥中主要用于氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核酸等。免疫鑒定法細(xì)胞生物學(xué)鑒定法生物效價測定法純指標(biāo)測定法DNA遺傳標(biāo)記鑒定法mRNA差異顯示鑒定法

五、生物鑒定法利用生藥或其所含的化合物對生物體的作用強度，以及用DNA特異性遺傳標(biāo)記特征和基因表達(dá)差異等來鑒別生藥的品種和質(zhì)量的一種方法。第四節(jié)生藥中含有過量的水分，不僅易霉?fàn)€變質(zhì)或使有效成分分解，還會使應(yīng)用稱量上相對地減少了實際用量而不能達(dá)到治療目的?？刂浦兴幹械乃趾繉τ诒ＷC中藥質(zhì)量有密切關(guān)系。第三節(jié)生藥的常規(guī)檢測項目一、水分測定1意義第五節(jié)烘干法：適用于不含揮發(fā)性成分生藥的水分測定。甲苯法：適用于含揮發(fā)性成分生藥的水分測定。減壓干燥法：適用于含有揮發(fā)性成分貴重生藥的水分測定。氣相色譜法：含水量的計算采用外標(biāo)法。紅外干燥器：可快速測定生藥的含水量，直接讀出干燥失重的數(shù)量，方法簡便，但有一定的誤差。2方法第五節(jié)適用于有效成分尚不清楚或有效成分尚無精確定量方法的生藥的質(zhì)量控制。生藥中的成分在水、不同濃度的乙醇或醚中，其浸出物的含量大致有一定的范圍。因此測定生藥浸出物的含量，對于控制生藥質(zhì)量具有實際意義。二、浸出物測定1意義第五節(jié)水溶性浸出物測定：分冷浸法和熱浸法（%）。醇溶性浸出物測定：參照水溶性浸出物測定法測定（熱浸法須在水浴上加熱）。醚溶性浸出物測定：利用脂肪提取器（索氏提取器）進行，用乙醚為溶劑。2方法第五節(jié)將生藥粉碎加熱，高溫?zé)胱浦粱一瑒t細(xì)胞組織及其內(nèi)含物灰燼成為灰分而殘留，由此所得的灰分稱為“生理灰分”。各種生藥的生理灰分應(yīng)在一定范圍以內(nèi)，所測灰分?jǐn)?shù)值高于正常范圍時，說明有其他無機物污染和摻雜。測定灰分的目的是限制生藥中的泥沙和雜質(zhì)的含量，以保證生藥的純度。三、灰分測定1意義第五節(jié)總灰分測定：供試品粉碎，先炭化，再使完全灰化并至恒重，根據(jù)殘渣重量，計算供試品中含灰分的含量（%）。酸不溶性灰分測定：取總灰分測定項所得的灰分，加稀鹽酸置水浴上加熱后，用無灰濾紙濾過。根據(jù)殘渣重量，計算出供試品中含酸不溶性灰分的含量(%)。2方法第五節(jié)利用生藥中所含揮發(fā)油成分能與水蒸氣同時蒸餾出來的性質(zhì)，在特制的揮發(fā)油測定器中測定其含量。四、揮發(fā)油測定1原理甲法：相對密度在1.0以下的揮發(fā)油測定方法。直接用揮發(fā)油測定器測定。乙法：相對密度在1.0以上的揮發(fā)油測定方法，在測定器加入二甲苯。2方法第五節(jié)第六節(jié)1、黃曲霉毒素的分析2、農(nóng)藥殘留量的檢測生藥中有機氯