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微生物生理的學(xué)習(xí)課件第1頁(yè)/共79頁(yè)三、微生物生理1.微生物的營(yíng)養(yǎng)2.微生物的生長(zhǎng)3.微生物的代謝與遺傳變異第2頁(yè)/共79頁(yè)第一節(jié)微生物的營(yíng)養(yǎng)一、微生物的化學(xué)組成微生物細(xì)胞的化學(xué)成分以有機(jī)物和無(wú)機(jī)物兩種形式存在。有機(jī)物包含蛋白質(zhì)、核酸、類(lèi)脂和糖類(lèi),占細(xì)胞干重的99%,無(wú)機(jī)物包含各種離子,占干重1%。①C、H、O、N、P、S等元素,含量相對(duì)較多,占97%②K、Mg、Mn、Ca、Fe等,含量較少,占2%③Co、Cu、Zn、Mo、Ni等,為微量元素,占1%微生物所含十大元素為:C、O、H、N、S、P、K、Fe、Ca、Mg第3頁(yè)/共79頁(yè)生物物質(zhì)的分類(lèi):1.多糖類(lèi)物質(zhì)2.蛋白質(zhì)3.核酸4.脂肪5.其它化合物6.水第4頁(yè)/共79頁(yè)二、微生物的營(yíng)養(yǎng)需求1.碳源在微生物生長(zhǎng)過(guò)程中為微生物提供碳素來(lái)源的物質(zhì)為碳源。注:大多數(shù)細(xì)菌,所有放線菌和真菌是以有機(jī)碳化合物作為碳源。微生物利用碳源極廣,從簡(jiǎn)單無(wú)機(jī)碳化合物到復(fù)雜有機(jī)碳化合物都能被微生物所利用。最好的碳源是葡萄糖、果糖、蔗糖、麥芽糖和淀粉;其次是有機(jī)酸、醇和脂類(lèi)。注:?jiǎn)翁莾?yōu)于雙糖;己糖優(yōu)于戊糖;淀粉優(yōu)于纖維素。第5頁(yè)/共79頁(yè)自養(yǎng)型微生物只能利用co2或碳酸鹽為唯一碳源,所需能源來(lái)自光能或無(wú)機(jī)物氧化過(guò)程中釋放的化學(xué)能??梢愿鶕?jù)微生物對(duì)碳源的利用情況作為分類(lèi)的依據(jù)。第6頁(yè)/共79頁(yè)2.氮源凡是可以被微生物用來(lái)構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)的或代謝產(chǎn)物中氮素來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為氮源。氮源一般不提供能量注:微生物對(duì)氮源的利用具有選擇性。在自然界中,從分子態(tài)氮到復(fù)雜有機(jī)含氮化合物均可作為氮源。如:尿素、蛋白質(zhì)等及其降解物。第7頁(yè)/共79頁(yè)3.無(wú)機(jī)鹽P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe、Ni、Co、Cu、Mn等。濃度在10-4~10-3mol/L的為大量元素,如:P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe等;濃度在10-8~10-6mol/L的為微量元素,如:Ni、Co、Cu、Mn、Mo、Zn等。第8頁(yè)/共79頁(yè)生理功能:1.提供微生物細(xì)胞化學(xué)組成中的重要元素,如P和S分別為核酸和含硫氨基酸的重要組成元素2.參與并穩(wěn)定微生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu),如P參與磷脂雙分子層,Mg有穩(wěn)定核糖體和細(xì)胞膜的作用3.與酶的組成和活力有關(guān),如Fe是細(xì)胞色素氧化酶的必要組分,Cu、Zn是許多酶的激活劑4.調(diào)節(jié)和維持微生物生長(zhǎng)過(guò)程中諸如滲透壓、氫離子濃度和氧化還原電位等生長(zhǎng)條件5.可作為某些化能自養(yǎng)細(xì)菌的能源物質(zhì)6.可作為呼吸鏈末端的氫受體第9頁(yè)/共79頁(yè)4.生長(zhǎng)因子(在培養(yǎng)基補(bǔ)充的微量有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì))生長(zhǎng)因子包括:維生素、嘌呤與嘧啶三大類(lèi)。主要作用:作為酶的輔基或輔酶參與新陳代謝。第10頁(yè)/共79頁(yè)5.水ⅰ.水是微生物細(xì)胞的主要化學(xué)成分,是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝的良好溶劑,是細(xì)胞中各種生化反應(yīng)的介質(zhì)。ⅱ.水比熱容高,良好導(dǎo)體,維持恒溫,且有利于生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。ⅲ.微生物生長(zhǎng)的環(huán)境中水的有效性常以水活動(dòng)值表示(αw)指一定壓力下,溶液蒸氣壓力與同樣條件下純水蒸氣壓力之比,即αw=Pw/PwO式中:Pw-溶液蒸氣壓力PwO-純水蒸氣壓力純水αw=1.00,溶液中溶質(zhì)越多,αw越小,微生物一般在αw為0.60~0.99條件下生長(zhǎng)。第11頁(yè)/共79頁(yè)幾類(lèi)微生物生長(zhǎng)最適αw:一般細(xì)菌αw=0.91;酵母菌αw=0.88;霉菌αw=0.80;嗜鹽細(xì)菌αw=0.76;嗜鹽真菌αw=0.65;嗜高滲酵母αw=0.60第12頁(yè)/共79頁(yè)三、微生物的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型能源氫供體基本碳源微生物舉例光能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)(光能自養(yǎng)型)光無(wú)機(jī)物二氧化碳藍(lán)細(xì)菌、綠色硫細(xì)菌、藻類(lèi)光能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)(光能異養(yǎng)型)光有機(jī)物二氧化碳及簡(jiǎn)單有機(jī)物紫色非硫細(xì)菌化能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)(化能自養(yǎng)型)無(wú)機(jī)物無(wú)機(jī)物二氧化碳硝化細(xì)菌、氫細(xì)菌、硫化細(xì)菌化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)(化能異養(yǎng)型)有機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物多數(shù)細(xì)菌、全部真菌、全部放線菌、全部原生動(dòng)物第13頁(yè)/共79頁(yè)1.光能自養(yǎng)型利用光作為能源,以二氧化碳作為基本碳源,以某些還原態(tài)的無(wú)機(jī)化合物(水、硫化氫等)作為供氫體還原二氧化碳的微生物。

