微生物學(xué)微生物的分類和鑒定

微生物學(xué)微生物的分類和鑒定第1頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四界

門

綱

目科屬

種瑞典植物學(xué)家林奈（Linneaus）于1753年創(chuàng)立第一節(jié)通用分類單元一、7級分類單元第2頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四（一）雙名法指一個物種的學(xué)名由前面一個屬名和后面一個種名加詞兩部分組成學(xué)名=屬名+種名加詞+（首次定名人）+現(xiàn)名定名人+現(xiàn)名定名年份例：大腸埃希氏菌（大腸桿菌）

Escherichia

coli(Migula)CastellanietChalmers1919(二)三名法當某種微生物是一個亞種或變種時，學(xué)名就按三名法拼寫。學(xué)名=屬名+種名加詞+符號subsp或var+亞種或變種的加詞二、學(xué)名第3頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四屬的模式該屬中一個具有代表性的種,即模式種BacillusBacillussubtilis

(Cohn,1872)Typestrain:ATCC6051=DSM10=CCTCCAB92068屬名種名定種人年代保藏機構(gòu)及其保藏號種的加詞Specificepithet第4頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四當微生物名稱是一個亞種（subspecies，簡稱“subsp．”，排正體字）或變種（variety，簡稱“var．”，排正體字）時，學(xué)名就應(yīng)按“三名法”構(gòu)成，即：例1：蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensis

subsp．galleria例2：釀酒酵母橢圓變種Saccharomycescerevisiae

var．ellipsoideus第5頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四1.屬名是一個表示該微生物主要特征的名詞或用作名詞的形容詞，單數(shù)第一個字母應(yīng)大寫。芽孢桿菌屬：Bacillus

可縮寫成B.

或Bac.2、種名種名加詞又稱種加詞，它代表一個物種的次要特征。字首一律小寫，可由形容詞或名詞組成，

B.subtilis

。(三)有關(guān)學(xué)名的其他知識第6頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四（四）種(species)種是一個基本分類單元，是一大群表型特征高度相似、親緣關(guān)系極其接近、與同屬內(nèi)的其他物種有著明顯差異的一大群菌株的總稱。典型菌株(typestrain)、模式種(typespecies)第7頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四新種(speciesnova,sp.nov)：是指權(quán)威性的分類、鑒定手冊中從未記載過的一種新分離并鑒定過的微生物。第8頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四變種(Variety)

：一個微生物的種的某種特性已起了明顯的變化，這種特性的改變是與過去人們在自然界中分離獲得的菌種所描述的特性相比較而確定的，而且這種變異的特性又是比較穩(wěn)定的，這種變異的菌株稱為變種。亞種(subspecies,subsp)亞種是進一步細分種時所用的單元，一般指除某一明顯而穩(wěn)定的特征外，其余鑒定特征與模式種相同的種，是變種的同義詞。例2：釀酒酵母橢圓變種Saccharomycescerevisiae

var．ellipsoideus第9頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四（五）菌株(strain)又稱品系（在非細胞型的病毒中則稱毒株或株），表示任何由一個獨立分離的單細胞（或單個病毒粒）繁殖而成的純遺傳型群體及其一切后代。模式菌株（Typestrain)：是一個種的具體活標本，必須是該菌種的活培養(yǎng)物，是由一個被指定為命名的模式菌株傳代而來。型（form）：一般特性很難加以區(qū)分，某種特殊的特性可以區(qū)分。

如：結(jié)核菌的人型、牛型、禽型。第10頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四斑馬魚腸道中一株紅酵母（Rhodotorula）的鑒定與系統(tǒng)發(fā)育分析戚冰潔胡秀彩顧丹梁爽呂愛軍*（徐州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇徐州221116）摘要：采用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基（PDA），從野生斑馬魚腸道中分離到一株酵母菌，編號為ZF-2，進行形態(tài)學(xué)觀察、生理生化特征、PCR擴增26SrDNAD1/D2區(qū)以及基因測序分析，并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進化樹。結(jié)果表明ZF-2分離株為粉紅色菌落、菌體呈橢圓形，出芽繁殖；可以同化利用葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖類，基本符合紅酵母屬（Rhodotorula）特征，初步確定為紅酵母。PCR擴增獲得26SrDNAD1/D2區(qū)序列長度為642bp(HQ323251)，采用BLAST和ClustalX程序進行序列比對分析，結(jié)果表明與斯魯菲亞紅酵母（R.Slooffiae）序列相似性在99%-100%之間，構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進化樹顯示菌株ZF-2與R.Slooffiae(EU583485)關(guān)系最近，最終鑒定ZF-2菌株為斯魯菲亞紅酵母。這是首次從斑馬魚腸道中分離到斯魯菲亞紅酵母。關(guān)鍵詞：斑馬魚，紅酵母，分離鑒定，序列分析第11頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四草魚腸道中弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定與PCR-SSCP分析鄭璐1，呂愛軍1*，胡秀彩2，曹成亮1，蔣繼宏2(1.徐州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇徐州221116；2.江蘇省藥用植物生物技術(shù)重點實驗室，江蘇徐州221116)摘要：從草魚（Ctenopharyngodon

idellus）腸道中分離到3株細菌，暫時編號為Ci-1、Ci-7和LCi-40，結(jié)果表明3株菌株均為弗氏檸檬酸桿菌（Citrobacterfreundii）；系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果表明，3株弗氏檸檬酸桿菌16SrDNA序列與DSM30039模式株同源性分別為99.59%、99.47%和99.53%，且位于系統(tǒng)發(fā)育樹的同一分支。關(guān)鍵詞：草魚；弗氏檸檬酸桿菌；致病性；16SrDNA第12頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四第二節(jié)微生物在生物界的地位一、生物的界級分類學(xué)說動物界植物界林奈動物界植物界原生生物界Haeckel植物界動物界原始生物界菌界Copeland植物界動物界原核生物界原生生物界真菌界Whittaker五界上加上病毒界細菌域古生菌域真核生物域美國Woese第13頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四R.H.Whittaker(1969)proposedafivekingdomclassification.Thekingdomsdefinedbyhim

werenamedMonera,Protista,Fungi,Plantae&Animalia.

