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細胞工程植物細胞工程1.細胞的全能性(1)定義:細胞經(jīng)分裂和后,仍然具有產(chǎn)生或分化成其他的潛能。(2)在生物的生長發(fā)育過程中,并不是所有的細胞都表現(xiàn)出全能性,這是因為在特定的時間和條件下,細胞中的基因會地表達。2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)理論基礎:。3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)前提:的植物器官、組織或細胞等。4.植物組織培養(yǎng)技術(shù)結(jié)果:脫分化形成,再誘導其再分化成胚狀體,長出和,進而發(fā)育成完整的植株。5.生長素/細胞分裂素的比值高時:6.植物體細胞雜交:將不同來源的植物體細胞,在一定條件下融合成,并把培育成新的技術(shù)。7.去壁:用去除植物細胞壁,獲得原生質(zhì)體。8.人工誘導原生質(zhì)體融合的方法①物理法:等。②化學法:融合法、融合法等。9.植物體細胞雜交的原理原生質(zhì)體融合的過程利用了細胞膜的性,雜種細胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細胞的。10.意義:打破、實現(xiàn)育種,培育植物新品種。第2課時植物細胞工程的應用1.快速繁殖概念:用于快速繁殖優(yōu)良品種的技術(shù),也叫作繁殖技術(shù)。2.作物脫毒選材部位:植物頂端附近的部位(如)。3.單倍體育種原理:細胞的和。第2節(jié)動物細胞工程第1課時動物細胞培養(yǎng)1.動物細胞工程常用的技術(shù):動物細胞培養(yǎng)、和動物細胞核移植等,其中動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎。2.動物細胞培養(yǎng):從動物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。3.動物細胞培養(yǎng)培養(yǎng)條件①營養(yǎng)條件eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(無機物:無機鹽,有機物:糖類、氨基酸、等,天然成分:等))將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴格配制而成的培養(yǎng)基,稱為。培養(yǎng)動物細胞一般使用培養(yǎng)基,也稱為。②無菌、無毒的環(huán)境:需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換,以便清除,防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。③溫度、pH和滲透eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(溫度:哺乳動物細胞多以為宜,pH:多數(shù)動物細胞適宜pH為,滲透壓))④氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:細胞代謝所必需的,CO2:))在進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有和5%CO2的混合氣體的中進行培養(yǎng)。4.懸液中分散的細胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上,這一現(xiàn)象叫。5.當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞的現(xiàn)象,叫作。6.干細胞的來源:、骨髓和等多種組織和器官中。7.成體干細胞特點:具有組織性,只能分化成特定的細胞或組織,發(fā)育成完整個體的能力。8.誘導多能干細胞:通過體外誘導等細胞,獲得類似胚胎干細胞的一種細胞,被稱為誘導多能干細胞(簡稱細胞)。第2課時動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體9.動物細胞融合技術(shù)原理:。10.誘導融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,法,法))11.制備過程制備特異性B淋巴細胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①用特定抗原對小鼠進行免疫,②從小鼠的脾中得到能產(chǎn)生,特定抗體的))?獲得雜交瘤eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①將骨髓瘤細胞與多種B淋巴細胞,誘導融合,②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出,細胞,該雜種細胞既能,,又能))?培養(yǎng)和檢測?將雜交瘤細胞在培養(yǎng)或注射到小鼠內(nèi)增殖?提取單克隆抗體:從細胞或小鼠中提取12.單克隆抗體優(yōu)點:第3課時動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物13.體細胞核移植概念將動物一個細胞的移入去核的中,使這個重新組合的細胞發(fā)育成,繼而發(fā)育為動物個體的技術(shù)。14.動物細胞核移植的原理:第3節(jié)胚胎工程第1課時胚胎工程的理論基礎15.胚胎工程的概念(1)操作對象:動物、受精卵或細胞。(2)技術(shù)基礎:如、胚胎移植、等。16.受精場所:哺乳動物的內(nèi)。17.精子獲能在內(nèi)完成18.受精的標志是19.受精完成的標志為20.透明帶的反應發(fā)生在21.卵細胞膜的反應是22.早期胚胎發(fā)育各階段的特點(1)卵裂:細胞分裂方式為,細胞的數(shù)量不斷增加,胚胎的總體積,在內(nèi)進行。(2)桑葚胚:每個細胞都是。(3)囊胚:細胞逐漸,將來發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成,隨著胚胎的進一步發(fā)育,出現(xiàn)囊胚腔。(4):囊胚進一步擴大,會導致破裂,胚胎從其中伸展出來。(5)原腸胚:原腸胚表面的細胞層為,向內(nèi)遷移的細胞形成,一部分細胞在內(nèi)、外兩個胚層之間形成,這三個胚層將逐漸分化形成各種組織、器官等。第2課時胚胎工程技術(shù)及其應用23.胚胎工程技術(shù):胚胎工程技術(shù)目前在醫(yī)學和生產(chǎn)上應用較多的是體外受精、和等。24.胚胎移植①移植對象:通過體外受精及其他方式得到的胚胎。②移植條件:、相同的雌性動物體內(nèi)。25.胚胎移植時兩次使用激素:第一次用激素對進行,第二次用激素對供體進行處理。26.胚胎移植過程中進行兩次檢查的時間和目的分別是第一次檢查在后檢查的發(fā)育狀況;第二次檢查在后,對受體母牛進行是否檢查。27.請就移植胚胎的可能來源思考其生殖方式。胚胎的來源生殖方式核移植體外受精體內(nèi)受精28.胚胎分割實質(zhì):動物的繁殖或克隆。29.主要儀器設備:和30.操作程序(1)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的或,移入盛有的培養(yǎng)皿中。(2)在顯微鏡下用或分割刀分割,在分割囊胚階段的胚胎時,注意將均等分割。(3)還可用分割針分割,做DNA分析,鑒定性別。(4)分割后的胚胎可以直接移植給受體,或經(jīng)后,再移植給受體。3細胞工程第1節(jié)植物細胞工程1.細胞的全能性(1)定義:細胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細胞的潛能。