光合作用還原劑可為H2O、H2S、Na2S2SO3、CH3CH2OH等藻類(lèi)、藍(lán)細(xì)菌:光能

CO2+H2O[CH2O]+O2

葉綠素第14頁(yè)/共79頁(yè)光合細(xì)菌:光能

CO2+2H2S[CH2O]+H2O+2S

菌綠素(厭氧)綠色硫細(xì)菌、紫色硫細(xì)菌光能自養(yǎng)型生物生命活動(dòng)受到環(huán)境中供氧水平、CO2、無(wú)機(jī)氮、S、磷化合物、微量元素濃度、光照強(qiáng)度、滲透壓、pH值等條件的控制。第15頁(yè)/共79頁(yè)2.化能自養(yǎng)型(細(xì)菌)

以二氧化碳為碳源,利用無(wú)機(jī)化合物如銨、亞硝酸鹽、硫化氫、鐵離子等氧化過(guò)程中釋放出的能量進(jìn)行生長(zhǎng)的微生物。

主要類(lèi)群有:硫細(xì)菌、硝化細(xì)菌、鐵細(xì)菌等。它們的生長(zhǎng)需要在有氧條件下進(jìn)行。產(chǎn)甲烷菌大多能自養(yǎng)生活,它們以氫氣作為能源,以二氧化碳作為碳源生長(zhǎng),產(chǎn)物是甲烷,我們稱之為厭氧化能自養(yǎng)細(xì)菌。

化能自養(yǎng)菌的能源物質(zhì)有還原態(tài)的硫和氮化合物、Fe2+、氫及甲烷、甲醇等一碳化合物。以CO2為主要碳源,能氧化NH3、H2S等無(wú)機(jī)物。此類(lèi)微生物類(lèi)群有:硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、氫細(xì)菌與鐵細(xì)菌。第16頁(yè)/共79頁(yè)3.光能異養(yǎng)型(紅螺屬)

以光為能源,以有機(jī)碳化合物(甲酸、乙酸、甲醇、異丙醇等)作為碳源和氫供體進(jìn)行光合作用而生長(zhǎng)繁殖的微生物。它們需要有機(jī)化合物,所以不同于利用無(wú)機(jī)化合物二氧化碳作為唯一碳源的自養(yǎng)型光合細(xì)菌。

