實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課45

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課45第1頁/共117頁普通動(dòng)物清潔動(dòng)物SPF動(dòng)物無菌動(dòng)物及悉生動(dòng)物第四章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)分類第2頁/共117頁1．普通動(dòng)物

conventionalanimal，CV；一級(jí)動(dòng)物

指不攜帶主要人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病病原的動(dòng)物。僅可用于示教、科研的探索方法、預(yù)試之用。新國標(biāo)中大鼠、小鼠無此級(jí)別。第3頁/共117頁2．清潔動(dòng)物

cleananimal，CL；二級(jí)動(dòng)物

指除普通級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原的動(dòng)物。飼養(yǎng)于溫、濕度恒定的屏障系統(tǒng)中，飼料、墊料、籠具等都要經(jīng)過消毒處理，飲水應(yīng)用高壓滅菌或用pH為2.5～2.8的酸化水，工作人員應(yīng)換滅菌工作服、鞋、帽、口罩等進(jìn)入動(dòng)物室進(jìn)行操作。國際上此級(jí)動(dòng)物僅適合于短期或部分科研實(shí)驗(yàn)；我國作為科研工作的主要要求的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。第4頁/共117頁第5頁/共117頁3．無特定病原體動(dòng)物

specificpathogenfreeanimal，SPF；三級(jí)動(dòng)物

指除普通、清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，還不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的動(dòng)物。國際上公認(rèn)SPF動(dòng)物適用于所有科研實(shí)驗(yàn)，是目前國際標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。各種疫苗生產(chǎn)所采用的動(dòng)物應(yīng)為SPF級(jí)動(dòng)物。第6頁/共117頁第7頁/共117頁4．無菌動(dòng)物

germfreeanimal，GF；四級(jí)動(dòng)物

指無可檢出一切生命體的動(dòng)物。第8頁/共117頁種類培育者及育成時(shí)間小鼠Pleasants,1959大鼠Reyniers1946；Gustafsson,1948豚鼠Miyakawa1958;Tanami,1959;兔Wostmann1959;Luckey,1963狗Glimsedt,1946貓Bleby,1969山羊、綿羊Smith,1961,1966豬Whitenair,1960馬Drummond等,1973猴Reyniers,1942雞Reyniers,1943鵪鶉Woodard等,1965;Miles,1966第9頁/共117頁4.1無菌動(dòng)物的特點(diǎn)（一）形態(tài)學(xué)改變1．消化系統(tǒng)主要變化在腸道上。腸道肌層薄，更為特異的是盲腸肥大2．血液循環(huán)系統(tǒng)無菌動(dòng)物白細(xì)胞數(shù)值恒定3．免疫系統(tǒng)免疫功能基本上處于原始狀態(tài)4．泌尿系統(tǒng)腎臟較小，如無菌豚鼠。第10頁/共117頁

(二)生理學(xué)改變1．免疫功能2．生長(zhǎng)率3．生殖4．代謝5．營養(yǎng)第11頁/共117頁4.2無菌動(dòng)物技術(shù)無菌動(dòng)物的理論基礎(chǔ)和實(shí)踐依據(jù)在于胎盤屏障和屏障觀念，根據(jù)這個(gè)基礎(chǔ)開展了無菌動(dòng)物工作。在無菌條件下取仔，一切操作在無菌隔離器內(nèi)進(jìn)行。第12頁/共117頁臨產(chǎn)前動(dòng)物麻醉或頸椎脫臼處死浸泡在37℃滅菌液中，送進(jìn)無菌室（或無菌隔離器）剖腹，切除帶胎子宮（子宮內(nèi)首先應(yīng)無菌）浸入消毒液輸送到另一只隔離器中，切開子宮取胎仔體并斷臍（電刀切斷）隔離器內(nèi)人工喂乳或其他品系的無菌動(dòng)物作保姆代養(yǎng)第13頁/共117頁（1）哺乳類無菌動(dòng)物技術(shù)小動(dòng)物--子宮切除大動(dòng)物--子宮切開取仔程序如下：1.腹部剃毛或用硫化鋇脫毛劑脫毛2.處死妊娠雌鼠3.浸泡于37℃滅菌液中2min4.固定，并于腹部粘上滅菌膠布5.剖腹6.取出子宮7.剪開子宮壁，取出胎鼠，呼吸正常時(shí)切斷臍帶8.分開胎盤，放到代乳母鼠身邊9.剖腹取胎的時(shí)限。小鼠、大鼠：9～10min。豚鼠：5min第14頁/共117頁（2）鳥類無菌動(dòng)物技術(shù)常用鵪鶉，也用雞。無菌雞，要選育無白血病的雞群。培育關(guān)鍵在于消毒卵殼：首先選外殼干凈的受精卵①將受精卵放到濕潤(rùn)劑中。②再放入2％升汞中浸12min③將浸泡過的受精卵放入隔離器中孵育。建立無白血病雞群先從母雞選起。第15頁/共117頁5.悉生動(dòng)物

