免疫學(xué)課件13B淋巴細(xì)胞

第十三章B淋巴細(xì)胞第一節(jié)B細(xì)胞在骨髓內(nèi)的發(fā)育成熟

骨髓微環(huán)境和B細(xì)胞成熟

B細(xì)胞成熟的分期未成熟自身反應(yīng)性B細(xì)胞的陰性選擇

Ig基因重排

Ig多樣性產(chǎn)生機(jī)制

B細(xì)胞因在骨髓（bonemarrow）或禽類(lèi)法氏囊（bursaofFabricius）中分化成熟而得名，簡(jiǎn)稱(chēng)B細(xì)胞。ThediscoveryofBcellimmunity1957-BruceGlick,OhioStateUniversityStudiesonthefunctionofthealymphoidorganinthecloacalregionofthechickenthebursaofFabricius

Bursectomy–noapparenteffectNoneofthebursectomisedchickensmadeanti-Salmonellaantibodies

Bursawastheorganwhereantibodyproducingcellsdeveloped

AntibodyproducingcellswerethereaftercalledBcellsTransferfoetallivercellsOriginofBcellsandorganofBcellmaturationNoMatureBcellsAfterbirth,developmentcontinuesinthebonemarrowNormalbonemarrowDefectivebonemarrowMatureBcellsinperipheryBcelldevelopmentstartsinthefoetalliver起源：胎兒期—胎肝和骨髓出生后—骨髓兩階段:骨髓內(nèi)成熟(抗原非依賴(lài)期)骨髓外成熟(抗原依賴(lài)期)一、骨髓微環(huán)境和B細(xì)胞成熟骨髓基質(zhì)細(xì)胞提供微環(huán)境VCAM-1SCFIL-7基質(zhì)細(xì)胞VLA-4c-KitIL-7R祖B細(xì)胞Earlypro-Bc-KitSCFVLA-4pro-BCytokinesandcell-cellcontactsateachstageofdifferentiationaredifferentStromalcellCAMVCAM-1Earlypro-BIL-7RStromalcellLatepro-BPre-BIL-7Cytokinesandcell-cellcontactsateachstageofdifferentiationaredifferentBonemarrowstromalcellMaturingBcellsBBStromalcell二、B細(xì)胞成熟的分期分期重鏈輕鏈表面標(biāo)志祖B細(xì)胞(pro-B)（重鏈基因重排）μ胞質(zhì)前B細(xì)胞(pre-B)（輕鏈基因重排）μ替代輕鏈類(lèi)Ig未成熟B細(xì)胞(immature-B)（輕鏈基因重排、陰性選擇）μκ或λｍIgM成熟B細(xì)胞(mature-B)μ+δκ或λｍIgMｍIgD

B細(xì)胞在骨髓內(nèi)發(fā)育的主要事件Ig基因重排陰性選擇三、陰性選擇（negativeselection）發(fā)生于未成熟B細(xì)胞若mIgM與基質(zhì)細(xì)胞上的多價(jià)自身抗原結(jié)合，發(fā)生交聯(lián)而致未成熟B細(xì)胞凋亡（apoptosis）若mIgM與單價(jià)可溶性自身抗原結(jié)合，引起自身反應(yīng)性B細(xì)胞無(wú)能(anergy)通過(guò)陰性選擇的未成熟B細(xì)胞繼續(xù)發(fā)育為成熟B細(xì)胞（表達(dá)mIgM和mIgD）Negativeselection-ApoptosisImmatureBcellrecognisesMULTIVALENTselfAgBClonaldeletionbyapoptosisYYBImmatureBYBYYYBAnergicBcellIgDnormalIgMlowImmatureBcellrecognisessolubleselfAgNocross-linkingYYBImmatureBIgMIgDIgDIgDNegativeselection-AnergyYYYYYYMatureBcellexportedtotheperipheryYYIgDandIgMnormalIgMIgDIgDIgDIgDIgMIgMIgMImmatureBcelldoesn’trecogniseanyselfAgYYBImmatureBBBNegativeselection-MatureBcellsBindingtoselfmoleculesinthebonemarrowcanleadtothedeathorinactivationofimmatureBcells

四、Ig基因重排1.Ig的基因結(jié)構(gòu)(胚系基因)κ鏈基因--2號(hào)染色體

λ鏈基因--22號(hào)染色體

H鏈基因--14號(hào)染色體

輕鏈基因分為V、J、C三組基因片段重鏈基因分為V、D、J、C四組基因片段Hchain:chromosome14

Vregionencodinggenes:

VH(variablegenesegments)—48DH(diversitygenesegments)—23JH(joininggenesegments)–6

Leadersequence—signalpeptide

Cregionencodinggenes:

CH(constantgenesegments):Cμ,Cδ,

Cγetal.(10)

Lchain(--2chromosome,--22chromosome)

Vregionencodinggenes:

--V,J—40,5

--V,J—30,4

Leadersequence—signalpeptide

Cregionencodinggenes:

C(1);C(4)

Inheavychains,theV,DandJsegmentsencodethevariabledomainwhiletheCsegmentencodestheconstantdomain.Inlightchains,theVandJsegmentsencodethevariabledomainwhiletheCsegmentencodestheconstantdomain.3’3’3’3’48236405130442.Ig的基因重排（Iggenerearrangement）

