毛細(xì)管電色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)展課件

毛細(xì)管電泳—質(zhì)譜

聯(lián)用技術(shù)進(jìn)展報告人：焦銘指導(dǎo)教師：梁毅教授CE的優(yōu)點樣品操作和進(jìn)樣自動化更加容易可以直接采用紫外吸收及熒光發(fā)射檢測器進(jìn)行在線檢測進(jìn)樣量和消耗溶劑少對比液相層析而言，CE的峰型比較尖銳，質(zhì)量靈敏度也常常要高得多盡管CE的多功能性、高分辨率和高速度使它在多個領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，但是其檢測方法的局限性限制了它在這些領(lǐng)域研究中的進(jìn)一步深入。質(zhì)譜(MS)除了可以提供分子質(zhì)量信息外，還可提供結(jié)構(gòu)信息，具有很高的選擇性和靈敏度。將CE和MS聯(lián)用可實現(xiàn)高效分離和高靈敏、富含信息的檢測。CE的分離基于溶液中離子的不同遷移率，而MS則根據(jù)離子在氣相中的質(zhì)荷比(m/z)來分析離子——這兩種高度正交化的分析方法分別利用了在兩種截然不同的環(huán)境中的離子遷移運(yùn)動。把分離技術(shù)和質(zhì)譜聯(lián)用還可以顯著提高檢測極限并且簡化對分析結(jié)果的解析過程。聯(lián)用需要解決的問題首先，CE/MS必須同時建立起CE的電場梯度和ESI的高壓其次，CE/MS的接口必須與CE的低流速相容第三，要避免任何可能由毛細(xì)管兩端壓力差造成層流而引起的峰型變寬聯(lián)用類型電噴霧離子化(ESI)基質(zhì)輔助激光解吸離子化(MALDI)連續(xù)流快原子轟擊離子化(CF-FAB)三級四級桿(TQ)傅立葉轉(zhuǎn)換離子回旋共振(FTICR)離子陷(IT)飛行時間(TOF)接口類型鞘流液接口液－液連接接口無鞘流液接口ESI發(fā)射毛細(xì)管可以很容易地被更換，從而延長了使用壽命。這種接口可以適應(yīng)多種不同流速條件，而且在柱后引入緩沖液使得在選擇緩沖液的適當(dāng)pH值、組成和流速以優(yōu)化ESI效果方面具有很大的自由度。CE分離管和ESI發(fā)射管之間的不良安裝將直接導(dǎo)致峰型變寬和分離效率的損失。液－液連接處的溶液混合或流速過低可能造成峰型變寬和背景噪聲。CE/MS的限制性因素在不降低分離效率的前提下它所能分析的樣品體積極為有限——預(yù)濃縮遷移時間隨著環(huán)境溫度的變化而波動——適當(dāng)加入內(nèi)標(biāo)避免使用非揮發(fā)性的緩沖液成分——靈敏度限制和離子源堵塞分析方法的改進(jìn)通過等速電泳(CITP)進(jìn)行在線預(yù)濃縮——CITP和CZE的有效結(jié)合通過層析方法進(jìn)行在線預(yù)濃縮——抽提分析物，可以達(dá)到amol/ul的濃度極限使用內(nèi)徑較小的毛細(xì)管——防止毛細(xì)管堵塞使用減小流出速度進(jìn)行檢測的方法——峰停留，增加MS分析多肽的數(shù)目展望CE是目前為止分辨率最高的一維分離技術(shù)，而MS則是目前最靈敏的檢測技術(shù)，而且MS還能提供豐富而精確的結(jié)構(gòu)信息，這二者的結(jié)合所產(chǎn)生的巨大能量是可以想象的。在線預(yù)濃縮方法的產(chǎn)生解決了CE上樣量小的問題；多種高效率接口的研制和應(yīng)用極大程度地提高了CE向MS的離子轉(zhuǎn)移效率；多種CE分離形式為不同物質(zhì)的分析提供了極大的自由度；各種新型M