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文檔簡介
尿液葡萄糖酮體及其他化學檢查第1頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
生理情況下,原尿中的葡萄糖可被腎小管和集合管全部被重吸收進入血液。所以正常人尿液中幾乎不含或僅含微量葡萄糖,一般尿糖定性試驗為陰性。當機體發(fā)生病變,尿液中出現(xiàn)葡萄糖,葡萄糖定性試驗為陽性的尿液稱為糖尿(glucosuria)。糖尿定義第2頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
糖尿形成的原因血糖濃度腎血流量腎糖閾第3頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
尿液葡萄糖檢查方法葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法班氏還原法薄層層析法鄰甲苯胺法第4頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四
葡萄糖+H2O+O2
葡萄糖氧化酶葡萄糖酸內酯+H2O2H2O2+色原劑
過氧化物酶有色物質葡萄糖氧化酶—過氧化物酶法一、尿液葡萄糖檢查
第5頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四葡萄糖氧化酶—過氧化物酶法一、尿液葡萄糖檢查
檢測特異性強、靈敏度高、簡便快速氧化還原反應,易受尿液中的氧化劑還原劑的影響第6頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四班氏還原法一、尿液葡萄糖檢查
在高熱和強堿溶液中,葡萄糖或者其他還原性糖,能將溶液中藍色的硫酸銅還原為氫氧化亞銅沉淀,進而形成紅色的氧化亞銅沉淀。第7頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四班氏還原法一、尿液葡萄糖檢查
許多單糖和非糖還原物質都能反應,測定的是尿中總還原物。氧化還原反應,易受尿液中的氧化劑還原劑的影響。第8頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四化學物質對尿糖測定的影響成分葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法班氏還原法葡萄糖果糖尿黑酸VitC對苯甲酸過氧化氫第9頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四化學物質對尿糖測定的影響成分葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法班氏還原法葡萄糖陽性陽性果糖無反應陽性尿黑酸無反應陽性VitC可能延遲顏色反應弱陽性對苯甲酸無反應陽性過氧化氫假陽性可掩蔽陽性結果第10頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
檢測結果分析葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法陰性,班氏還原法陽性。試紙質量問題;尿液中含有較高濃度的還原性物質;存在少量葡萄糖伴有高濃度的還原物質。第11頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
檢測結果分析葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法陽性,班氏還原法陰性。尿液標本被過氧化物或者次氯酸鹽污染。第12頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
鄰甲苯胺法葡萄糖與鄰甲苯胺在強酸溶液中加熱,葡萄糖的醛基與鄰甲苯胺縮合形成葡萄糖基胺,后者脫水生成席夫堿,再經結構重排,生成有色化合物,在630nm有吸收峰。與尿液中的所有糖類發(fā)生反應。第13頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
薄層層析法在層析法中有固定相和流動相,兩相間可做相對流動。當樣品中各種糖隨流動相通過固定相時,即反復發(fā)生吸附、脫附、解析或其他親和作用,由于各種糖在上述性能上的差異而產生移動速度的差異,而相互分離。第14頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四第15頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四六種糖的Rf近似平均值糖Rf近似平均值糖Rf近似平均值乳糖0.22葡萄糖0.41麥芽糖0.28果糖0.46半乳糖0.36木糖0.52第16頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
其他糖檢驗方法果糖與溶于強酸的間苯二酚加熱后顯紅色反應。半乳糖與硝酸共熱,可被氧化為白色的粘酸結晶。戊糖與鹽酸共沸后生成糠醛,再與二羥基甲苯作用形成綠色化合物。第17頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四一、尿液葡萄糖檢查
臨床意義血糖增高性糖尿血糖正常性糖尿暫時性糖尿其他糖尿第18頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四
二、尿液酮體檢查酮體是脂肪酸在肝內氧化不完全而形成的一類中間產物的統(tǒng)稱,包含乙酰乙酸、-羥丁酸、丙酮三種成分。生理意義:肝臟向肝外(肌肉/大腦)組織輸出脂肪酸能源的有效形式。病理意義:在糖尿病或者嚴重饑餓時,肝生酮大于肝外利用,發(fā)生酮癥酸中毒。第19頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四
