高級(jí)生化答案4s版修正

2、組：泛指一個(gè)有生命體、或細(xì)胞器的全部遺傳物質(zhì)；在真核生物，組是指一套（單倍體3、組學(xué)：指從組水平研究遺傳的學(xué)科4、C值：通常是指一種生物單倍體組DNA的總量，在真核生物中，C值一般隨著生物的進(jìn)化而增加，高等生5、C值：指一個(gè)有機(jī)體的C值和其編碼能力缺乏相關(guān)性6、RNA組學(xué)對(duì)細(xì)胞中全部RNA分子的結(jié)構(gòu)與功能進(jìn)行系統(tǒng)的研體水平闡明RNA的生物學(xué)意義即為RNA組8、轉(zhuǎn)錄組學(xué)：就是在組學(xué)后新興的一門學(xué)科，即研究細(xì)胞在某能狀態(tài)下所含mRNA的類型與拷貝數(shù)。即研，10酶的活性單位：在特定的條件下，111為1個(gè)酶的單位（國際單位IU)。11、酶的比：酶的與蛋白質(zhì)的量相聯(lián)系的1種單位。如每mg酶蛋白所具有的酶(單位／mg蛋白)，每ml酶制劑含有的酶(單位／m1)，或每g酶制劑具有的單位(單位／g)等。對(duì)同一種酶來講，比12、PH：pHpH 蛋白質(zhì)組：由一個(gè)組所表達(dá)的全部相應(yīng)的蛋白質(zhì)，同一組在不同細(xì)胞、不同組織中的表達(dá)情況各不相同;在空間和時(shí)間上動(dòng)態(tài)變化。16、蛋白質(zhì)組學(xué)：從整體的角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成、結(jié)構(gòu)、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律。應(yīng)用各種技術(shù)來研究蛋白質(zhì)組的一門新興科、電場(chǎng)下對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行等電聚焦(IEF),再在第一向垂直方向上進(jìn)行第二向SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳SDS)。 生物:通過將大量的特異性分子固定到固相支持物上,再與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)行雜交，通過檢每個(gè)分子19、技術(shù)：通過微陣列技術(shù),將高密度DNA片段陣列通過高速機(jī)器人或原位合成方式以一定的順序使20、生物信息學(xué)：是一門交叉科學(xué)，它包含了生物信息的獲取、加工、、分配、分析、解釋等在內(nèi)的所有（HGP，21、RFLP：用于分析相關(guān)多態(tài)性的技術(shù)。即用同一種限制性內(nèi)切酶，完全酶切來源于同一物種不同的基DNA，DNA22、SNP：DNADNA的某一位點(diǎn)處的核苷酸，A、T、G、C都有可能出現(xiàn)而且概率均大于1%，稱之。SNP最多四種，但人類組很大，平均每1000對(duì)就有一個(gè)。SNPDNA EST：從互補(bǔ)DNA(cDNA)分子所測(cè)得部分序列的短段DNA(通常300~500bp)?；驹恚旱鞍踪|(zhì)推測(cè)mRNA的序列，mRNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后利用其與所列進(jìn)行雜交，鑒別出與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的。組可由DNA組成，也可由RNA組成，但不能共存于同一。DNA：多數(shù)為雙鏈(ds)、環(huán)狀或線性；RNAmRNA。二、試述原核組結(jié)構(gòu)與功能的特點(diǎn)色體。細(xì)菌DNA在胞內(nèi)形成一個(gè)致密區(qū)域，即類核（nucleoid，類核無核膜將之與胞漿分開。結(jié) 無現(xiàn)象 在原核生物組中含有編碼同工酶的在不同原核生物組中GC含量變化很大除細(xì)菌外，還有能自主的雙鏈環(huán)狀DNA分子，稱為質(zhì)粒。3、不存在子結(jié)構(gòu)，功能相關(guān)分散在不同的上。都由一個(gè)結(jié)構(gòu)與相關(guān)的調(diào)控區(qū)組成，轉(zhuǎn)mRNA<103子使外顯子拼接，才能形成成mRNA。7、功能相關(guān)的構(gòu)成各種，它們可串聯(lián)在一起，亦可相距很遠(yuǎn)，但即使串聯(lián)在一起的成簇的也是分8、組中也存在一些可移動(dòng)的遺傳因素，這些DNA順序并無明顯生物學(xué)功能，似乎為自己的目的而組織，故有自私DNA之稱，其移動(dòng)多被RNA介導(dǎo)（如在哺乳動(dòng)物及人類組中發(fā)現(xiàn)的逆轉(zhuǎn)座子，也有被DNA介導(dǎo)的（如在果蠅DNA。