甲型HN流感標本采集運輸與生物安全

一、概述二、標本的采集三、標本包裝、保存、運送與接收四、生物安全現(xiàn)在是1頁\一共有26頁\編輯于星期四流感病毒有甲、乙、丙三種至今甲型流感病毒已發(fā)現(xiàn)的血凝素有16個亞型（H1-H16），神經(jīng)氨酸酶9個亞型（N1-N9）

豬流感是一種因甲型流感病毒引起的豬呼吸系統(tǒng)疾病

目前，已從豬身上分離到四種主要的亞型：H1N1、H1N2、H3N2和H3N1甲型流感病毒H1N1亞型是目前疫情的主要病原體

一、概述現(xiàn)在是2頁\一共有26頁\編輯于星期四

一、概述人流感病毒亞型

H1N1（季節(jié)）H2N2H3N2豬流感病毒亞型

H1N1H1N2H3N2H3N1現(xiàn)在是3頁\一共有26頁\編輯于星期四不同亞型流感病毒宿主分布現(xiàn)在是4頁\一共有26頁\編輯于星期四

二、標本的采集

標本采集人員:

醫(yī)療機構(gòu)的醫(yī)生、護士或當?shù)丶膊☆A防控制中心流行病學專業(yè)人員負責標本采集。標本采集對象:

新H1N1流感病毒感染疑似病例、可能病例、臨床診斷病例以及其它需要進行新H1N1病毒實驗排查者?，F(xiàn)在是5頁\一共有26頁\編輯于星期四

二、標本的采集標本種類:

病人咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子、鼻咽吸出液、氣管吸取物、肺活檢物、肺和氣管組織、急性期和恢復期血清等.

疑似新A/H1N1感染死亡病例:采集肺、氣管、心、肝、脾、腎和淋巴結(jié)等組織(需征得家屬同意)

現(xiàn)在是6頁\一共有26頁\編輯于星期四二、標本的采集咽拭子標本采集方法：

用滅菌棉簽（最好用塑料柄、尼龍拭子，因為木頭柄棉拭子會抑制PCR實驗）擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去。標本采集后應立即放入適當?shù)牟蓸右褐械蜏乇４妗?/p>

推薦使用的采樣液：

的Hank’s液。

現(xiàn)在是7頁\一共有26頁\編輯于星期四二、標本的采集現(xiàn)在是8頁\一共有26頁\編輯于星期四采咽拭子的器材和容器

現(xiàn)在是9頁\一共有26頁\編輯于星期四鼻咽拭子

插入干的拭子到鼻孔伸入鼻咽部，停留刻，緩慢旋轉(zhuǎn)退出，另一鼻孔使用另一個棉簽，將尾部棄去，擰緊管蓋?，F(xiàn)在是10頁\一共有26頁\編輯于星期四二、標本的采集注意事項采樣登記表信息是否齊全?裝檢材的容器是否符合要求?

耐低溫、外螺旋口、帶密封墊圈采樣液太多或沒有?現(xiàn)在是11頁\一共有26頁\編輯于星期四三、標本包裝、保存、運送與接收標本的包裝標本運輸使用A類包裝：三層包裝,

包裝容器有生物安全危害標識。在生物安全柜內(nèi)進行，標本分為一式三份；標本上標明編號、種類、姓名及采樣日期，再放入塑料袋內(nèi)；送檢單應信息完整，放入另一塑料袋內(nèi)?，F(xiàn)在是12頁\一共有26頁\編輯于星期四三、標本包裝、保存、運送與接收標本的保存呼吸道標本：

4℃（短時間）；＞48小時-70℃或以下；不推薦-20℃保存。血清標本：

3天內(nèi)4℃

長期-20℃

避免反復凍融采樣前通知接收和檢測單位現(xiàn)在是13頁\一共有26頁\編輯于星期四三、標本包裝、保存、運送與接收標本的運送：

24小時內(nèi)上送；專人專車；帶冰送樣?，F(xiàn)在是14頁\一共有26頁\編輯于星期四三、標本包裝、保存、運送與接收原則：不污染環(huán)境，不影響檢測要求：及時、穩(wěn)妥、符合國家規(guī)定標本應冷藏運輸現(xiàn)在是15頁\一共有26頁\編輯于星期四國際上感染性實驗室標本的包裝和運送的要求