注:用此類(lèi)生物處理高濃度有機(jī)廢水效果好。第17頁(yè)/共79頁(yè)4.化能異養(yǎng)型(多數(shù)細(xì)菌、全部真菌、全部放線菌、全部原生動(dòng)物)它們以有機(jī)碳化合物作為碳源和能源。如果微生物的食物是來(lái)自死亡或腐爛的動(dòng)植物尸體,就稱其為腐生微生物。如果其生長(zhǎng)必須從活細(xì)胞或組織中獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的,則稱之為寄生微生物,例如病毒、衣原體、立克次氏體等。有些微生物是腐生、寄生兼而有之,例如結(jié)核桿菌就是一種以腐生為主,兼營(yíng)寄生的細(xì)菌。

注:是自然環(huán)境中有機(jī)污染物最重要的凈化者第18頁(yè)/共79頁(yè)四、微生物的培養(yǎng)基培養(yǎng)基是人工配制的適合于不同微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。無(wú)論是以微生物為材料的研究,還是利用微生物生產(chǎn)生物制品,都必須進(jìn)行培養(yǎng)基的配制,它是微生物學(xué)研究和微生物發(fā)酵生產(chǎn)的基礎(chǔ)。第19頁(yè)/共79頁(yè)1.配制培養(yǎng)的原則①根據(jù)各種微生物的營(yíng)養(yǎng)需要,配置不同的培養(yǎng)基;②各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及配比要適當(dāng);第20頁(yè)/共79頁(yè)③理化條件要適宜;控制pH值:一般細(xì)菌和放線菌適于在pH值為7.0~7.5范圍生長(zhǎng),而酵母菌和霉菌在pH值為4.5~6.0范圍內(nèi)生長(zhǎng)。為了維持培養(yǎng)基中pH值相對(duì)穩(wěn)定,應(yīng)加入緩沖劑,常用的緩沖劑有K2HPO4和KH2PO4。乳酸菌大量產(chǎn)酸,緩沖系統(tǒng)難以起作用,可加CaCO3加以調(diào)節(jié)。第21頁(yè)/共79頁(yè)控制氧化還原電位(Φ):好養(yǎng)性微生物Φ>+0.1V,0.3~0.4V為宜。厭氧性微生物Φ<+0.1V兼性厭氧微生物在+0.1V以上時(shí)為好養(yǎng)呼吸,在+0.1V以下為厭氧呼吸。在pH值相對(duì)穩(wěn)定條件下:ⅰ.增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加Φ值;ⅱ.在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、H2S等還原性物質(zhì)降低Φ值;第22頁(yè)/共79頁(yè)④應(yīng)用價(jià)格低廉、來(lái)源豐富的原料;⑤培養(yǎng)基應(yīng)無(wú)菌。高壓蒸氣滅菌,1.05㎏/㎝2,121.3℃,15~30min(20分鐘左右最佳)注:在配制培養(yǎng)基過(guò)程中,泡沫的存在對(duì)滅菌不利,因泡沫中的空氣形成隔熱層,使泡沫中微生物難以被殺死。因而應(yīng)加入消泡劑減少泡沫的產(chǎn)生,或適當(dāng)提高滅菌溫度。第23頁(yè)/共79頁(yè)2.培養(yǎng)基的類(lèi)型①按培養(yǎng)基組分來(lái)源分:天然培養(yǎng)基:細(xì)菌培養(yǎng)基(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)合成培養(yǎng)基:放線菌培養(yǎng)基(高氏1號(hào)培養(yǎng)基)②按物理狀態(tài)分:液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。瓊脂熔點(diǎn)、凝固點(diǎn)、pH第24頁(yè)/共79頁(yè)③按用途分:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、

鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基④按生產(chǎn)目的分:種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)第25頁(yè)/共79頁(yè)Ⅰ.當(dāng)新陳代謝中同化作用的速度超過(guò)異化作用時(shí),細(xì)胞原生質(zhì)總量不斷增加,體積不斷增大,這種現(xiàn)象為生長(zhǎng)。Ⅱ.但單細(xì)胞微生物生長(zhǎng)到一定程度時(shí),母細(xì)胞開(kāi)始分裂,形成兩個(gè)基本相同的子細(xì)胞,導(dǎo)致微生物個(gè)體數(shù)目的增加,稱為繁殖。注:微生物生長(zhǎng)情況可通過(guò)測(cè)定單位時(shí)間里微生物數(shù)量的變化來(lái)評(píng)價(jià)。通過(guò)測(cè)定數(shù)量可以評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響,或客觀地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律。第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)第26頁(yè)/共79頁(yè)一、微生物生長(zhǎng)的測(cè)量1.測(cè)定微生物的總數(shù)①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法:(包括活菌和死菌)用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)器或血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)。(常用于酵母菌)具體方法如下:載玻片制成計(jì)數(shù)板,上有一個(gè)1mm×1mm×1mm的計(jì)數(shù)室。在1mm2面積里刻劃25個(gè)(或16個(gè))中格,每個(gè)中格劃分成16個(gè)(或25個(gè))小格,計(jì)數(shù)室都是由400個(gè)小格組成。將稀釋樣品滴在計(jì)數(shù)板上,蓋上蓋玻片,計(jì)算4~5個(gè)小格細(xì)菌數(shù),取平均值。每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)=每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×1000×稀釋倍數(shù)第27頁(yè)/共79頁(yè)②比濁法原理:在一定濃度范圍內(nèi),菌懸液的微生物細(xì)胞濃度與渾濁度成正比,即與光密度成正比,與透光度成反比。菌數(shù)越多,光密度越大,透光量越低。因而可借助分光光度計(jì),在一定波長(zhǎng)下,測(cè)定菌懸液的光密度。

由于細(xì)胞濃度盡在一定范圍內(nèi)與光密度成直線,因此待測(cè)均懸液的細(xì)胞濃度不易過(guò)高或過(guò)低,培養(yǎng)液的色調(diào)不易過(guò)深,顆粒性雜質(zhì)盡量減少。

注意:比濁法常用于觀察和控制在培養(yǎng)過(guò)程中微生物菌數(shù)的消長(zhǎng)情況,如細(xì)菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定和發(fā)酵罐中細(xì)菌生長(zhǎng)量的控制等第28頁(yè)/共79頁(yè)③Coulter計(jì)數(shù)法:利用細(xì)胞通過(guò)微孔時(shí)引起電流脈沖自動(dòng)計(jì)數(shù)。④膜過(guò)濾法:適用于細(xì)胞總數(shù)小于106個(gè)/ml情況第29頁(yè)/共79頁(yè)2.測(cè)定活菌總數(shù)通?;罹?jì)數(shù)是通過(guò)活的細(xì)胞在有利條件下產(chǎn)生出的菌落數(shù)來(lái)確定的。一個(gè)菌落通常由一個(gè)菌體生成。①平板計(jì)數(shù)法(準(zhǔn)確,但所需時(shí)間長(zhǎng))第30頁(yè)/共79頁(yè)②薄膜過(guò)濾計(jì)數(shù)法(適用于檢測(cè)含菌量很少的液態(tài)樣品)以上兩種方法具體操作如下:

將待測(cè)樣品經(jīng)一系列10倍稀釋,然后選擇三個(gè)平行樣0.2mL放入無(wú)菌平皿,再倒入已熔化并冷至45℃左右的培養(yǎng)基,與菌液混勻,冷卻、待凝固后,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)每毫升原菌液活菌數(shù)=統(tǒng)一稀釋度三個(gè)以上重復(fù)平皿菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)×5③最近似法(常用于食品和水的衛(wèi)生檢測(cè))第31頁(yè)/共79頁(yè)3.測(cè)定細(xì)胞物質(zhì)量①稱量法:離心或過(guò)濾后收取菌體于105℃烘干測(cè)出干重②含N測(cè)定法:蛋白質(zhì)含氮量占16%,細(xì)菌中蛋白質(zhì)含量占細(xì)菌的50%~80%一般取65%

