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一、目的要求1、細(xì)菌斜面培養(yǎng)的菌落特征及平板培養(yǎng)時(shí)的生長(zhǎng)特征2、觀察并掌握根霉、曲霉和青霉的具體形態(tài)3、學(xué)會(huì)制備霉菌標(biāo)本片的方法4、放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察5、酵母菌的培養(yǎng)特征及形態(tài)觀察現(xiàn)在是1頁\一共有24頁\編輯于星期三二、實(shí)驗(yàn)原理1、培養(yǎng)特征:是指微生物在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長(zhǎng)情況。培養(yǎng)特征包括菌落特征、斜面培養(yǎng)的菌落特征及液體培養(yǎng)時(shí)的生長(zhǎng)特征,是認(rèn)識(shí)微生物和微生物分類的重要依據(jù)2、菌落:是指?jìng)€(gè)體微生物在固體培養(yǎng)基上繁殖成的肉眼可見的群體。3、霉菌:霉菌是由交織在一起的菌絲體構(gòu)成。菌絲呈管狀,有的有橫隔將菌絲分割為多細(xì)胞(如青霉、曲霉),有的菌絲沒有橫隔(如毛霉、根霉)。菌絲直徑比一般細(xì)菌和放線菌菌絲大幾倍到幾十倍。菌落形態(tài)較大,質(zhì)地疏松,顏色各異,有絲狀、絨毛狀或蜘蛛網(wǎng)狀的菌絲體。將菌絲體放在水中易變形,將其置于乳酸石炭酸溶液中,可保持菌絲體原形?,F(xiàn)在是2頁\一共有24頁\編輯于星期三二、實(shí)驗(yàn)原理4、放線菌觀察放線菌菌落表面形狀、大小、顏色、邊緣以及有無色素分泌;注意在培養(yǎng)基上的著生的緊密情況。區(qū)別基內(nèi)菌絲、氣生菌絲及孢子絲的著生部位。5、酵母菌有些酵母菌進(jìn)行一連串的出芽繁殖后,子細(xì)胞與母細(xì)胞并不立即分離,其間僅以極狹小的面積相連,形成似藕節(jié)狀排列的細(xì)胞串,且有分枝,這種細(xì)胞串就稱為假菌絲。是否能生成假菌絲,是酵母菌屬或種的特征,同時(shí)也與培養(yǎng)基的種類;培養(yǎng)條件等因素有關(guān)。一般于缺氧條件下在玉米粉瓊脂或馬鈴薯浸汁瓊脂培養(yǎng)基上較容易形成?,F(xiàn)在是3頁\一共有24頁\編輯于星期三三、實(shí)驗(yàn)材科及儀器(一)菌種黑根霉、黑曲霉、青霉、細(xì)菌、酵母菌和放線菌(二)染液乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。(三)其它顯微鏡、蓋玻片、載玻片、接種針、濾紙、涂布棒、鑷子等?,F(xiàn)在是4頁\一共有24頁\編輯于星期三四、方法與步驟1、每組一套常見的幾種細(xì)菌的培養(yǎng)皿。2、觀察幾種放線菌的斜面培養(yǎng)特征及標(biāo)本片。3、觀察酵母菌平板培養(yǎng)特征及標(biāo)本片。4、霉菌的觀察直接取片觀察法(1)取潔凈的載玻片,于中央滴一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染液。(2)用鑷子從培養(yǎng)皿中輕輕取一帶菌蓋玻片,從一側(cè)蓋在載玻片上的乳酸石炭酸棉藍(lán)染液上,不要產(chǎn)生氣泡。(3)將制好的載片標(biāo)本置于低倍鏡下觀察,必要時(shí)換用高倍鏡?,F(xiàn)在是5頁\一共有24頁\編輯于星期三五、觀察與作業(yè)1、觀察幾種細(xì)菌菌落的形態(tài)、大小、顏色、邊緣、光澤、隆起等特征并記錄比較。