gnotobioticanimal，GN；四級(jí)動(dòng)物又稱已知菌（叢）動(dòng)物（animalwithknownbacterialuflora）。飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。向無菌動(dòng)物體內(nèi)植入一種或幾種已知細(xì)菌。單菌（monoxenic）、雙菌（dixenie）、三菌（trixenie）、多菌（polyxenie）。更強(qiáng)的生活力和抵抗力，更易于飼養(yǎng)管理第16頁/共117頁6.潔凈動(dòng)物與普通動(dòng)物的比較等級(jí)飼養(yǎng)環(huán)境空氣潔凈度要求無菌動(dòng)物(四級(jí))隔離100級(jí)以封閉的無菌技術(shù)取得，用現(xiàn)有方法不能檢出任何微生物、寄生蟲等任何生命體的動(dòng)物悉生動(dòng)物(四級(jí))隔離100級(jí)經(jīng)特殊飼養(yǎng)，確知所帶微生物菌叢等寄生物的動(dòng)物。SPF動(dòng)物(三級(jí))屏障l萬級(jí)無特定致病性微生物和寄生蟲，確知不帶有病原微生物的動(dòng)物清潔動(dòng)物(二級(jí))屏障10萬級(jí)不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科研干擾大病原，確知不帶有病原微生物的動(dòng)物普通動(dòng)物(—級(jí))開放不帶主要人畜共患和動(dòng)物烈性傳染病原體，對(duì)微生物帶有情況不明確的動(dòng)物第17頁/共117頁對(duì)科研結(jié)果影響的比較實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目無菌動(dòng)物無特殊病原體動(dòng)物普通動(dòng)物傳染病無無有或可能有寄生蟲無無有或可能有實(shí)驗(yàn)結(jié)果明確明確有疑問應(yīng)用動(dòng)物數(shù)少數(shù)少數(shù)多或大量統(tǒng)計(jì)價(jià)值很好可能好不準(zhǔn)確長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)可能好可能好困難自然死亡率很少少高長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)存活率約100％約90％約40％實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確設(shè)計(jì)可能可能不可能實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論價(jià)值高中低第18頁/共117頁第五章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境與設(shè)施主要介紹了各種環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的分類和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的組成，重點(diǎn)討論開放環(huán)境、屏障環(huán)境和隔離環(huán)境的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施使用特點(diǎn)，以及生物安全和感染實(shí)驗(yàn)設(shè)施的使用特點(diǎn)。

第19頁/共117頁第一節(jié)環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響一、環(huán)境因素的重要性第20頁/共117頁動(dòng)物實(shí)驗(yàn)處理的反應(yīng)可用下式表示：R=（A十B＋C）×D＋E式中：R-實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng)；A-實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種的共同反應(yīng)；B-動(dòng)物品種及品系特有的反應(yīng)；C-動(dòng)物個(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）；D-環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理），E-實(shí)驗(yàn)誤差。第21頁/共117頁實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境因素：自然因素（包括物理、化學(xué)和生物學(xué)因素）人為因素第22頁/共117頁二、環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響氣候因素（溫度、濕度、氣流速度等）理化因素（照明、聲音、氣味等）居住因素（房屋、籠具、墊料等）同種動(dòng)物間因素（飼養(yǎng)密度、社會(huì)地位、勢(shì)力范圍等）第23頁/共117頁一）溫度

溫度的影響可表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：動(dòng)物的新陳代謝動(dòng)物的臟器重量動(dòng)物的生殖機(jī)能動(dòng)物機(jī)體的抵抗力動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)性第24頁/共117頁屏障環(huán)境內(nèi)嚙齒類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（設(shè)備）內(nèi)溫度應(yīng)控制在20～26℃

第25頁/共117頁二）濕度

動(dòng)物在相對(duì)濕度為40～70％之間生活最適應(yīng),以50％±5％為最佳。

對(duì)動(dòng)物的散熱有顯著影響對(duì)病原微生物和寄生蟲的生長(zhǎng)繁殖與發(fā)育影響導(dǎo)致動(dòng)物一些疾病的發(fā)生粉塵的影響第26頁/共117頁三）氣流、氣流速度及換氣次數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體表面積與單位體重的比值較大氣流速度控制在0.1m/s-0.2m/s