第14頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四三域?qū)W說：1977年，美國C.R.Woese等人對大量微生物和其他生物進行16S和18SrRNA的寡核苷酸測序，并比較其同源性水平后，提出了一個與以往各種界級分類不同的新系統(tǒng)，稱為三域?qū)W說。三個域是指細菌域、古生菌域和真核生物域。第15頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四第16頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四1、《伯杰氏手冊》美國的《伯杰氏鑒定細菌學(xué)手冊》，為各國微生物分類學(xué)界公認的一本經(jīng)典佳作。2、前蘇聯(lián)克拉西爾尼可夫的《細菌和放線菌鑒定》

3、法國雷沃A.R.Prevot的《細菌分類學(xué)》4、Ainsworth等人的菌物分類系統(tǒng)綱要：《安.貝氏菌物詞典》第八版（1995年）第三節(jié)微生物的分類系統(tǒng)綱要第17頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四《伯杰氏鑒定細菌學(xué)手冊》1923年第一版

1948年第六版1925年第二版1957年第七版1930年第三版1974年第八版1934年第四版1994年第九版1939年第五版現(xiàn)書名已改為《伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)手冊》（Bergey’MamualofSystematicBacteriology)

特點：①表型特征②基因序列第18頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四《伯杰氏細菌鑒定手冊》（Bergey’sManualofDeterminativeBacteriology），第九版的伯杰氏手冊基于細胞壁的特性將原核生物分成四大類群，其中薄壁菌和厚壁菌兩個類群物種數(shù)量最多。類群I：薄壁菌（革蘭氏陰性菌）組1：暗細菌綱（不進行光合作用）組2：不產(chǎn)氧光合細菌綱（光合細菌，不產(chǎn)氧）組3：產(chǎn)氧光合細菌綱（光合細菌，產(chǎn)氧）類群II：厚壁菌（革蘭氏陽性菌）組1：厚壁菌綱組2：放線菌綱類群III:無壁菌組1：柔膜菌綱（缺乏細胞壁的原生質(zhì)體）類群IV:疵壁菌古生菌綱第19頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四二、Ainsworth等人的菌物分類系統(tǒng)綱要《安.貝氏菌物詞典》第八版（1995年）第20頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四第四節(jié)微生物分類鑒定的方法四個不同水平：（1）細胞的形態(tài)和習(xí)性水平（2）細胞組分水平（3）蛋白質(zhì)水平（4）核酸水平微生物形態(tài)生理特性抗原特性分子生物學(xué)方法分類依據(jù)：第21頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四一、微生物分類鑒定中的經(jīng)典方法第22頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四二、微生物分類鑒定中的現(xiàn)代方法（一）通過核酸分析鑒定微生物遺傳型1、DNA堿基比例的測定是指（G+C）mol%值，簡稱“GC比”，表示DNA分子中鳥嘌呤G和胞嘧啶C所占的摩爾百分比值（G+C）mol%=G+C/A+T+G+C*100%第23頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四通過（G+C）mol%對微生物進行分類有以下幾個特點：（1）親緣關(guān)系相近的種，兩者的GC比也接近，反之，GC比相近的兩個種，它們的親緣關(guān)系則不一定都很接近。（2）GC比差距很大的兩種微生物，親緣關(guān)系必然較遠。（3）GC比是建立新分類單元時的可靠指標：GC比相差低于2%時，沒有分類學(xué)上的意義；種內(nèi)各菌株間的差別在2.5%~4%間；若相差在5%以上時，就可認為屬于不同的種，相差在10%，可認為是不同的屬。測定DNA中GC的方法很多，其中的解鏈溫度法較為常用。

XG+C=(Tm-69.3)*2.44第24頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四2、核酸分子雜交法按堿基的互補配對原理，用人工方法對兩條不同來源的單鏈核酸進行復(fù)性，以構(gòu)建新的雜合雙鏈核酸的技術(shù)，稱為核酸雜交。包括DNA-DNA、DNA-rRNA和rRNA-rRNA分子間的雜交。一般認為，DNA-DNA雜交同源性超過60%的菌株可以是同種，同源性超過70%者是同一亞種，而同源性在20%~60%范圍內(nèi)，則屬于同一個屬。第25頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四3、rRNA寡核苷酸編目分析一種通過分析原核或真核細胞中最穩(wěn)定的rRNA寡核苷酸序列同源性程度，以確定不同生物間的親緣關(guān)系和進化譜系的方法。是“三域?qū)W說”提出的科學(xué)根據(jù)。為何說16SrRNA或18SrRNA是“分子進化尺”？（1）普遍存在于一切細胞內(nèi)（2）生理功能既重要又恒定（3）在細胞中的含量較高、易提?。?）編碼rRNA的基因十分穩(wěn)定。（5）序列非常保守（6）相對分子質(zhì)量適中4、微生物全基因組序列測定第26頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四（二）細胞化學(xué)成分作用鑒定指標細胞壁的化學(xué)成分：肽橋，肽尾