(2)在生物的生長發(fā)育過程中,并不是所有的細胞都表現(xiàn)出全能性,這是因為在特定的時間和空間條件下,細胞中的基因會選擇性地表達。2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)理論基礎:植物細胞的全能性。3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)前提:離體的植物器官、組織或細胞等。4.植物組織培養(yǎng)技術(shù)結(jié)果:脫分化形成愈傷組織,再誘導其再分化成胚狀體,長出芽和根,進而發(fā)育成完整的植株。5.生長素/細胞分裂素的比值高時:促進根的分化、(抑制芽的形成)6.植物體細胞雜交:將不同來源的植物體細胞,在一定條件下融合成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新植物體的技術(shù)。7.去壁:用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁,獲得原生質(zhì)體。8.人工誘導原生質(zhì)體融合的方法①物理法:電融合法、離心法等。②化學法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。9.植物體細胞雜交的原理原生質(zhì)體融合的過程利用了細胞膜的流動性,雜種細胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細胞的全能性。10.意義:打破生殖隔離、實現(xiàn)遠緣雜交育種,培育植物新品種。第2課時植物細胞工程的應用1.快速繁殖概念:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù),也叫作微型繁殖技術(shù)。2.作物脫毒選材部位:植物頂端分生區(qū)附近的部位(如莖尖)。3.單倍體育種原理:細胞的全能性和染色體變異。第2節(jié)動物細胞工程第1課時動物細胞培養(yǎng)1.動物細胞工程常用的技術(shù):動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合和動物細胞核移植等,其中動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎。2.動物細胞培養(yǎng):從動物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。3.動物細胞培養(yǎng)培養(yǎng)條件①營養(yǎng)條件eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(無機物:無機鹽,有機物:糖類、氨基酸、維生素等,天然成分:血清等))將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴格配制而成的培養(yǎng)基,稱為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)動物細胞一般使用液體培養(yǎng)基,也稱為培養(yǎng)液。②無菌、無毒的環(huán)境:需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換,以便清除代謝物,防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。③溫度、pH和滲透壓eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(溫度:哺乳動物細胞多以36.5±0.5℃為宜,pH:多數(shù)動物細胞適宜pH為7.2~7.4,滲透壓))④氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:細胞代謝所必需的,CO2:維持培養(yǎng)液的pH))在進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。4.懸液中分散的細胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上,這一現(xiàn)象叫細胞貼壁。5.當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞停止分裂增殖的現(xiàn)象,叫作接觸抑制。6.干細胞的來源:早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。7.成體干細胞特點:具有組織特異性,只能分化成特定的細胞或組織,不具有發(fā)育成完整個體的能力。8.誘導多能干細胞:通過體外誘導成纖維等細胞,獲得類似胚胎干細胞的一種細胞,被稱為誘導多能干細胞(簡稱iPS細胞)。第2課時動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體9.動物細胞融合技術(shù)原理:細胞膜的流動性。10.誘導融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,電融合法,滅活病毒誘導法))11.制備過程制備特異性B淋巴細胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①用特定抗原對小鼠進行免疫,②從小鼠的脾中得到能產(chǎn)生,特定抗體的B淋巴細胞))?獲得雜交瘤細胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①將骨髓瘤細胞與多種B淋巴細胞,誘導融合,②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤,細胞,該雜種細胞既能迅速大量增殖,,又能產(chǎn)生抗體))?克隆化培養(yǎng)和抗體檢測?將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖?提取單克隆抗體:從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取12.單克隆抗體優(yōu)點:能準確地識別抗原的,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。第3課時動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物13.體細胞核移植概念將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中,使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育為動物個體的技術(shù)。14.動物細胞核移植的原理:動物細胞核具有全能性第3節(jié)胚胎工程第1課時胚胎工程的理論基礎15.胚胎工程的概念(1)操作對象:動物生殖細胞、受精卵或早期胚胎細胞。(2)技術(shù)基礎:如體外受精、胚胎移植、胚胎分割等。16.受精場所:哺乳動物的輸卵管內(nèi)。17.精子獲能在雌性動物生殖道內(nèi)完成18.受精的標志是在透明帶和卵細胞膜之間觀察到兩個極體19.受精完成的標志為雌、雄原核的融合。20.透明帶的反應發(fā)生在精子觸及卵細胞膜的瞬間。21.卵細胞膜的反應是拒絕其他精子再進入卵內(nèi)。22.早期胚胎發(fā)育各階段的特點(1)卵裂:細胞分裂方式為有絲分裂,細胞的數(shù)量不斷增加,胚胎的總體積并不增加,在透明帶內(nèi)進行。(2)桑葚胚:每個細胞都是全能細胞。(3)囊胚:細胞逐漸分化,內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織,
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