B細(xì)胞成熟過(guò)程中，Ig基因片段經(jīng)重排后方能表達(dá)為功能性的Ig重鏈基因重排輕鏈基因重排等位排斥和同種型排斥VDJCDJVCDJVCDJVGermlineDH-JHjoiningVH-DHJHjoiningVJCVCJVGermlineVL-JLjoiningHeavychainrearrangementCVDJVHDHJH-CHjoiningVCJVLJL-CLjoiningLightchainrearrangementDJ編碼重鏈VDJ(V基因)VDJCSplicingofIgMandIgDRNACm1Cm2Cm3Cm4Cd1Cd2Cd3pA1VDJCm1Cm2Cm3Cm4Cd1Cd2Cd3VDJAAARNAcleavedandpolyadenylatedatpA2VDJCmIgMmRNARNAcleavedandpolyadenylatedatpA1AAAVDJCdIgDmRNACg1Cg3CdCmVDJCm1Cm2Cm3Cm4Cd1Cd2Cd3DNApA1pA2VDJTwotypesofmRNAcanbemadesimultaneouslyinthecellbydifferentialusageofalternativepolyadenylationsitesandsplicingoftheRNAVJ(V基因)VJC編碼輕鏈等位排斥（allelicexclusion）Ig

基因重排時(shí)，一對(duì)同源染色體上的兩個(gè)等位基因中只有一個(gè)能表達(dá)使得一個(gè)B細(xì)胞只能表達(dá)一種輕鏈和一種重鏈同種型排斥（isotypicexclusion）一個(gè)B細(xì)胞中，κ鏈基因和λ鏈基因只有其中的一種能夠表達(dá)使得一個(gè)B細(xì)胞只能表達(dá)κ或λ鏈中的一種5.Ig的表達(dá)（成熟B細(xì)胞）重鏈與輕鏈的表達(dá)μ鏈和δ鏈κ鏈或λ鏈重鏈與輕鏈的裝配μ鏈和δ鏈分別與輕鏈配對(duì)，形成IgM和IgD（BCR）特異性相同，恒定區(qū)不同Membranetype(BCR)andSecretorytypeIg(Ab)

TCR受體基因重排

DN－DP階段（祖T細(xì)胞、前T細(xì)胞、未成熟T細(xì)胞）TCRβ基因重排pTα∶β/CD3CD4;CD8TCRα基因重排TCRαβ/CD3CD4;CD8五、Ig多樣性產(chǎn)生機(jī)制多個(gè)V（D）J基因片段重組多樣性（VDJ、VJ隨機(jī)重組）連接的多樣性（連接的不精確性、N區(qū)多樣性）N區(qū)插入Ig重鏈基因重排時(shí)，在V-D之間和D-J之間額外加入新的核苷酸，這些核苷酸序列不是依賴(lài)模板而加入的，稱(chēng)為非模板區(qū)H、L鏈的隨機(jī)組合體細(xì)胞高頻突變

TCR多樣性產(chǎn)生的機(jī)制TCR基因重排特點(diǎn)β鏈V基因有效重排機(jī)會(huì)多N區(qū)插入多于Igα鏈基因重排不受?chē)?yán)格等位排斥限制TCR多樣性產(chǎn)生機(jī)制具有多個(gè)V、D、J基因片段N區(qū)多樣化α、β鏈配對(duì)的多樣性第二節(jié)B淋巴細(xì)胞的抗原受體及輔助分子

B細(xì)胞受體復(fù)合體：識(shí)別抗原協(xié)同受體協(xié)同刺激受體參與B細(xì)胞活化其它膜輔助分子

BCR

Igα-Igβ異二聚體一、B細(xì)胞受體復(fù)合體（1）BCR（Bcellreceptor）B細(xì)胞特有的抗原受體，是B細(xì)胞識(shí)別抗原的功能性結(jié)構(gòu)膜型Ig：胞外段、跨膜段、胞內(nèi)段功能區(qū)：V區(qū)、C區(qū)抗原結(jié)合部位：6個(gè)CDR（2）Igα-Igβ異二聚體Igα（CD79a-Igβ（CD79b）屬于小分子跨膜蛋白參與BCR裝配及在細(xì)胞膜的表達(dá)胞內(nèi)含有ITAM結(jié)構(gòu)，傳遞抗原信號(hào)（第一信號(hào)）誘導(dǎo)表達(dá)CD40（3）BCR復(fù)合體組成:BCR(mIgD、mIgM)、2Igα-Igβ異二聚體功能：識(shí)別抗原、傳遞抗原信號(hào)

二、協(xié)同受體：CD19/CD21/CD81

CD19:B細(xì)胞的重要標(biāo)志，含有ITAM結(jié)構(gòu)CD21：即CR2，C3dR、EB病毒的受體功能：協(xié)助B細(xì)胞識(shí)別抗原；參與B細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)三、協(xié)同刺激受體：CD40

CD40：表達(dá)于抗原活化的B細(xì)胞，與Th2表面的CD40L結(jié)合----為B細(xì)胞活化傳導(dǎo)重要的協(xié)同刺激信號(hào)（第二信號(hào)）

參與B細(xì)胞的活化增殖及抗體類(lèi)別轉(zhuǎn)換上調(diào)B7分子的表達(dá)，為T(mén)h2細(xì)胞提供協(xié)同刺激信號(hào)四、其它膜輔助分子（1）CD45（2）B7：靜止B細(xì)胞不表達(dá)，與CD28/CTLA-4結(jié)合（3）MHC分子：表達(dá)MHCⅠ、MHCⅡ類(lèi)分子,活化后MHCⅡ類(lèi)分子表達(dá)上調(diào)（4）絲裂原受體：SPA、LPS、PWM（5）細(xì)胞因子受體：IL-4R、IL-5R等T細(xì)胞與B細(xì)胞表面的膜分子比較抗原受體復(fù)合體協(xié)同受體協(xié)同刺激受體其他第三節(jié)B細(xì)胞亞群及其功能Ｂ１：表達(dá)CD5Ｂ２：不表達(dá)CD5ComparisonofB1andB2cells

B1B2Developmentearlylate