高二生物(基因工程的基本操作程序)

高二生物(基因工程的基本操作程序)第一頁，共十四頁，2022年，8月28日三、目的基因導入受體細胞

1、什么是轉化？

2、目的基因導入植物細胞常用的方法是什么？具體過程是怎樣的？

3、目的基因導入動物細胞常用的方法是什么？基本操作程序是怎樣的？

4、目的基因導入大腸桿菌的方法是怎樣的？鈣離子有什么作用？第二頁，共十四頁，2022年，8月28日轉化目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。三、目的基因導入受體細胞第三頁，共十四頁，2022年，8月28日1.目的基因導入植物細胞常用的方法:

農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法農桿菌的特點:a.易感染雙子葉植物和祼子植物。b.具有趨化性。c.Ti質粒上的T-DNA可轉移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體的DNA上三、目的基因導入受體細胞第四頁，共十四頁，2022年，8月28日三、目的基因導入受體細胞1.目的基因導入植物細胞農桿菌轉化法的導入過程:構建基因表達載體轉入農桿菌植物細胞導入穩(wěn)定維持和表達第五頁，共十四頁，2022年，8月28日２.目的基因導入動物細胞常用的方法:

顯微注射技術操作程序：三、目的基因導入受體細胞a.先提純含目的基因的表達載體b.從動物體內取出卵(受精卵）c.顯微注射儀進行顯微注射d.將含目的基因的受精卵移植到輸卵管或子宮中發(fā)育成新個體第六頁，共十四頁，2022年，8月28日3.目的基因導入微生物細胞原核生物的特點:繁殖快，多為單細胞，遺傳物質相對較少。大腸桿菌的轉化過程:用Ca2+處理細胞增加細胞壁的透性，與細胞膜無關三、目的基因導入受體細胞→感受態(tài)細胞重組表達載體DNA分子與感受態(tài)細胞混合感受態(tài)細胞吸收DNA分子第七頁，共十四頁，2022年，8月28日四、目的基因的檢測與鑒定1、導入目的基因后需要檢測哪些方面？各采取什么方法？2、什么是DNA分子探針？檢測時的DNA探針通過什么原理來檢測目的基因和相應的mRNA？3、利用抗體－抗原雜交檢測的原理是什么？第八頁，共十四頁，2022年，8月28日1.目的基因是否插入受體細胞染色體的DNA上目的基因的檢測內容和方法檢測方法:DNA分子雜交技術DNA探針：用放射性同位素等作標記的含有目的基因的DNA片段。四、目的基因的檢測與鑒定第九頁，共十四頁，2022年，8月28日2.目的基因是否轉錄出mRNA目的基因的檢測內容和方法檢測方法:分子雜交技術用DNA探針與mRNA雜交。四、目的基因的檢測與鑒定第十頁，共十四頁，2022年，8月28日目的基因的檢測內容和方法檢測方法:抗原—抗體雜交3.目的基因是否翻譯出蛋白質四、目的基因的檢測與鑒定第十一頁，共十四頁，2022年，8月28日4、個體生物學水平的鑒定四、目的基因的檢測與鑒定第十二頁，共十四頁，2022年，8月28日β—珠蛋白是動物血紅蛋白的重要組成成分，當它的成分異常時，動物可能患某種疾病，如鐮刀型細胞貧血癥，假如讓你用基因工程的方法使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的β—珠蛋白，想一想，應該如何設計？思考與探究第十三頁，共十四頁，2022年，8月28日思考與探究1.從小鼠中克隆出β—珠蛋白基因的編碼序列（CDNA）。2.將cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動子，另外加上抗四環(huán)素的基因，構建成一個表達載體。3.將表達載體導入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達載體未進入大腸桿菌中，大腸桿菌會因不含有抗四環(huán)素基因而死掉；如果培養(yǎng)基上長出了大腸桿菌