二、尿液酮體檢查檢測方法亞硝基鐵氰化鈉法:乙酰乙酸和丙酮與亞硝基鐵氰化鈉反應生成紫色化合物。Gerhardt法:高鐵離子與乙酰乙酸的烯醇式基團發(fā)生螯合,形成酒紅色的乙酰乙酸鐵復合物。第20頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四第21頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四檢測方法
二、尿液酮體檢查第22頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四
二、尿液酮體檢查臨床意義不能有效利用碳水化合物碳水化合物攝入不足碳水化合物丟失其他第23頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四三、尿液人絨毛膜促性腺激素檢查人絨毛膜促性腺激素(Humanchorionicgonadotrophin,hCG)是胎盤合體滋養(yǎng)層細胞產生的一種具有促進性腺發(fā)育的糖蛋白類激素。hCG分子量約為4.7萬,由α、β兩個肽鏈組成。單個亞基(肽鏈)不具有生物學活性,當其連接成完整的化合物時才具有活性。第24頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四三、尿液人絨毛膜促性腺激素檢查hCGα亞基的氨基酸數(shù)量及其排列順序與卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)和促甲狀腺激素(TSH)的亞基幾乎相同。臨床上均采用高效的抗hCGβ亞基單克隆抗體進行特異性hCG檢查。第25頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四受孕后血清HCG變化曲線第26頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四生理作用三、尿液人絨毛膜促性腺激素檢查有利于受精卵的生長;促進卵泡成熟、促甲狀腺及睪丸間質細胞的活性;與黃體生成激素相似的生物活性;抑制淋巴細胞免疫性,保護滋養(yǎng)層不受母體的免疫攻擊。第27頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四檢測方法三、尿液人絨毛膜促性腺激素檢查ELISA膠體金實驗電化學發(fā)光實驗放射免疫分析膠乳凝集抑制實驗血凝抑制實驗檢孕卡實驗……第28頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四第29頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四檢測方法靈敏度(ng/L)實驗條件應用價值ELISA4操作簡便定量,靈敏度高,篩選實驗膠體金0.8~2.0操作簡便、快速半定量,靈敏度高,廣泛使用檢孕卡200操作簡便、快速一般早孕診斷,靈敏度低膠乳凝集抑制200操作簡便半定量,靈敏度低,已少用血凝抑制200操作簡便半定量,靈敏度低,已少用放射免疫分析0.4條件要求高,操作復雜定量,靈敏度高,有污染尿液hCG各種檢測方法比較第30頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四臨床意義三、尿液人絨毛膜促性腺激素檢查早期妊娠診斷異位妊娠診斷流產診斷和監(jiān)測妊娠滋養(yǎng)細胞疾病診斷腫瘤標記物第31頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四四、尿液膽色素檢查尿中膽色素包括膽紅素(bilirubin)、尿膽原(urobilinogen)及尿膽素(urobilin),俗稱尿三膽。由于送檢的多為新鮮尿,尿膽原尚未氧化成尿膽素,故多查前兩者,俗稱尿二膽。第32頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四第33頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四四、尿液膽色素檢查膽紅素是紅細胞破壞后的代謝產生。可分為未經肝處理的未結合的膽紅素和經肝與葡萄糖醛酸結合形成的結合膽紅素。未結合膽紅素不溶于水,在血中與蛋白質結合不能通過腎小球濾膜。結合膽紅素分子量小,溶解度高,可通過腎小球濾膜,由尿中排出。第34頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四膽紅素檢驗方法重氮法:在強酸介質中,結合膽紅素與重氮鹽發(fā)生偶聯(lián)反應呈紅色。Harrison法:膽紅素被硫酸鋇吸附而濃縮,與氯化鐵反應,被氧化為膽青素、膽綠素和膽黃素復合物。Smith碘環(huán)法:膽紅素被碘氧化成膽綠素,在尿液與試劑接觸界面呈綠色環(huán)。四、尿液膽色素檢查第35頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四尿膽原檢驗方法四、尿液膽色素檢查Ehrlich法:尿膽原與ρ-甲氨基苯重氮化硼酸鹽發(fā)生偶聯(lián)反應。改良Ehrlich法:在酸性溶液中,尿膽原與對二甲氨基苯甲醛反應成櫻紅色。Schleisinger法:在無膽紅素尿液中,加入碘液,氧化尿膽原成尿膽素,與鋅離子作用,形成帶綠色熒光復合物。第36頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四第37頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四五、尿液亞硝酸鹽的檢測尿路感染時,一些感染病原菌可將尿液中的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。體液中有許多細胞能利用精氨酸在NO合成酶的作用下生成NO,在體內有氧的條件下,極易被氧化成為硝酸鹽和亞硝酸鹽,經過血液從尿中排出。第38頁,共40頁,2023年,2月20日,星期四五、尿液亞硝酸鹽的檢測檢測原理:亞硝酸鹽還原法;臨床意義:作為尿路感染的快速篩檢;尿液NIT陽性的三
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