酵母菌培養(yǎng)基優(yōu)化課件

酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化一、實驗目的二、實驗原理三、實驗器材四、實驗步驟五、實驗結果實驗目的1.掌握發(fā)酵培養(yǎng)基的配制方法2.熟悉用正交試驗優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基的方法3.學習比濁法測定發(fā)酵液菌濃的方法二、培養(yǎng)基優(yōu)化原材料種類和濃度配比優(yōu)化1.單因素法(只是考慮單一變量對結果的影響)2.正交試驗法3.均勻試驗設計(只考慮試驗點在試驗范圍內均勻散布的一種試驗設計方法,試驗次數少)三、正交試驗法1.概念利用已經設計好的表格--正交表--來安排試驗并進行數據分析的一種方法。它是從全面試驗中挑選出部分有代表性的點進行試驗，這些有代表性的點具備了“均勻分散，齊整可比”的特點，是一種高效率、快速、經濟的實驗設計方法。2.基本工具——正交表記號：Ln（tm）L：正交表的符號n：表的行數（可安排試驗的次數）t：表中的字碼數（水平數）m：表的列數（最多可安排因素個數）L8(27)L9(34)L16(45)四、比濁法測定發(fā)酵液菌濃細菌培養(yǎng)物在生長過程中，由于原生質含量的增加，會引起培養(yǎng)物混濁度的增高。細菌懸液的混濁度和透光度成反比、與光密度成正比，透光度或光密度可借助光電比濁計精確測出，因此可用光電比濁計測定細胞懸液的光密度（OD值），表示該菌在特定實驗條件下的細菌相對數目，進而反映出其相對生長量。實驗器材移液管、100ml錐形瓶、光電比濁計、滅菌鍋、恒溫搖床葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4酵母菌菌液實驗步驟一、培養(yǎng)基的配制因素水平A葡萄糖/%B蔗糖/%C酵母提取粉/%DKH2PO4/%11.00.00.50.522.01.01.01.033.02.01.51.51.將葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4作為培養(yǎng)基的主要影響因素，每一因素設定3個水平，進行四因素三水平的正交試驗，試驗設計如下表錐形瓶培養(yǎng)基：標記，加棉塞、報紙包扎。1ml移液管2支121℃，滅菌20min二、滅菌將菌種搖勻后用無菌移液管吸取0.5ml懸液，接到每一組培養(yǎng)基中（接種量要完全一樣）三、接種四、發(fā)酵將三角瓶置于恒溫搖床中，30℃，120rpm培養(yǎng)24h五、比濁法測定各發(fā)酵液OD值取下搖瓶，以空白培養(yǎng)基為對照，于560nm處測定各搖瓶中發(fā)酵液的OD值，填入表中。注意：如果OD值過大，需將發(fā)酵液作一定稀釋后再測定。因素實驗號ABCD結果123456789111222333123123123123231312123312231X1X2X3X4X5X6X7X8X9k1k2k3

(X1+X2+X3)/3(X4+X5+X6)/3(X7+X8+X9)/3(X1+X4+X7)/3(X2+X5+X8)/3(X3+X6+X9)/3(X1+X6+X8)/3(X2+X4+X9)/3(X3+X5+X7)/3(X1+X5+X9)/3(X2+X6+X7)/3(X3+X4+X8)/3極差K最大-K最小K