動(dòng)物室內(nèi)氣流方向

清潔走廊→飼育室→污染走廊→設(shè)施外

換氣次數(shù)，一般屏障設(shè)施以10～20次/h為宜第27頁/共117頁四)噪聲來源：①外界傳入；②室內(nèi)機(jī)器產(chǎn)生，如空調(diào)機(jī)、排風(fēng)機(jī)等；③動(dòng)物自身產(chǎn)生，如跑動(dòng)、爭(zhēng)斗、鳴叫等。第28頁/共117頁環(huán)境噪聲的影響①影響動(dòng)物的繁殖生長(zhǎng)第29頁/共117頁②影響動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)③影響動(dòng)物其他生理狀態(tài)噪聲應(yīng)控制在60dB以下第30頁/共117頁第31頁/共117頁第32頁/共117頁五）照明照明因素包括照度、波長(zhǎng)和照明時(shí)間

照度對(duì)動(dòng)物的角膜會(huì)產(chǎn)生影響150-300lx照明時(shí)間影響動(dòng)物的繁殖12:1210:14光的波長(zhǎng)也影響動(dòng)物的生長(zhǎng)和繁殖第33頁/共117頁六）空氣潔凈度動(dòng)物飼養(yǎng)室空氣中顆粒物污染的來源：室外空氣未經(jīng)過濾處理直接進(jìn)入；動(dòng)物體表被毛、皮屑、飼料和墊料等。5μm以下的粉塵

第34頁/共117頁

我們國家潔凈室的標(biāo)準(zhǔn)是《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》（GB50073-2001），標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的空氣潔凈度等級(jí)等同采用國際標(biāo)準(zhǔn)ISO1466-1中的有關(guān)規(guī)定。潔凈室及潔凈區(qū)空氣中懸浮粒子潔凈度等級(jí)見下表：第35頁/共117頁第36頁/共117頁七）有害氣體主要有害氣體：

氨、甲基硫醇、硫化氫、硫化甲基、甲基丁烷、三甲胺、苯乙烯、乙醛和硫化二甲基信息素（pheromone）或叫引物信息素（primerpheromone）①Lee-Boot效應(yīng)，是指小鼠群養(yǎng)時(shí)常常發(fā)生假性妊娠和發(fā)情周期混亂的現(xiàn)象。②Whitten效應(yīng)，是指由于雄性動(dòng)物分泌的信息素促使雌性動(dòng)物的發(fā)情周期出現(xiàn)有規(guī)律的現(xiàn)象。③Bruce效應(yīng)，是指懷孕初期的雌性小鼠與交配對(duì)象以外的雄性接近或同居時(shí)產(chǎn)生的中止妊娠反應(yīng)。第37頁/共117頁八）動(dòng)物設(shè)施建筑建筑物之間應(yīng)保持一定的距離，以防疾病的傳播動(dòng)物居住的建筑物與周圍社會(huì)的關(guān)系第38頁/共117頁九）動(dòng)物設(shè)施設(shè)備空調(diào)系統(tǒng)通風(fēng)系統(tǒng)給排水系統(tǒng)照明系統(tǒng)清洗消毒系統(tǒng)第39頁/共117頁十）籠具和鋪墊物飼養(yǎng)籠具的材質(zhì)和構(gòu)造墊料第40頁/共117頁十一）飼養(yǎng)密度動(dòng)物在一定環(huán)境條件下（一定的空間、定量的食物）飼養(yǎng)時(shí)，群體增殖的情況呈S型曲線。第41頁/共117頁十二）社會(huì)因素和勢(shì)力范圍動(dòng)物的社會(huì)地位大致分為直線型與專制型。直線型指可用直線表示優(yōu)劣關(guān)系的類型。第1位的為首領(lǐng)，可統(tǒng)治第2位，第2位統(tǒng)治第3位，以此類推。猴、兔、雞屬此類。專制型指一個(gè)動(dòng)物為首領(lǐng)，首領(lǐng)以下的動(dòng)物之間不發(fā)生爭(zhēng)斗。這種類型存在于小鼠、大鼠、貓之間。第42頁/共117頁動(dòng)物社會(huì)結(jié)構(gòu)中的勢(shì)力范圍

勢(shì)力范圍是指某個(gè)個(gè)體保衛(wèi)某個(gè)地區(qū)不允許其他個(gè)體侵入。即使是地位低劣的個(gè)體，出自保衛(wèi)自己勢(shì)力范圍的目的，面對(duì)最強(qiáng)的個(gè)體也有防衛(wèi)的習(xí)性。第43頁/共117頁第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的設(shè)施分類一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的概念

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施的總和。一個(gè)設(shè)施可以大到動(dòng)物中心或生產(chǎn)繁殖機(jī)構(gòu)，小至某一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室?？傮w的原則是提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最適宜的環(huán)境，保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量和為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性提供可靠保障。第44頁/共117頁二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類（一）、按其功能分類