四、試述人類組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)3、編碼序列只占組總DNA量的5%以下，非編碼區(qū)占95%以上，大量為重復(fù)序列。構(gòu)建BAC克隆；限制性酶處理獲得；根據(jù)方法組建BAC克隆群；根據(jù)STS標(biāo)記,將BAC克隆群標(biāo)定在物理圖上；每個(gè)BAC克隆內(nèi)部采用鳥槍法,組裝；將BAC插入順序與BAC克隆 群六、試述RNA研究領(lǐng)域有何新發(fā)現(xiàn)完全沒有蛋白質(zhì)的電子云存在。說明肽健的形成是由ｒRNA2、RNAФ29RNA（pRNA）裝配成分子馬達(dá)，依賴此分子馬達(dá)的轉(zhuǎn)動(dòng)，將噬菌體DNA裝入外殼。3、RNA具調(diào)控功能：①女性Xist編碼不表達(dá)蛋白質(zhì)的RNA，它與２條X中的一條結(jié)合，使其失活。②細(xì)胞時(shí)，DNA每一次，端粒DNA縮短點(diǎn)，直到端粒全部。此時(shí)細(xì)胞再也不能，?？烧f是端粒RNA，控制了細(xì)胞的和的發(fā)生。4、RNA調(diào)控遺傳信息：通過"再編碼"的方式或不同方式的RNA剪接，－種可在不同的發(fā)育分化階段、不同的生理病理?xiàng)l件或不同的細(xì)胞、組織中合成不同的蛋白質(zhì)。RNA編輯是以另一RNA為模板來修飾ｍRNA前體，可以給ｍRNA前6、RNA攜帶遺傳信息：HIV（、丙肝（肝癌）等是RNA8、組研究中的“”可能是RNA七、試從結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及作用機(jī)制比較siRNA和miRNA的差異前 內(nèi)源或外源長雙鏈RNA誘導(dǎo)內(nèi)源發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)產(chǎn) 產(chǎn)結(jié) 雙鏈分功 降解 八、試比較轉(zhuǎn)錄組和組的區(qū)別40%左右。代謝物的種類要遠(yuǎn)小于和蛋白的數(shù)目，每個(gè)生物體中代謝產(chǎn)物大103數(shù)量級(jí)，細(xì)菌組中幾千導(dǎo)致代謝物的化學(xué)復(fù)雜性。技術(shù)難題：代謝組學(xué)中的主要技術(shù)難點(diǎn)在于分析物濃度的動(dòng)態(tài)范圍？（ml2）提高的倍數(shù)：是表示提純方法有效的程度，比較每一步純化的效率。純化倍數(shù)是指提純前后比之比，pH十二、試述酶測(cè)定中常用的對(duì)照方法。測(cè)定管中產(chǎn)物量須減去照管中產(chǎn)物量是正由酶促應(yīng)所生的產(chǎn)物白管和照管易空管”“”。制劑與酶接觸時(shí)間而增大。按照抑制劑對(duì)酶作用時(shí)選擇性不同，又將不可逆的抑制劑分為專一性和非專一性的。Ks型不可逆抑制劑；是根據(jù)底物的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的，具有和底物相似的結(jié)構(gòu)，可和相應(yīng)的酶結(jié)合，同時(shí)還帶有一Kcat型不可逆抑制劑；是根據(jù)酶催化過程設(shè)計(jì)的，具有和底物相似的被酶結(jié)合和被酶催化反應(yīng)的性質(zhì)，還1、競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑(competitiveIESVmKm增大低，KmESISEII和E，Vm，Km一.表達(dá)調(diào)控的基本方式1、組成型表達(dá)（constitutivegene：組蛋白、核糖體蛋白、糖酵解酶（基原表答、基原；持續(xù)性、恒定表達(dá)誘導(dǎo)表達(dá)(induction)：在特定環(huán)境因素下，激活蛋白被激活，表達(dá)產(chǎn)物水平增高的表達(dá)。阻遏表達(dá)(repression)：在特定環(huán)境因素下，阻遏蛋白被激活，表達(dá)產(chǎn)物水平減少的表達(dá)。組突變：DNA調(diào)控序列突變，使適應(yīng)性表達(dá)轉(zhuǎn)變?yōu)榻M表達(dá)，這種突變稱之。3(coordinate順式調(diào)節(jié)：調(diào)控蛋白結(jié)合自身的DNA調(diào)控序列，調(diào)節(jié)自身的表達(dá)，為分子內(nèi)調(diào)節(jié)方式，稱為順式(cis)反式調(diào)節(jié)：調(diào)控蛋白特異識(shí)別、結(jié)合另一的DNA調(diào)控序列，調(diào)節(jié)另一的開啟和關(guān)閉，為分子間的調(diào)節(jié)二.