細(xì)菌總量=(含氮量÷16%)÷65%=蛋白質(zhì)總量×1.54③DNA測(cè)定法第32頁(yè)/共79頁(yè)二、微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律1.細(xì)菌的生長(zhǎng)個(gè)體生長(zhǎng):微生物個(gè)體小,不容易研究。個(gè)體生長(zhǎng)包括:細(xì)胞結(jié)構(gòu)的復(fù)制與再生;細(xì)胞的分裂與控制;DNA的復(fù)制和分離。培養(yǎng)方法:連續(xù)培養(yǎng)、分批培養(yǎng)第33頁(yè)/共79頁(yè)①連續(xù)培養(yǎng):在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間,通過(guò)一定的方式使微生物能以恒定速率生長(zhǎng)并持續(xù)下去的一種培養(yǎng)方法。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和代謝產(chǎn)物的積累是導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)停止的原因。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中不斷的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物是實(shí)現(xiàn)微生物連續(xù)培養(yǎng)的基本原則。第34頁(yè)/共79頁(yè)②分批培養(yǎng):將少量的微生物接種到一定體積的新鮮液體培養(yǎng)基中,在適宜條件下,微生物生長(zhǎng)、繁殖。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越來(lái)越少,而代謝產(chǎn)物不斷積累,直到最后養(yǎng)分耗盡導(dǎo)致生長(zhǎng)停止和機(jī)體的死亡。第35頁(yè)/共79頁(yè)2.細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(以細(xì)菌純種培養(yǎng)為例)將少量細(xì)菌接種到一定量的新鮮液體培養(yǎng)基中,在適宜的條件下培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)菌數(shù)目,以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以細(xì)菌數(shù)目對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),繪制成曲線圖,即為細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。第36頁(yè)/共79頁(yè)①延遲期產(chǎn)生原因:微生物接種到新環(huán)境中,暫時(shí)缺乏足夠能量和必需生長(zhǎng)因子;“種子”老化或未充分活化,接種時(shí)造成損傷等。特點(diǎn):不立即分裂、細(xì)菌數(shù)目維持恒定,可能減少,但個(gè)體較大,RNA和蛋白質(zhì)含量增加,易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶,細(xì)胞內(nèi)合成代謝活躍,對(duì)外界不良環(huán)境抵抗力有所下降。延遲期長(zhǎng)短隨菌種特性、接種量、菌齡和培養(yǎng)條件的不同而不同。第37頁(yè)/共79頁(yè)采取如下措施縮短延遲期:ⅰ.通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使之縮短;ⅱ.利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞作為種子;ⅲ.調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的理化性質(zhì),接種前后培養(yǎng)基成分不要相差太大;ⅳ.擴(kuò)大接種量使之縮短。第38頁(yè)/共79頁(yè)②對(duì)數(shù)期(獲取菌種和科研材料)特點(diǎn):以最大速率分裂(分裂最快)、個(gè)體整齊、健壯、代謝作用旺盛,酶活性高而穩(wěn)定,大小一致,生活力強(qiáng),廣泛地在生產(chǎn)上作“種子”和在科研上作為理想試驗(yàn)材料。第39頁(yè)/共79頁(yè)③穩(wěn)定期(發(fā)酵產(chǎn)物的最佳收獲期)特點(diǎn):細(xì)胞由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗、代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化,繁殖速度逐漸下降,細(xì)胞死亡數(shù)目逐漸上升,當(dāng)細(xì)胞繁殖增加數(shù)目和死亡數(shù)目相等時(shí),生物群體達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,細(xì)菌數(shù)目不在增加,這時(shí)細(xì)菌總數(shù)達(dá)到最大值并恒定一段時(shí)間。

備注:可通過(guò)連續(xù)培養(yǎng)來(lái)延長(zhǎng)穩(wěn)定期在此階段,細(xì)菌存儲(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物。穩(wěn)定期的長(zhǎng)短與菌種和環(huán)境條件有關(guān)第40頁(yè)/共79頁(yè)④衰亡期(內(nèi)源呼吸階段或內(nèi)源代謝階段)特點(diǎn):由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏,代謝產(chǎn)物和有毒物質(zhì)的積累,細(xì)胞分裂由緩慢而停止,細(xì)胞死亡率增加。第41頁(yè)/共79頁(yè)3.理化因子對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響①溫度最適溫度、最低溫度、最高溫度、致死溫度(10min)嗜冷菌、嗜中溫菌、嗜熱菌、嗜超熱菌②pH值(4.0~9.0)不同微生物要求不同微生物代謝活動(dòng)會(huì)改變環(huán)境pH值,所以培養(yǎng)基中往往需要加入緩沖劑

