堿性磷酸酶Km值的課件_第1頁(yè)
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堿性磷酸酶Km值的測(cè)定底物濃度酶濃度pH溫度激活劑抑制劑※研究一種因素的影響時(shí)，其余各因素均恒定。影響酶促反應(yīng)的因素底物濃度對(duì)反應(yīng)速率影響在其他因素不變的情況下，底物濃度對(duì)反應(yīng)速率的影響呈矩形雙曲線關(guān)系。[S]V

Km值①Km等于酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。②意義：a)

Km是酶的特征性常數(shù)之一；b)

Km可近似表示酶對(duì)底物的親和力；c)

同一酶對(duì)于不同底物有不同的Km值。KmKm＝[S]2＝Km+[S]VmaxVmax[S]VmaxV[S]KmVmax/2雙倒數(shù)作圖法Vmax[S]Km+[S]V=（林－貝氏方程）+1/V=KmVmax1/Vmax1/[S]兩邊同取倒數(shù)Ｋm值與Ｖmax值的測(cè)定注意事項(xiàng)1底物和酶取樣準(zhǔn)確2保溫時(shí)間準(zhǔn)確

1234567加入酶的時(shí)間加入堿性溶液終止反應(yīng)的時(shí)間9:00:009:00:309:01:309:02:009:02:309:03:009:01:009:15:009:15:309:16:009:16:309:17:009:17:309:18:00保證每個(gè)試管的反應(yīng)時(shí)間為15分鐘注意事項(xiàng)1做如下表格2可電腦作圖3若人工作圖，在坐標(biāo)軸上禁止出現(xiàn)分?jǐn)?shù)(1/2,1/16)4實(shí)驗(yàn)的最終目的是測(cè)得Km值，因此實(shí)驗(yàn)報(bào)告最終必須得出結(jié)論：Km值等于多

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