李斯特菌培養(yǎng)特征枯草芽孢菌菌落特征金葡菌溶血大腸在EMB現(xiàn)在是6頁\一共有24頁\編輯于星期三有莢膜的細(xì)菌菌落較大并且表面光滑,而沒有莢膜的則表面較粗糙;具有芽孢的細(xì)菌菌落表面常有褶皺并且不透明。沒有鞭毛不運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌,特別是球菌,常形成較小、較厚、邊緣較整齊的菌落;有鞭毛的細(xì)菌則較大而扁平,邊緣波狀、鋸齒狀等;現(xiàn)在是7頁\一共有24頁\編輯于星期三細(xì)菌在平板上的菌落特征大腸在(VRBA)上副溶血型弧菌在TCBS上大腸在麥康凱上蠟樣芽孢桿菌在葡萄糖瓊脂上鼠傷寒沙門在SS上沙門在(DHL)上現(xiàn)在是8頁\一共有24頁\編輯于星期三大腸桿菌圖片電鏡鞭毛大腸電鏡現(xiàn)在是9頁\一共有24頁\編輯于星期三現(xiàn)在是10頁\一共有24頁\編輯于星期三蠟樣芽孢桿菌菌落枯草芽孢桿菌菌落現(xiàn)在是11頁\一共有24頁\編輯于星期三光滑型菌落粗糙型菌落粘液型菌落現(xiàn)在是12頁\一共有24頁\編輯于星期三斜面培養(yǎng)物的觀察
絲狀樹狀念珠狀擴(kuò)展?fàn)罴俑鶢畲堂珷瞵F(xiàn)在是13頁\一共有24頁\編輯于星期三霉菌形態(tài)觀察2、幾種霉菌的觀察觀察根霉和毛霉時(shí),應(yīng)注意觀察:(1)有無假根,及假根的形狀、發(fā)達(dá)程度;(2)孢囊梗的形狀、大小、顏色、排列、著生位置和分枝情況;(3)孢子囊的形狀、大小、囊軸、囊托及孢囊孢子的性狀、大小、顏色;菌絲有無橫隔等。觀察青霉時(shí),應(yīng)注意觀察:(1)分生孢子梗的來源、分枝情況、直徑等;(2)帚狀枝的輪數(shù)及對(duì)稱性;(3)分生孢子的形成方式。觀察曲霉時(shí)應(yīng)注意觀察:(1)菌絲的寬度、色澤、有無足細(xì)胞;(2)分生孢子梗的寬度、顏色和表面特征;(3)分生孢子頭和頂囊的形狀、大小和可育面積;(4)小梗的形狀、層數(shù)及在頂囊上的著生情況;(5)孢子鏈的排列情況。現(xiàn)在是14頁\一共有24頁\編輯于星期三根霉和曲霉根霉曲霉假根匍匐絲孢囊梗孢子囊孢子囊軸足細(xì)胞頂囊小梗分生孢子孢子?,F(xiàn)在是15頁\一共有24頁\編輯于星期三霉菌觀察黑曲霉電鏡青霉電鏡現(xiàn)在是16頁\一共有24頁\編輯于星期三霉菌觀察現(xiàn)在是17頁\一共有24頁\編輯于星期三霉菌菌落特征現(xiàn)在是18頁\一共有24頁\編輯于星期三酵母菌培養(yǎng)特征觀察酵母菌電鏡片現(xiàn)在是19頁\一共有24頁\編輯于星期三酵母菌培養(yǎng)特征觀察現(xiàn)在是20頁\一共有24頁\編輯于星期三放線菌觀察現(xiàn)在是21頁\一共有24頁\編輯于星期三六、思考題1、培養(yǎng)特征的重要意義何在?2、細(xì)菌菌落有那些重要的特征3、繪圖說明你所觀察到的各種霉菌的形態(tài)特征。
現(xiàn)在是22頁\一共有24頁\編輯于星期三七、接種1、每四人一組,接種葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。2、接
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