乳糖子表達(dá)調(diào)控機(jī)制CAPGAC↓→cAMP↓→CAPGAC↑→cAMP↑→CAP↑→CAPCAPsite協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):低乳糖，低G：CAP能與CAPsite結(jié)合,促進(jìn)表達(dá)，但阻遏蛋白與結(jié)合—不表達(dá)；低乳糖，高G：CAP與CAPsite結(jié)合少,基礎(chǔ)表達(dá)，且阻遏蛋白與結(jié)合—不表達(dá)；高乳糖，高G：CAPCAPsite結(jié)合少,基礎(chǔ)表達(dá)，阻遏蛋白與別乳糖結(jié)合——基礎(chǔ)表達(dá)；高乳糖，低G：CAPCAPsitetrpO色氨酸濃度高：前導(dǎo)序列延長到終止子，核糖體通過1區(qū)，終止2區(qū)前，覆蓋2區(qū)。不能形成2/3發(fā)夾結(jié)構(gòu)?？梢孕纬?/4發(fā)夾結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄終止。Trp結(jié)構(gòu)不表達(dá)。色氨酸濃度低：前導(dǎo)序列翻譯終止在Trp子核糖體不能覆蓋2區(qū)形成2/3發(fā)夾結(jié)構(gòu)，不能形成3/4發(fā)夾結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄不終止。Trp結(jié)構(gòu)表達(dá)。四.順式作用元件分類及其在真核表達(dá)調(diào)控中的作用：：啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)及其上游200bp。啟動(dòng)子元件：7～20bp。分為啟動(dòng)子、啟動(dòng)子上游元件UPE。前者結(jié)合通用轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶,決定轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)。UPE與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，調(diào)節(jié)啟動(dòng)子與通用轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合，影響RNA聚合酶作用，增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄效率。：：（enhancer點(diǎn)：序列長度:在100～200bp之間多個(gè)短序列組成:對(duì)堿基順序有嚴(yán)格要求序列:8～12bp組成回文結(jié)構(gòu):部分序列的特征。間。③無定位（silncer淋巴細(xì)胞T抗原受體T淋巴細(xì)胞輔助受體CD4/CD8等③有些DNA序列既有增強(qiáng)子作用也有沉默子作用，（insulator沒有正或負(fù)的調(diào)控作用。絕緣子增強(qiáng)子活性五.增強(qiáng)子及其結(jié)構(gòu)和作用特點(diǎn)序列長度:100～200bp多個(gè)短序列組成:對(duì)堿基順序有嚴(yán)格要求序列:8～12bp組成。回文結(jié)構(gòu):部分序列的特征。具有組織特異性或細(xì)胞特異性，一個(gè)可以受一個(gè)以上的增強(qiáng)子調(diào)控?；A(chǔ)轉(zhuǎn)錄因子：每一RNApol啟動(dòng)子都需要的調(diào)控蛋白，又稱通用轉(zhuǎn)錄因子，參與RNApolⅡ轉(zhuǎn)錄的是通用轉(zhuǎn)錄Ⅱ（TFⅡ強(qiáng)子要求有不同的激活蛋白。激活蛋白與增強(qiáng)子結(jié)合的遠(yuǎn)距離作用：DNA鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，或成環(huán)，使各種（coactivatorsa.活化蛋白(轉(zhuǎn)錄因子)結(jié)合；c.ATPATP，提供能量；甲基化程度與表達(dá)活性呈反比關(guān)系DNADNADNADNADNAH3-H4H3-H4八、siRNAmiRNAsiRNARNaseⅢ(DicerdsRNAsiRNAcomplexRISC5、RISC的解旋酶解開siRNA雙鏈，靶mRNA與正義siRNA進(jìn)行交換，與反義siRNA特異識(shí)別結(jié)合。RNAi有相當(dāng)?shù)男?yīng)，而且特異性更好，所需有效濃度更低。目前，體外合成的siRNA已成為研miRNA，屬非蛋白質(zhì)編碼miRNA初級(jí)產(chǎn)物(pri-miRNA)：發(fā)夾結(jié)構(gòu)RNA前體(porin（p5雙鏈)：胞漿mRNA：RISC中miRNAmRNAmRNA⑶對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)SHSH:Src蛋白同源區(qū)，Src蛋白是src表達(dá)的1種膜蛋白,含3個(gè)SHSH1：Tyr22二、信號(hào)分子：cAMP、cGMP、DAG(二?