消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全課件

第3章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全消毒滅菌常用術語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物

的方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的

病原微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細菌

生長繁殖的方法。清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污

穢以減少微生物數(shù)量的過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的

意思，多是滅菌的結果。防止細菌進入人體

或其它物品的操作技術，稱為無菌操作。一、物理消毒滅菌法

（一）熱力滅菌法

1.干熱滅菌法

焚燒；燒灼；干烤；紅外線

2.濕熱滅菌法

巴氏消毒法(pasteurization)；煮沸

法；流動蒸汽消毒法；間歇蒸汽滅菌

法(fractionalsterilization)；高壓蒸

汽滅菌法(autoclaving)第一節(jié)消毒滅菌的方法同溫下，濕熱比干熱滅菌好的原因：1.細菌蛋白質(zhì)在有水的情況下易于凝固變性2.濕熱穿透力強3.濕熱蒸汽有潛熱存在

（二）輻射殺菌法

1.紫外線

2.電離輻射

3.微波（microwave）

（三）濾過除菌法

1.濾菌器(filter）

液體除菌

2.空氣除菌采用生物潔凈技術

（四）干燥與低溫抑菌法濾器和層流室二、化學消毒滅菌法（一）高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑；

3.醛類消毒劑；4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑（intermediate-leveldisinfectants）

1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）低效消毒劑（low-leveldisinfectants）

1.季銨鹽類；2.氯已定；3.高錳酸鉀第四節(jié)病原微生物實驗室生物安全

生物安全（biosafety）是生物技術安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。

狹義地指現(xiàn)代生物技術的研究、開發(fā)、應用及轉(zhuǎn)基因生物可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。

廣義地指與生物有關的各種因素對社會、經(jīng)濟、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風險。

病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會所面臨的最現(xiàn)實的生物安全問題。

病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。

關于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任等。

EboraSmallpox第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。

Theplague一、病原微生物的分類

第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。

第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。

二、病原微生物實驗室的分級級別處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴重危害，具有有效的預防和治療措施。三級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施。四級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預防治療措施。BSL-1:防止節(jié)肢動物和嚙齒類動物進入BSL-2:基本要求與條件同BSL-1,但要求配備高壓滅菌設備,專用焚燒爐,應急噴淋設備.工作人員著專用工作服戴乳膠手套.BSL-3:建筑物中的可隔離區(qū)或獨立建筑物.分清潔區(qū),半污染區(qū)和污染區(qū),各區(qū)之間設緩沖間.有獨立負壓保護通風系統(tǒng).BSL-4:遠離人口密集區(qū)的獨立建筑.布局與BSL-3基本相同,但排風裝置必須雙重過濾.實驗室概況—布局及流程??個人防護裝備裝備包括：

1、眼鏡（安全鏡、護目鏡）

2、口罩、面罩、防毒面具

3、帽子

4、防護衣5、手套

6、鞋套

7、聽力保護器等。防護面罩個人防護裝備裝備包括：

1、眼鏡（安全鏡、護目鏡）

2、口罩、面罩、防毒面具

3、帽子

4、防護衣5、手套

6、鞋套

7、聽力保護器等。法國里昂MerieuxBL4實驗室BL4Labs三、實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任

實驗室感染的歷史與現(xiàn)狀?有記載的首例實驗室感染可能是1826年由聽診器發(fā)明者、法國醫(yī)生Laennec描述,他本人在接觸結核病患者的椎骨后,左手食指感染皮膚結核。?有記載的首例實驗室感染死亡病例可能是1849年維也納1名醫(yī)生,他在解剖1例患產(chǎn)褥敗血癥的死亡病例時劃破手指而發(fā)病死亡。?

1898年維也納1名動物飼養(yǎng)員因處理患皮膚鼠疫的豚鼠而發(fā)生肺鼠疫死亡,并導致1名醫(yī)生和1名護士感染而死亡。?此后,世界各地先后報道多次實驗室感染,感染的病原微生物種類至少有159種,感染例數(shù)達6000例以上。實驗室感染的歷史與現(xiàn)狀病毒所致的實驗室感染屢見不鮮：?從1983年發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒(HIV)至1995年,至少有39人在實驗室感染了HIV。?最近,美國187名從事猿猴泡沫病毒研究的人員中發(fā)現(xiàn)10例感染者。實驗室感染的歷史與現(xiàn)狀?

2002年美國發(fā)生2例西尼羅病毒實驗室感染。?

2004年4月,我國臺灣中部1名學生因感染保存于實驗室的登革病毒而發(fā)病。?2003年7月全球控制SARS流行后至今,在新加坡、我國臺灣和北京先后發(fā)生實驗室SARS冠狀病毒感染。

實驗室感染的歷史與現(xiàn)狀實驗室感染可間接傳播至社區(qū)人群：?

1992年，荷蘭從1名兒童體內(nèi)分離出1株脊髓灰質(zhì)炎疫苗病毒,該兒童的父親在工作中曾意外接觸過大量脊髓灰質(zhì)炎疫苗病毒。?

2002年11月至2003年3月，印度西部地區(qū)從7例脊髓灰質(zhì)炎患者體內(nèi)分離到Ⅱ型實驗室標準株,推測可能為實驗室感染。實驗室感染的歷史與現(xiàn)狀實驗室相關感染的原因

接觸感染材料（傾倒、濺開）針頭刺傷破碎玻璃器皿損傷被感染的動物或昆蟲咬傷、抓傷

感染微生物氣溶膠

氣溶膠

是指懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001-100μm的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。?無色無味，無孔不入，不易發(fā)現(xiàn)，難以預防;?容易發(fā)生病原體在人與人、人與動物、動物與動物之間的傳播;?可以遠距離或較遠距離傳播;?與自然感染相比，有些微生物氣溶膠引起感染的癥狀不典型，病程復雜，難發(fā)及時診治，影響預后。

微生物氣溶膠特點：可產(chǎn)生氣溶膠的實驗室操作輕度（<10個顆粒）中度（11－100個顆粒）重度（>100個顆粒）玻片凝集實驗傾倒細菌火焰燒灼接種環(huán)顱內(nèi)接種雞胚接種或抽取培養(yǎng)液豚鼠腹腔接種，局部不用消毒劑2.實驗動物尸體解剖3.乳缽研磨感染材料4.離心前后注入、傾倒、混懸菌液5.菌液滴落在不同的表面上6.接種環(huán)接種平皿、試管等7.用注射器由疫苗瓶抽取菌液離心時離心管破碎打開或打碎干燥菌種管3.攪拌后立即打開攪拌器蓋4.小白鼠鼻腔接種5.注射器針頭脫落噴出菌液6.刷衣服、拍打衣服

實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。

實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，預防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；②開展流行病學調(diào)查；③對病人進行隔離治療，對相關人員進行醫(yī)學檢查；④對密切接觸者進行醫(yī)學觀察；⑤進行現(xiàn)場消毒；⑥對染疫