1．動(dòng)物生產(chǎn)設(shè)施（AnimalProductionFacility）指用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼育繁殖、生產(chǎn)的建筑物、設(shè)備以及運(yùn)營管理在內(nèi)的總和。2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（AnimalExperimentalFacility）指用于研究、試驗(yàn)、教學(xué)、生物制品、藥品生產(chǎn)、檢定等為目的進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼育、試驗(yàn)的建筑物、設(shè)備以及運(yùn)營管理在內(nèi)的總和。3．特殊動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（SpecialAnimalExperimentalFacility）指用于感染、毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、病原微生物和細(xì)胞培養(yǎng)、重組DNA、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、克隆和胚胎干細(xì)胞、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用特殊化學(xué)物質(zhì)等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的建筑物、設(shè)備以及包括運(yùn)營管理在內(nèi)的總和。第45頁/共117頁（二）按微生物控制程度分類1．普通環(huán)境（OpenSystem）直接與外界大氣相通，是飼養(yǎng)普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的場(chǎng)所。飼料、飲水要符合衛(wèi)生要求，墊料要消毒，飼養(yǎng)室內(nèi)要有防鼠、防昆蟲等措施。第46頁/共117頁2．屏障環(huán)境（BarrierSystem）與外界隔離，是飼養(yǎng)清潔級(jí)動(dòng)物和SPF級(jí)動(dòng)物的設(shè)施。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)過濾凈化處理，其潔凈度相對(duì)于10000級(jí)，進(jìn)入屏障內(nèi)的人、動(dòng)物和物品如飼料、水、墊料及實(shí)驗(yàn)用品等均需有嚴(yán)格的微生物控制。第47頁/共117頁第48頁/共117頁第49頁/共117頁3．隔離環(huán)境(IsolationSystem)

與外界環(huán)境完全隔離的環(huán)境內(nèi)。工作人員通過隔離器上組裝的無菌手套進(jìn)行操作，不直接接觸動(dòng)物。飼料、飲水，墊料，籠具等都應(yīng)高壓、高溫滅菌。進(jìn)入隔離器內(nèi)的一切物品均需通過傳遞艙滅菌。適合飼養(yǎng)SPF、無菌動(dòng)物、動(dòng)物的保種育種或同等級(jí)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。第50頁/共117頁第51頁/共117頁（三）按設(shè)施的平面布局分類1．無走廊式(NoCorridors)用于飼養(yǎng)品種單一或以實(shí)驗(yàn)為主的設(shè)施。一般飼養(yǎng)普通級(jí)動(dòng)物第52頁/共117頁2．單走廊式（SingleCorridors）一般的研究機(jī)構(gòu)在進(jìn)行中、短期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。相對(duì)于雙走廊其優(yōu)點(diǎn)是占用空間小，設(shè)施利用率較高，維護(hù)費(fèi)用低。缺點(diǎn)為清潔籠具和污染材料之間常常存在污染的危險(xiǎn)，走廊相對(duì)擁擠。第53頁/共117頁第54頁/共117頁3雙走廊式（DoubleCorridors）

常用的一種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施類型?？梢杂行Х指顬榍鍧崊^(qū)和污染區(qū)。作為屏障設(shè)施使用，比較容易控制微生物污染。缺點(diǎn)是有效利用面積減少。第55頁/共117頁第56頁/共117頁4．三走廊式（ThreeCorridors）

三走廊式壓力梯度從中間的潔凈走廊、前室、動(dòng)物飼養(yǎng)室、污物走廊逐漸降低，是目前常用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施。第57頁/共117頁第58頁/共117頁第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的建筑要求一、選址

為新建實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施選址，可參照GBJ73－84潔凈廠房的規(guī)范要求。考慮外部環(huán)境如下因素：（1）大氣含塵濃度及化學(xué)污染程度低，自然環(huán)境好的區(qū)域。（2）空氣含菌水平低。（3）應(yīng)能保證水電供應(yīng)，并應(yīng)有道路到達(dá)，交通方便。（4）應(yīng)遠(yuǎn)離有嚴(yán)重震動(dòng)和噪聲干擾的鐵路、碼頭、飛機(jī)場(chǎng)、交通要道。（5）設(shè)施應(yīng)布置在院區(qū)內(nèi)環(huán)境清潔、人流、貨流不穿越或少穿越的地段。（6）選址應(yīng)避開自然疫源地。第59頁/共117頁二、設(shè)施面積的分配和布局原則（1）繁育飼養(yǎng)區(qū)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)區(qū)分開，各成獨(dú)立系統(tǒng)，專區(qū)（室）專用。（2）在規(guī)模較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物樓，從微生物控制及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用管理方便考慮，應(yīng)將低級(jí)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與高級(jí)別動(dòng)物所在的樓層盡量分開。（3）同等級(jí)、且性情亦較溫順的動(dòng)物可安排在同一套設(shè)施或同一樓層內(nèi)，但對(duì)環(huán)境易造成較大影響的動(dòng)物，如犬會(huì)制造巨大噪聲，應(yīng)作特別處理。(4)潔凈設(shè)施布局設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)保證人員、物品和凈化空氣單向移動(dòng)，以避免交叉污染。(5)實(shí)施布局要方便日常工作和實(shí)驗(yàn)操作，并有足夠的空間放置必需物品。第60頁/共117頁三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的布局（一）區(qū)域布局