③氧好氧、厭氧、兼性好氧等三大群微生物。第42頁(yè)/共79頁(yè)4.消毒與滅菌兩者概念①物理法a.干熱滅菌火焰燒灼滅菌干熱滅菌b.濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌應(yīng)用廣泛,缺點(diǎn)常壓蒸汽滅菌第43頁(yè)/共79頁(yè)c.消毒巴氏消毒法煮沸消毒法d.紫外線滅菌空氣消毒表面消毒第44頁(yè)/共79頁(yè)②化學(xué)法消毒劑具備的條件作用機(jī)理典型事例第45頁(yè)/共79頁(yè)第三節(jié)微生物的代謝與遺傳變異一、微生物的代謝(同化作用和異化作用)Ⅰ.新陳代謝:活細(xì)胞中進(jìn)行的所有生化反應(yīng)的總稱。Ⅱ.同化作用(合成代謝):微生物把從環(huán)境中攝取的物質(zhì),經(jīng)一系列的生物化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)樽陨砦镔|(zhì)的過(guò)程。儲(chǔ)存能量Ⅲ.異化作用(分解代謝):微生物將自身的各種復(fù)雜有機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)楹?jiǎn)單化合物的過(guò)程。釋放能量第46頁(yè)/共79頁(yè)分解代謝分為三個(gè)階段:第一階段:將蛋白質(zhì)、多糖及脂類(lèi)等大分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)降解為氨基酸、單糖及脂肪酸等小分子物質(zhì)。第二階段:將氨基酸、單糖及脂肪酸進(jìn)一步降解為更簡(jiǎn)單的丙酮酸及進(jìn)入三羧酸循環(huán)的某些中間產(chǎn)物,產(chǎn)生ATP、NADH、FADH2。第三階段:通過(guò)TCA循環(huán)將以上產(chǎn)物完全降解為CO2、并產(chǎn)生ATP、NADH、FADH2。

