DB21T 3093-2018犬冠狀病毒病診斷技術(shù)規(guī)范

ICS11.220遼寧省地DB21方標(biāo)準(zhǔn)DBT3093—2018etechnicalspecificationsfordiagnosistechnologyofcaninecoronavirusdisease遼寧省市場監(jiān)督管理局發(fā)布 ronavirusCCV ninecoronavirusdisease illingtest CCV紙)診斷 24.5分子生物學(xué)技術(shù)(RT-PCR病毒基因檢測) 3 前言GBT。督所等單位。4.1流行病學(xué)診斷犬冠狀病毒病診斷技術(shù)規(guī)范規(guī)定了犬冠狀病毒病診斷的技術(shù)方法、步驟和結(jié)果判斷依據(jù)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于我省境內(nèi)的犬飼養(yǎng)場(戶)、動物診療單位和動物疫病預(yù)防控制部門對犬冠狀病毒病范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改版本)適用于本文件。GBT682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范定義犬冠狀病毒Caninecoronavirus，CCV犬冠狀病毒病Caninecoronavirusdisease征的一種高度接觸性傳染病。測試紙。CRTCapillaryfillingtest4診斷疫學(xué)(CCV膠體金檢測試紙)和分子生物學(xué)(RT-PCR病毒基因檢測)技術(shù)，建立實驗室快速診斷方法。V或間接地傳染給易感犬；原混合感染等因素有關(guān)。4.2臨床癥狀診斷伏期：CCV感染潛伏期較短，一般為1~3天。。T/create/edit/?eid=6034396&sid=6247400&secid=64.3病理學(xué)診斷。4.4應(yīng)用現(xiàn)代免疫學(xué)(CCV膠體金檢測試紙)診斷將未開封的試紙卡和檢測樣品恢復(fù)至室溫；將試紙卡水平放置，用滴管向試紙卡孔緩慢逐滴4.5分子生物學(xué)技術(shù)(RT-PCR病毒基因檢測)4.5.1檢測試劑和儀器GBT682標(biāo)準(zhǔn)的滅菌雙蒸水或超純水。保存)、氯仿(4℃預(yù)冷)、異丙醇(4℃預(yù)冷)、75%乙醇(用新開啟的無水乙醇和DEPC水配制，－20℃預(yù)冷)、DEPC水(1000mL雙蒸水中加入1mLDEPC，室溫下持續(xù)攪拌過夜，121℃高壓滅菌25min)、RNA酶抑制劑(40U/μL)、TaqDNA聚合酶(5U/μL)、dNTP(2.5mmol/L)、AMV反轉(zhuǎn)錄酶(5U/μL)、三-乙酸電泳緩沖液、溴化乙錠、DL2000DNAMarker。本規(guī)范中使用的設(shè)備：PCR擴增儀，高速冷凍離心機，核酸電泳儀和水平電泳槽，組織均漿機或研成像系統(tǒng)、微量移液器。待檢。_________________________________TCCAGATATGTAATGTTCGG-3