；视?、IP3(1,4,5Ca2+、NO。GGAC、AC-cAMP-PKA→G蛋白耦聯(lián)受體→G蛋白→腺苷酸環(huán)化酶→cAMP→cAMP的蛋白激酶A→調(diào)控蛋白→轉(zhuǎn)錄PLC-IP3/DAG-PKCII三.參與酶偶聯(lián)受體的酶有那些，介導(dǎo)哪些信號(hào)途徑及其轉(zhuǎn)導(dǎo)基本途徑。 蛋白酪氨酸激酶受體信號(hào)傳導(dǎo)途徑EGF→TKR→Ras→MAPKJanus激酶(JAK-STAT途徑) Ras受體酪氨酸激酶（RPTK）結(jié)合信號(hào)分子，形成二聚體，并發(fā)生自磷酸化而活化，活化的RPTKRAS，由活化的RAS引起蛋白激酶的磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)。RasGDPGTP的釋放需要鳥苷酸交換因子（GEF，如Sos）SH3結(jié)構(gòu)域，但沒有SH2結(jié)構(gòu)域，因此不能直接和受體結(jié)合，需要接頭蛋白（如Grb2）的連接，接頭蛋白SH2與受體的磷酸酪氨酸殘基結(jié)合，再通過SH3SosSosRas接觸，從而活化RasRasGTPGTP酶活化蛋白（GAP）的參與，使RasGTP水解而失活，GAPSH2結(jié)構(gòu)域可直接與活化的受體結(jié)合。RasRafN端結(jié)構(gòu)域結(jié)合并使其激活，Raf是絲氨酸/蘇氨酸（Ser/Thr）蛋白激酶（又稱活化的Raf結(jié)合并磷酸化另一種蛋白激酶MAPKK，使其活化。MAPKKMAPK的蘇氨酸和酪氨酸殘基使之激活。MAPK為有 原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK），屬絲氨酸/蘇氨酸殘激酶?；罨腗APK進(jìn)入細(xì)胞核，可使許多轉(zhuǎn)錄因子活化，如將Elk-1激活，促進(jìn)c-fos，c-jun的表達(dá)。RPTK-Ras信號(hào)通路可概括如下：配體→RPTK→adaptor→GEF→Ras→Raf（配體→RPTK→adaptor→GEF→Ras→Raf（MAPKKK）→MAPKK→MAPK表JAK-STATJAK:JAKTyrJAKTyr,STATSTATJAKSTATTyrTGF-βTβR-Ⅱ結(jié)絲氨酸/蘇氨酸磷酸化而使TβR-Ⅰ激活，活化的SmadDNA上的Smad結(jié)合元件結(jié)合，激活特定的靶基因。Smad6和Smad7通過Smad2和Smad3Smads轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的形成來抑制TGF-β 進(jìn)行等電聚焦(IEF),再在第一向垂直方向上進(jìn)行第二向SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)。10～100kD分子量的蛋白質(zhì)；高靈敏度和高分辨率；便于計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像分析處理；與質(zhì)MS/MS電泳CE。（M+能提供的信息：12、分子式（樣品的元素組成）345、人機(jī)回答，三個(gè)基本因素：1、在噬菌體PⅢ和PⅧ衣殼蛋白N端插入外源待篩編碼的蛋白，形成的融合蛋白表達(dá)在噬菌體菌體的表面，其編碼、可通過分泌型噬菌體的單鏈DNA推導(dǎo)出來蛋白文庫4、改造和提高蛋白質(zhì)的生物學(xué)和免疫學(xué)特性5、研究新型多肽藥物、和抗體6、研究涉及到蛋（三胞裂解液過柱，先用低鹽溶液洗脫下未結(jié)合的蛋白質(zhì)，然后用高鹽溶液或SDS溶液洗脫結(jié)合在柱子上的蛋白一.簡述技術(shù)的概念和主要特點(diǎn)DNA二.試述生物制作方法和分析過程。制作方法：光刻DNA三.簡述的優(yōu)缺點(diǎn)和主要應(yīng)用領(lǐng)域。傳統(tǒng)方法檢測(cè)眾多要經(jīng)歷多次實(shí)驗(yàn)而且自動(dòng)化程度低，因而每次實(shí)驗(yàn)之間是存在系統(tǒng)誤差的可以克。表達(dá)檢測(cè)擬南芥、酵母表達(dá)研究等DNA序列測(cè)定人類組計(jì)劃、雜交等藥物篩選在水平上尋找藥物靶標(biāo)等文庫作圖通過確定克隆的次序從而對(duì)酵母組進(jìn)行作圖。四試述原位光蝕刻合成技術(shù) 在合成堿基單體的5'羥基末端連上一個(gè)光敏保護(hù)5'端保護(hù)的核苷酸單體連接上去，這個(gè)五試述應(yīng)用Geospiza對(duì)表達(dá)譜進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘的主要流程輸入http: 4，QuickLoadWizard、AdvancedUploadMetho