1．前區(qū)的設(shè)置包括辦公室、維修室、庫房、飼料室和一般走廊。2．飼育區(qū)的設(shè)置（1）繁育、生產(chǎn)區(qū)。包括隔離檢疫室、緩沖間、育種室、擴(kuò)大群飼育室、生產(chǎn)群飼育室、待發(fā)室、清潔物品貯藏室、清潔走廊、污物走廊。（2）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)區(qū)。包括緩沖間、實(shí)驗(yàn)飼育間、清潔物品貯藏室、清潔走廊、污物走廊。（3）輔助區(qū)。包括倉庫、洗刷間、廢棄物品存放處理間（設(shè)備）、密閉式實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體冷藏存放間（設(shè)備）、機(jī)械設(shè)備室、沐浴間、工作人員休息室。第61頁/共117頁（二）其它設(shè)施設(shè)置屏障環(huán)境和隔離環(huán)境均應(yīng)在壓力變化相交接處設(shè)有緩沖設(shè)置。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)區(qū)的設(shè)施應(yīng)與飼養(yǎng)繁育系統(tǒng)分開設(shè)置。有關(guān)放射性實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)參照GB4792實(shí)施。帶烈性傳染性、致癌、使用劇毒物質(zhì)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，均應(yīng)在負(fù)壓隔離設(shè)施或有嚴(yán)格防護(hù)的設(shè)備內(nèi)操作。排出氣體和廢物須經(jīng)無害化處理應(yīng)體現(xiàn)“人、動(dòng)物、環(huán)境”的三保護(hù)原則。第62頁/共117頁（三）各個(gè)分區(qū)設(shè)施的功能1．飼養(yǎng)室應(yīng)分設(shè)有育種室、擴(kuò)大群飼育室、生產(chǎn)群飼育室、待發(fā)室等。2．隔離檢疫室外部引進(jìn)的動(dòng)物需隔離1-2周。

3．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室供作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用，如手術(shù)室，實(shí)驗(yàn)處理室，實(shí)驗(yàn)觀察室，動(dòng)物監(jiān)測(cè)室等。第63頁/共117頁4．洗刷消毒室一般使用雙扉高壓滅菌器，其洗刷消毒后室與動(dòng)物室相連，物品經(jīng)滅菌后直接移入屏障5．庫房屏障設(shè)施內(nèi)應(yīng)設(shè)清潔庫房。6．工作人員用房包括辦公室、休息室、淋浴室、廁所等。屏障設(shè)施內(nèi)一般不設(shè)衛(wèi)生間以減少廢物。7．廢物處理間污染墊料應(yīng)密封運(yùn)送至專門堆集場(chǎng)所，做到日清日洗。尸體裝于塑料袋中密封，可先暫存在冰柜內(nèi)，然后送焚尸爐焚燒。第64頁/共117頁（四）屏障環(huán)境的人流和物流控制潔凈區(qū)壓力梯度一般遵守：

潔凈走廊>動(dòng)物生產(chǎn)（實(shí)驗(yàn)）區(qū)>非潔凈區(qū)人的移動(dòng)路向：

更衣→淋浴→二次更衣→清潔走廊→飼養(yǎng)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室→污染走廊→外部區(qū)域。

第65頁/共117頁物品的移動(dòng)路向：

物品→高壓蒸汽消毒鍋（已包裝的消毒物品可經(jīng)傳遞窗，籠具經(jīng)泡有消毒液的渡槽）→清潔準(zhǔn)備室→清潔物品儲(chǔ)存室→飼養(yǎng)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室→污物走廊→外部區(qū)域。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的移動(dòng)路向：

外來實(shí)驗(yàn)動(dòng)物→傳遞窗→檢疫室（經(jīng)檢疫后）→清潔走廊→飼養(yǎng)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室→污染走廊（包裝）→外部區(qū)域。

第66頁/共117頁屏障設(shè)施內(nèi)必須安裝空氣凈化器初、中效過濾器控溫、控濕裝置每個(gè)飼養(yǎng)室設(shè)立獨(dú)立的高效過濾器將調(diào)控好溫、濕度的潔凈空氣送入動(dòng)物室。室內(nèi)排風(fēng)口也應(yīng)裝有初效過濾器。第67頁/共117頁四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的建筑要求（一）房間面積

