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生活飲用水
微生物指標(biāo)檢驗(yàn)***疾病預(yù)防控制中心yxf生活飲用水中微生物指標(biāo)項(xiàng)目單位限值說明總大腸菌群MPN/100mL或CFU/100mL不得檢出一般性污染耐熱大腸菌群MPN/100mL或CFU/100mL不得檢出指示糞便污染大腸埃希氏菌MPN/100mL或CFU/100mL不得檢出指示糞便污染菌落總數(shù)CFU/mL100一般性污染賈第鞭毛蟲個(gè)/10L<1腸道原蟲隱孢子蟲個(gè)/10L<1腸道原蟲微生物指標(biāo)常規(guī)檢驗(yàn)流程水樣總大腸菌群菌落總數(shù)報(bào)告報(bào)告陰耐熱大腸菌群或大腸埃希氏菌陽(yáng)報(bào)告菌落總數(shù)定義:是指水樣在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上有氧條件下37℃培養(yǎng)48h后,所得1mL水樣所含菌落的總數(shù)。培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)瓊脂設(shè)備:放大鏡/菌落計(jì)數(shù)器菌落總數(shù)平板計(jì)數(shù)法總大腸菌群檢測(cè)方法多管發(fā)酵法濾膜法酶底物法15管法檢測(cè)步驟在36℃下培養(yǎng)24h10ml水樣1ml水樣0.1ml水樣10ml雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣判陰性產(chǎn)酸產(chǎn)氣管EMB染色鏡檢乳糖蛋白胨培養(yǎng)液革蘭氏陰性無芽孢桿菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣判總大腸菌群存在典型特征菌落在36℃下培養(yǎng)24h10ml雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣產(chǎn)酸產(chǎn)氣管EMB染色鏡檢革蘭氏陰性無芽孢桿菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣典型特征菌落多管發(fā)酵法結(jié)果大腸菌群在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上的典型菌落特征大腸菌群革蘭氏染色顯微鏡下的形態(tài)檢測(cè)步驟過濾水樣:過濾設(shè)備顯色培養(yǎng),染色鏡檢:24h復(fù)發(fā)酵:陽(yáng)性接種,24h酶底物法
EnzymeSubstrateTest總大腸菌群酶底物法定義:
在選擇性培養(yǎng)基上能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)基呈黃色的細(xì)菌群組。培養(yǎng)基:MMO-MUG培養(yǎng)基
設(shè)備:壓膜機(jī)檢測(cè)步驟加樣:干粉培養(yǎng)基加入到100mL水樣中壓膜:專用壓膜機(jī)分裝培養(yǎng):36±1℃的培養(yǎng)24h結(jié)果判讀:24h培養(yǎng)后顏色變成黃色判斷為陽(yáng)性反應(yīng);培養(yǎng)24h后判讀,為可疑陽(yáng)性,可延長(zhǎng)培養(yǎng)到28h判讀,超過28h之后出現(xiàn)的顏色反應(yīng)不作為陽(yáng)性結(jié)果。耐熱大腸菌群檢測(cè)方法多管發(fā)酵法濾膜法多管發(fā)酵法定義:用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分開,在44.5℃仍能生長(zhǎng)的大腸菌群,稱為耐熱大腸菌群。培養(yǎng)基:
EC培養(yǎng)基伊紅美藍(lán)瓊脂設(shè)備:無特殊設(shè)備檢測(cè)步驟初發(fā)酵(同總大腸菌群),24h耐熱培養(yǎng):陽(yáng)性管接種,24h顯色培養(yǎng):陽(yáng)性管接種,24h濾膜法定義:
用孔徑為0.45μm的濾膜過濾水樣,細(xì)菌被阻留在膜上,將濾膜貼在MFC培養(yǎng)基上,44.5℃培養(yǎng)24h能形成藍(lán)色菌落的細(xì)菌為耐熱大腸菌群。培養(yǎng)基:MFC培養(yǎng)基EC培養(yǎng)基設(shè)備:過濾設(shè)備多管發(fā)酵法定義:指多管發(fā)酵法總大腸菌群陽(yáng)性,在EC-MUG培養(yǎng)基上44.5℃培養(yǎng)24±2h產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase),分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)并產(chǎn)生熒光產(chǎn)物,使培養(yǎng)基在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生藍(lán)色熒光的細(xì)菌。
培養(yǎng)基:EC-MUG培養(yǎng)基設(shè)備:紫外燈:波長(zhǎng)366nm檢測(cè)步驟初發(fā)酵(同總大腸菌群),24h耐熱顯色培養(yǎng):陽(yáng)性管接種,24h熒光觀測(cè),報(bào)告大腸埃希氏菌酶底物法檢測(cè)示意圖生活飲用水非常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目賈第蟲和隱孢子蟲檢測(cè)方法:水樣過濾---洗滌離心---免疫磁珠分離---熒光標(biāo)記和DAPI染色---顯微鏡檢查記述---結(jié)果報(bào)告在2012年成為常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目微生物指標(biāo)檢驗(yàn)方法的總結(jié)總大腸菌群三種方法比較多管發(fā)酵法濾膜法酶底物法時(shí)間24h-72h24h-48h24h-28h驗(yàn)證試驗(yàn)需要需要不需要步驟較繁鎖較簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便可操作性強(qiáng)特殊設(shè)備顯微鏡顯微鏡過濾設(shè)備壓膜機(jī)價(jià)格低低較高大腸埃希氏菌三種方法比較多
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