通過(guò)電子傳遞鏈被氧化,產(chǎn)生大量ATP第47頁(yè)/共79頁(yè)1.酶(活細(xì)胞內(nèi)合成的生物催化劑)各種污水和固體廢物的生物處理,實(shí)際上就是利用處理系統(tǒng)中的微生物,將污水中的各種污染物代謝、分解、從而凈化水體。微生物降解污染物是通過(guò)一系列生化反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的,這些反應(yīng)必須在各種酶的催化下才能完成。⑴酶催化特征催化效率高酶催化活性易受環(huán)境變化的影響酶催化作用具有高度專一性酶催化活性可被調(diào)節(jié)控制第48頁(yè)/共79頁(yè)⑵酶的分類(lèi)a.按酶蛋白的分子組成:?jiǎn)蚊负腿竼蚊钢缓鞍踪|(zhì);全酶由酶蛋白和非蛋白質(zhì)的輔助因子組成。與酶蛋白結(jié)合較緊的輔助因子叫輔基;與酶蛋白結(jié)合較松的輔助因子叫輔酶。酶蛋白的作用:加速生物化學(xué)反應(yīng)輔基、輔酶的作用:起傳遞電子、原子、化學(xué)基團(tuán)的作用。第49頁(yè)/共79頁(yè)b.按催化反應(yīng)的類(lèi)型,酶分為六類(lèi)①氧化還原酶類(lèi):催化底物氧化還原的酶;氧化酶類(lèi)脫氫酶類(lèi)②轉(zhuǎn)移酶類(lèi):催化底物的基團(tuán)轉(zhuǎn)移到另一有機(jī)物上的酶;③水解酶類(lèi):催化大分子有機(jī)物水解反應(yīng)的酶;④裂解酶類(lèi):催化有機(jī)物裂解為小分子有機(jī)物的酶;⑤異構(gòu)酶類(lèi):催化同分異構(gòu)分子內(nèi)的基團(tuán)重新排列的酶;⑥合成酶類(lèi):催化底物的合成反應(yīng)。第50頁(yè)/共79頁(yè)c.按酶存在于細(xì)胞的不同部位可分為胞內(nèi)酶和胞外酶胞內(nèi)酶:固定在細(xì)胞內(nèi)部不能向外分泌的酶胞外酶:少數(shù)可分泌到細(xì)胞外的酶,如纖維素、蛋白、淀粉、脂肪水解酶第51頁(yè)/共79頁(yè)d.結(jié)構(gòu)酶和誘導(dǎo)酶結(jié)構(gòu)酶(固有酶):絕大多數(shù)酶存在于細(xì)胞中的一定部位,推動(dòng)細(xì)胞的物質(zhì)變化誘導(dǎo)酶:并非細(xì)胞固有,但在一定條件下可誘導(dǎo)產(chǎn)生。馴化作用第52頁(yè)/共79頁(yè)⑶影響酶促反應(yīng)的因素凡在酶參與下發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)均為酶促反應(yīng)酶濃度見(jiàn)圖底物濃度見(jiàn)圖溫度:中溫(25~60℃),溫度增加10℃,反應(yīng)速度提高1~2倍pH值:一般在6~8酶的抑制劑:凡能減弱、抑制甚至破壞酶活性的物質(zhì);酶的激活劑:凡能加強(qiáng)、提高酶活性的物質(zhì);(無(wú)機(jī)陽(yáng)離子、無(wú)機(jī)陰離子和有機(jī)化合物)第53頁(yè)/共79頁(yè)2.微生物的呼吸作用與產(chǎn)能代謝實(shí)質(zhì):細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的分解、氧化和釋放能量的過(guò)程,是新陳代謝的異化作用。在呼吸過(guò)程中,釋放的能量主要儲(chǔ)存扎起ATP中,未被儲(chǔ)存的能量則以熱量的形式散發(fā)掉。備注:ATP是能量庫(kù),ADP是能量載體。根據(jù)受氫過(guò)程中最終氫受體性質(zhì)的不同,呼吸類(lèi)型分為發(fā)酵、有氧呼吸和無(wú)氧呼吸。第54頁(yè)/共79頁(yè)⑴發(fā)酵(厭氧或兼性厭氧微生物在缺氧條件下獲得能量的方式)發(fā)酵是指在厭氧條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的H+不經(jīng)過(guò)呼吸鏈而直接交給中間代謝產(chǎn)物的一類(lèi)低效產(chǎn)能反應(yīng),一般以有機(jī)物作為最終電子受體??砂l(fā)酵的底物有糖類(lèi)、有機(jī)酸、氨基酸,葡萄糖最為重要第55頁(yè)/共79頁(yè)糖酵解:生物體內(nèi)葡萄糖被降解成為丙酮酸的過(guò)程途徑包括:EMP、HMP、ED、磷酸降酮酶等糖酵解途徑(EMP)可分為兩個(gè)階段:第一階段:生成兩分子中間代謝產(chǎn)物甘油醛-3-磷酸第二階段:合成ATP并形成兩分子丙酮酸C6H12O6+2ATP+2Pi+2NAD+CH3COCOOH+2ATP+2NADH+2H+第56頁(yè)/共79頁(yè)發(fā)酵類(lèi)型:1.乙醇發(fā)酵(酵母菌)根酶、曲霉和某些細(xì)菌C6H12O6+2ADP+2H3PO4

2C2H5OH+2ATP+2CO2+2H2O2.乳酸發(fā)酵(乳酸細(xì)菌和某些芽孢桿菌)C6H12O6+2ADP2C3H6O3+2ATP+2H2O3.丁酸發(fā)酵(某些專性厭氧菌)第57頁(yè)/共79頁(yè)⑵有氧呼吸(以O(shè)2作為最終電子受體)產(chǎn)能效率高有氧呼吸:以分子態(tài)氧(O2)作為最終電子受體,將底物全部氧化成CO2和H2O,并產(chǎn)生ATP的呼吸作用。以葡萄糖為例:1.在微生物有氧呼吸過(guò)程中,葡萄糖先經(jīng)過(guò)EMP途徑降解為丙酮酸;2.丙酮酸經(jīng)氧化脫羧生成乙酰輔酶A(CoA);3.CoA經(jīng)TCA循環(huán)被徹底氧化成CO2和H2O。C6H12O6+6O2+38H3PO46CO2+6H2O+38ATP第58頁(yè)/共79頁(yè)有養(yǎng)呼吸可分為:外源性呼吸:利用外界供給的能源進(jìn)行呼吸;內(nèi)源性呼吸:利用自身內(nèi)部貯存的能源物質(zhì)進(jìn)行呼吸;有氧呼吸能否進(jìn)行,取決于氧的濃度能否達(dá)到0.2%,當(dāng)氧濃度低于0.2%,有氧呼吸不能發(fā)生。第59頁(yè)/共79頁(yè)⑶無(wú)氧呼吸(以氧化型化合物作為電子受體)