地面面積：15-20m2最小寬度：3m左右天花板高度：至少2.5m。墻、地表面平滑、耐磨、耐壓、耐酸、堿、鹽、化學(xué)溶劑,無滲漏，自流平厚3mm,有一定彈性,使用年限為15年。第68頁/共117頁（二）地面

拐角處做成圓角弧面設(shè)計(jì)。地面可采用聚氨酯自流地坪，司米克地板磚拼縫鑲嵌深色環(huán)氧樹脂涂料，高級(jí)環(huán)氧樹脂加優(yōu)質(zhì)固化劑自流坪。

（三）墻面

外墻首選混凝土、鋼筋和磚（四）天花板

優(yōu)質(zhì)彩鋼板制成。金屬圓踢腳，隔墻與隔墻之間、隔墻與吊頂之間均有金屬圓弧連接件。第69頁/共117頁（五）無菌水池和地漏設(shè)不銹鋼密封式水池,防污染。地漏為不銹鋼特制,可水封,防堵,防回水、回氣。（六）門和窗門一般情況向內(nèi)開在屏障內(nèi)，門向壓力高的方向開（即正壓）上面設(shè)計(jì)觀察窗門寬不小于1m門采用特制鋁合金凈化門型材制作,耐腐蝕,易清洗。不設(shè)門檻,門下裝密封條,氣密性好,安裝閉門器。屏障區(qū)一般不設(shè)窗。第70頁/共117頁（七）傳遞窗和內(nèi)走廊

傳遞窗為不銹鋼板制作,耐消毒液,內(nèi)設(shè)4個(gè)紫外線燈,雙門互鎖。走廊寬度不應(yīng)小于1.5m。（八）藥液渡槽

用3mm厚不銹鋼制作,下設(shè)排水開關(guān),上蓋可用水密封。第71頁/共117頁（九）配電及通訊設(shè)施內(nèi)的配電線暗裝,由非潔凈區(qū)進(jìn)入潔凈區(qū)的電氣管線、管口應(yīng)嚴(yán)格密封。電源插座帶蓋,開關(guān)均有防水膜。（十）野鳥和昆蟲控制在門、窗等部位，要有防止野鳥和昆蟲進(jìn)入的設(shè)施。包括紗窗、過濾器或風(fēng)門片等,同時(shí)在管道系統(tǒng)使用風(fēng)門片或隔柵，在地面排水口覆蓋紗網(wǎng)。（十一）噪聲控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)聲波的靈敏度和范圍比人高,噪音引起動(dòng)物躁動(dòng)和驚恐,影響正常生活規(guī)律,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,一是防止外界干擾,遠(yuǎn)離噪音源;二是對(duì)空調(diào)及送風(fēng)設(shè)備進(jìn)行隔音和消音處理。第72頁/共117頁第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)環(huán)境國家標(biāo)準(zhǔn)

一、國家標(biāo)準(zhǔn)的制定

技術(shù)監(jiān)督局1994年批準(zhǔn)頒布了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)環(huán)境及設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)（GB/T14925-94）。

2001年又進(jìn)行了重新修訂。第73頁/共117頁第74頁/共117頁第75頁/共117頁第76頁/共117頁一、空氣凈化系統(tǒng)設(shè)備第五節(jié)動(dòng)物設(shè)施中的主要設(shè)備

第77頁/共117頁二、電源、照明、通訊設(shè)備三、安全和報(bào)警系統(tǒng)四、消毒與滅菌設(shè)備（一）壓力蒸氣滅菌器（二）渡槽（三）無菌水生產(chǎn)系統(tǒng)第78頁/共117頁五、微生物控制設(shè)備與飼養(yǎng)設(shè)備（一）隔離器第79頁/共117頁第80頁/共117頁（二）獨(dú)立通風(fēng)換氣籠盒（IndividuallyVentilatedCages，IVC）第81頁/共117頁（三）層流架（柜）第82頁/共117頁（四）生物安全柜第83頁/共117頁第84頁/共117頁第六節(jié)生物危害特殊實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施生物危害的種類包括：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所產(chǎn)生的危害病原微生物感染所造成的危害轉(zhuǎn)基因、克隆和重組基因等的危害生物危害特殊實(shí)驗(yàn)設(shè)施目的就是最大限度減少對(duì)人類的侵害。第85頁/共117頁一、感染實(shí)驗(yàn)微生物危害的分級(jí)1、生物危害1級(jí)：對(duì)個(gè)體和群體危害程度低，不能對(duì)健康成年人和動(dòng)物致病的微生物。