使用螺旋蓋容器+密封塑料袋；同一位患者的2份以上的密封的標本可以放在同一個塑料袋內(nèi)并封好，不同患者的標本不應放在同一個袋里；絕緣容器的內(nèi)部應該另外裝一些物品以防止塑料容器在運送時發(fā)生移動；現(xiàn)在是16頁\一共有26頁\編輯于星期四四、生物安全對實驗室的要求:對新甲型H1N1流感病毒疑似病例的臨床標本進行的診斷性實驗工作，在BSL2實驗室內(nèi)進行。所有樣本操作均應在生物安全柜（BSC）內(nèi)進行。并進行三級個人防護。

對新甲型H1N1流感病毒疑似病例的臨床標本進行的病毒分離工作，應在BSL3實驗室內(nèi)進行，并遵循三級個人防護。現(xiàn)在是17頁\一共有26頁\編輯于星期四四、生物安全個人防護要求生物安全等級三級個人防護（包括操作臨床標本和病毒分離物）推薦的個人防護裝備（要基于特定場所的風險評估）呼吸防護裝備—

檢測合格的N95呼吸器或更高級別的防護裝備。鞋套前封式手術(shù)服雙層手套眼部防護裝備（護目鏡或面罩）現(xiàn)在是18頁\一共有26頁\編輯于星期四

四、生物安全防護措施普通環(huán)境采樣穿戴防護服、醫(yī)學防護口罩、乳膠手套、帽子；病人采樣加上隔離衣或圍裙、防護鞋套、眼罩、N95級或N/P/R-100防護面罩；穿上防護用品后應注意檢查呼吸道防護的嚴密性；脫掉防護用品時應先將污染最嚴重的部分脫掉，最后摘口罩?，F(xiàn)在是19頁\一共有26頁\編輯于星期四四、生物安全實驗室廢棄物處理原則應遵循所在機構(gòu)標準實驗室操作規(guī)程內(nèi)的所有廢棄物處置程序進行。

121℃、30分鐘高壓滅菌處理

化學消毒劑浸泡現(xiàn)在是20頁\一共有26頁\編輯于星期四四、生物安全健康監(jiān)測:

所有參與人員均應自測發(fā)熱及其他癥狀。感染甲型H1N1流感病毒的癥狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。如有不適，應立即向上級報告。如有人員在無防護情況下暴露于甲型H1N1流感確診病例的臨床標本或活病毒，應考慮在暴露后的7天時間里使用奧司他韋（達菲）或扎那米韋（Zanamivir）進行抗病毒藥物預防?，F(xiàn)在是21頁\一共有26頁\編輯于星期四四、生物安全生物安全條例和規(guī)定:《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則（WS233-2002）》《實驗室生物安全通用要求（GB19489－2004）》現(xiàn)在是22頁\一共有26頁\編輯于星期四目前甲型H1N1主要的檢測方法快速流感抗原檢測

B型流感病毒陽性，可排除新H1N1流感無論A型流感病毒抗原陽性或陰性，不能排除新H1N1流感

現(xiàn)在是23頁\一共有26頁\編輯于星期四目前甲型H1N1主要的檢測方法核酸檢測：Real-timeRT-PCR

檢測（美國CDC建立）RT-PCR檢測（病毒病所國家流感中心建立）現(xiàn)在是24頁\一共有26頁\編輯于星期四目前甲型H1N1主要的檢測方法免疫熒光法

免疫熒光試驗可以區(qū)分A和B型流感病毒。免疫熒光試驗的結(jié)果取決于臨床標本的質(zhì)量，操作技能，對檢測甲型H1N1病毒臨床標本的敏感性和特異性未知。因此，免疫熒光試驗陰性結(jié)果可能是假陰性，不能作為甲型H1N1感染的最后診斷。病毒培養(yǎng)

用MDCK細胞和SP