厭氧或兼性厭氧微生物在無(wú)氧條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸。以NO3-作為最終電子受體(假單胞菌屬和某些芽孢桿菌屬);以SO4-作為最終電子受體(普通脫硫弧菌);以CO2和CO作為最終電子受體(產(chǎn)甲烷菌)。第60頁(yè)/共79頁(yè)二、微生物的遺傳變異遺傳性:在適宜的環(huán)境條件下,通過(guò)代謝和發(fā)育使其后代轉(zhuǎn)化為與親代相同的具體形狀。遺傳型:生物體所攜帶的全部遺傳因子或基因的總稱。遺傳:生物產(chǎn)生與自己相似的后代的現(xiàn)象。變異:生物的親代與子代之間,或子代各個(gè)體之間,無(wú)論在形態(tài)結(jié)構(gòu)或生理機(jī)能方面的差異現(xiàn)象。注:①遺傳是相對(duì)的,變異是絕對(duì)的②只有遺傳型的改變,即生物體遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)上發(fā)生的變化,才稱為變異。第61頁(yè)/共79頁(yè)1.遺傳與變異的物質(zhì)基礎(chǔ)微生物的遺傳物質(zhì)主要是DNA,少數(shù)病毒為RNA。a.DNA是由大量脫氧核糖核苷酸組成的線狀或環(huán)狀大分子,每個(gè)脫氧核糖核苷酸由一個(gè)脫氧核糖、磷酸和一種堿基(A、T、C、G)構(gòu)成。

DNA的可變部分是它的堿基順序,堿基攜帶遺傳信息DNA的復(fù)制是以原來(lái)的DNA鏈為模板,底物脫氧核糖核苷酸上的堿基和模板DNA分子上裸露的堿基之間互補(bǔ)配對(duì)(A-T,C-G),以決定哪種核苷酸加入到新合成的DNA鏈。(半保留復(fù)制)第62頁(yè)/共79頁(yè)b.基因:在生物體內(nèi),一切具有自我復(fù)制能力的遺傳功能單位,它的物質(zhì)基礎(chǔ)為一個(gè)具有特定核苷酸順序的核酸片斷。一個(gè)基因分子量約為6.7×105,即含1000對(duì)核苷酸,每個(gè)細(xì)菌一般含有5000~10000個(gè)基因。c.遺傳密碼DNA鏈上特定核甘酸排列順序第63頁(yè)/共79頁(yè)2.基因突變(生物體內(nèi)遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)突然發(fā)生的可遺傳的變化)⑴基因突變的特點(diǎn)自發(fā)性稀有性:10-6~10-9不對(duì)應(yīng)性:突變性狀與引起突變?cè)蛑g無(wú)直接對(duì)應(yīng)關(guān)系。如:①細(xì)菌在青霉素的環(huán)境下,出現(xiàn)了抗青霉素的突變體;

②在紫外線的作用下,出現(xiàn)了抗紫外線的突變體,在較高的培養(yǎng)溫度下,出現(xiàn)了耐高溫的突變體。第64頁(yè)/共79頁(yè)誘變性:誘變劑(提高突變率作用)可提高10~105倍穩(wěn)定性獨(dú)立性可逆性:回復(fù)突變、正向突變第65頁(yè)/共79頁(yè)⑵基因突變的類(lèi)型自發(fā)突變:誘發(fā)突變:利用物理或化學(xué)因素,處理微生物群體,促使個(gè)體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,基因內(nèi)部堿基配對(duì)發(fā)生差錯(cuò),從而引起微生物的遺傳性狀發(fā)生變異。第66頁(yè)/共79頁(yè)誘變:ⅰ.物理誘變:紫外線、Χ射線、γ射線、激光ⅱ.化學(xué)誘變:亞硝酸、硫酸二乙酯、甲基磺酸乙酯ⅲ.定向培育(馴化)(污水處理系統(tǒng)中用來(lái)培育菌種)原理過(guò)程第67頁(yè)/共79頁(yè)3.基因重組凡把兩個(gè)不同性狀個(gè)體內(nèi)的遺傳基因轉(zhuǎn)移到一起,使基因重組,形成新的遺傳個(gè)體的方式。包括:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、

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