2、生物危害2級(jí)：對(duì)個(gè)體危害程度為中度，對(duì)群體危害較低，主要通過皮膚、黏膜、消化道傳播。對(duì)人和動(dòng)物有致病性，但對(duì)實(shí)驗(yàn)人員、動(dòng)物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害的動(dòng)物致病微生物，具有有效的預(yù)防和治療措施。第86頁/共117頁3、生物危害3級(jí)：對(duì)個(gè)體危害程度高，對(duì)群體危害程度較高。能通過氣溶膠傳播，引起嚴(yán)重或致死性疫病，導(dǎo)致嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失的動(dòng)物致病微生物，或外來的動(dòng)物致病微生物。對(duì)人引發(fā)的疾病具有有效的預(yù)防和治療措施。4、生物危害4級(jí)：對(duì)個(gè)體和群體的危害程度高，通常引起嚴(yán)重疫病的、暫無有效預(yù)防和治療措施的動(dòng)物致病微生物。通過氣溶膠傳播、高度傳染性、致死性的動(dòng)物致病微生物；或未知的危險(xiǎn)的動(dòng)物致病微生物。第87頁/共117頁二、生物安全實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和使用要求1、生物安全-1級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-1）一級(jí)生物安全水平（BasicLaboratory-BiosafetyLevel，BSL-1）是指能夠安全操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和動(dòng)物無明顯致病性的，對(duì)環(huán)境危害程度微小的，特性清楚的病原微生物的生物安全水平，也稱基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室無需與一般區(qū)域隔離。第88頁/共117頁設(shè)施要求如下：實(shí)驗(yàn)室有控制進(jìn)出的門；每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有一個(gè)洗手池；室內(nèi)裝飾便于打掃衛(wèi)生，不用地毯和墊子；工作臺(tái)面不漏水、耐酸堿和中等熱度、抗化學(xué)物質(zhì)的腐蝕；實(shí)驗(yàn)室內(nèi)器具安放穩(wěn)妥,器具之間留有一定的距離,方便清掃；實(shí)驗(yàn)室的窗戶,必須安紗窗。第89頁/共117頁2、生物安全度-2實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）二級(jí)生物安全水平（BasicLaboratory-BiosafetyLevel,BSL-2）是指能夠安全操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和動(dòng)物致病性低的，對(duì)環(huán)境有輕微危害的病原微生物的生物安全水平。也稱為基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室無需與一般區(qū)域隔離。第90頁/共117頁要求設(shè)施門要加鎖，限制人員進(jìn)入；實(shí)驗(yàn)設(shè)施地點(diǎn)離開公共區(qū)每個(gè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)一個(gè)洗手池；要求設(shè)置非手動(dòng)或自動(dòng)開關(guān)；建立沖洗眼睛的緊急救護(hù)點(diǎn)。

Ⅱ級(jí)生物安全柜：能產(chǎn)生傳染物外溢、濺出和氣溶膠的操作,包括離心、研磨、攪拌、強(qiáng)力震蕩混合、超聲波破碎、打開裝有傳染性材料的容器、動(dòng)物鼻腔注射、收取感染動(dòng)物和孵化卵的組織等第91頁/共117頁第92頁/共117頁第93頁/共117頁第94頁/共117頁（三）生物安全度-3實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）三級(jí)生物安全水平（BasicLaboratory-BiosafetyLevel,BSL-3）是指能夠安全地從事來自國內(nèi)和國外的，可能通過呼吸道感染，引起嚴(yán)重或致死性疾病的病原微生物工作的生物安全水平。第95頁/共117頁BSL-3實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的要求：1．建筑結(jié)構(gòu)和平面布局進(jìn)入設(shè)施的通道設(shè)帶閉門器的雙扇門,更衣室（一更室-清潔區(qū)、二更室-半污染區(qū)），后室或稱緩沖室（半污染區(qū)），實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有安全通道和緊急出口，并有明顯標(biāo)識(shí)半污染區(qū)與清潔區(qū)之間必須設(shè)置傳遞窗。第96頁/共117頁2．密閉性和內(nèi)表面一切設(shè)施、設(shè)備外表無毛刺、無銳利棱角，盡量減少水平表面面積，便于清潔和消毒。各種管道通過的孔洞必須密封。墻和頂棚的表面要光滑，不刺眼、不積塵、不受化學(xué)物和常用消毒劑的腐蝕，無滲水、不凝集蒸氣。第97頁/共117頁3．消毒滅菌設(shè)施必須安裝雙扉式高壓蒸汽滅菌器4．凈化空調(diào)采用負(fù)壓?jiǎn)蜗蛄魅嘛L(fēng)凈化空調(diào)系統(tǒng)。污染區(qū)和半污染區(qū)不允許安裝暖氣、分體空調(diào)，不可用電風(fēng)扇。溫度23.0℃±20.0℃、相對(duì)濕度40%—70%。室內(nèi)噪聲不超過60dB。氣流方向由清潔區(qū)向污染區(qū)，由低污染區(qū)流向高污染區(qū)。供氣需過濾,排出的氣體必須經(jīng)過至少兩級(jí)過濾排放，不允許在任何區(qū)域循環(huán)使用。室內(nèi)潔凈度高于萬級(jí)。第98頁/共117頁5．水的凈化處理6．污染物和廢棄物處理7．實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控系統(tǒng)8．備用電源9．通訊第99頁/共117頁(四)生物安全度-4實(shí)驗(yàn)室(BSL-4)

