消毒滅菌與病原微生物課件

第3章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全Sec.1消毒滅菌的常用術(shù)語***滅菌(sterilization)

殺滅物體上所有微生物的方法，包括殺滅細(xì)菌芽胞、病毒、霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。***消毒(disinfection)

殺滅物體或環(huán)境中的病原微生物。但不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。用以消毒的藥品稱為消毒劑。

無菌

(asepsis)

不存在任何活菌、多是滅菌的結(jié)果。**無菌操作(antisepsistechnique)

防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。Sec.2消毒滅菌的方法

物理消毒滅菌法

化學(xué)消毒滅菌法一、

物理消毒滅菌法

（一）熱力滅菌法：干熱、濕熱。（二）輻射殺菌法（三）濾過除菌法（四）干燥和低溫抑菌法焚燒用于廢棄物品或動物尸體等燒灼用于接種環(huán)、試管口等的滅菌。干烤171℃/1h或160℃/2h。紅外線0.77～1000μm

波長的電磁波，以1～10μm波長的熱效應(yīng)最強(qiáng)。……1.干熱滅菌法高壓蒸汽滅菌器濕熱滅菌效果為何優(yōu)于干熱滅菌？原因：①濕熱中細(xì)菌菌體蛋白質(zhì)較易凝固變性②濕熱的穿透力比干熱大③濕熱的蒸氣有潛熱效應(yīng)存在。紫外線殺菌試驗紫外燈下50cm處照射30min37℃24h照射后培養(yǎng)結(jié)果觀察

紫外線

波長

240~300nm的紫外線具有殺菌作用，其中以265~266nm最強(qiáng)。

***殺菌機(jī)制主要作用于DNA，形成二聚體，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的變異或死亡。

特點紫外線穿透力較弱，一般只用于手術(shù)室等的空氣消毒，或用于不耐熱物品的表面消毒。紫外線對人體皮膚、眼睛有損傷作用。

2.電離輻射（包括高速電子、β射線和γ射線）具有較高的能量和穿透力，對微生物有致死作用。常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒；亦可用于食品、藥品和生物制品的消毒或滅菌。（三）濾過除菌法

器具：濾菌器用途：不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。

薄膜濾菌器：硝基纖維素膜層流室

（四）干燥和低溫抑菌法有些細(xì)菌的繁殖體在空氣中干燥時會很快死亡,干燥法常用于保存食物。低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，故常用作保存細(xì)菌菌種。為避免解凍時對細(xì)菌的損傷，可在低溫狀態(tài)下真空抽去水分，此方法稱為冷凍真空干燥法。該法是目前保存菌種的最好方法。二、化學(xué)消毒滅菌法

許多化學(xué)藥物能影響細(xì)菌的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活動，從而發(fā)揮防腐、消毒甚至殺菌作用。這些化學(xué)藥物稱為化學(xué)消毒劑。一般對人體組織有害，只能外用或用于環(huán)境的消毒。***化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制

①促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固如酚類、醇類、重金屬鹽類、酸堿類、醛類等

②干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝

破壞蛋白與核酸的基團(tuán)，如某些氧化重金屬鹽類與細(xì)菌蛋白的-SH基結(jié)合；

③損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜

如酚類、表面活性劑、脂溶劑等能降低細(xì)菌胞膜和病毒包膜的表面張力并增加其通透性。中效消毒劑不能殺滅芽胞，能殺滅繁殖體、真菌和大多數(shù)病毒內(nèi)窺鏡,喉鏡,陰道窺器，麻醉器材,皮膚粘膜消毒。含碘消毒劑:碘酊,碘伏:沉淀蛋白,氧化殺菌,皮膚、體溫計。醇類消毒劑:