四級(jí)生物安全水平是指能夠安全地從事來自國內(nèi)和國外的，能通過氣溶膠傳播，實(shí)驗(yàn)室感染高度危險(xiǎn)，嚴(yán)重危害人、動(dòng)物生命和環(huán)境的、沒有特效預(yù)防和治療方法的微生物工作的生物安全水平。第100頁/共117頁BSL-4（P4）級(jí)實(shí)驗(yàn)室也稱為最高級(jí)安全實(shí)驗(yàn)室。適用于從事未知的或能引起致命疾病的，對(duì)個(gè)人有高度風(fēng)險(xiǎn)的病原體的工作。采用獨(dú)立的建筑物，內(nèi)為隔離區(qū)和外部隔斷的構(gòu)造。根據(jù)相應(yīng)的隔離等級(jí)使室內(nèi)保持負(fù)壓。在密封型（即Ⅲ級(jí)）生物安全柜內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，工作人員需穿上通過維持生命裝置換氣的整體式正壓個(gè)人防護(hù)服。第101頁/共117頁實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的要求

BSL-4實(shí)驗(yàn)室有兩種類型：安全柜型，即所有病原微生物的操作均在Ⅲ級(jí)生物安全柜內(nèi)或隔離器進(jìn)行；防護(hù)服型，即工作人員穿正壓防護(hù)服工作，操作可在Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。也可以在同一設(shè)施內(nèi)穿正壓防護(hù)服，并使用Ⅲ級(jí)生物安全柜。第102頁/共117頁三、特殊動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施的建筑要求（一）空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)的建筑要求（二）給、排水系統(tǒng)的建筑要求（三）電氣系統(tǒng)的建筑要求第103頁/共117頁第七節(jié)放(輻)射污染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施在設(shè)計(jì)、建筑放射（輻射）污染防護(hù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施時(shí)，必須嚴(yán)格遵守GB792-84《放射衛(wèi)生防護(hù)基本標(biāo)準(zhǔn)》、GB703-88《輻射防護(hù)規(guī)定》、GB188712-2002)《電離輻射防護(hù)與輻射源安全基本標(biāo)準(zhǔn)》GB14925-2001《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境與設(shè)施》等要求，增強(qiáng)放射（輻射）衛(wèi)生防護(hù)意識(shí)。第104頁/共117頁一、放（輻）射性污染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施的設(shè)計(jì)

（一）選址

（1）大型防放（輻）射行危害的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施應(yīng)考慮區(qū)域地質(zhì)構(gòu)造、是否為危險(xiǎn)地帶；不宜在地震、海嘯、湖震頻繁、崩塌、巖堆、滑坡區(qū)、山洪、泥石流區(qū)、活動(dòng)沙丘區(qū)、高壓縮性淤泥及軟土區(qū)、坡度陡的地區(qū)選址建筑。（2）小型放（輻）射性危害動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施選址遠(yuǎn)離其它動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，不能毗鄰居民密集區(qū)、鬧市區(qū)、易燃易爆品生產(chǎn)區(qū)。第105頁/共117頁（二）動(dòng)物設(shè)施防護(hù)（1）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施中有放（輻）射性物質(zhì)的存放區(qū)域，必須在實(shí)驗(yàn)室某一區(qū)域設(shè)置有混凝土屏蔽室或有足夠屏蔽厚度和作用的裝置。（2）防護(hù)門咬合嚴(yán)密，機(jī)房門內(nèi)所鑲鉛板對(duì)接處無空隙,操作室觀察窗鉛玻璃、四周木框鑲鉛板、傳片箱包鉛板、電源插座等凹槽處設(shè)置放射防護(hù)標(biāo)志。（3）凡能產(chǎn)生放（輻）射性固體廢物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)區(qū)域，都應(yīng)設(shè)計(jì)有相應(yīng)的廢物暫時(shí)貯存設(shè)施，并保證暫時(shí)貯存的廢物必須在包裝和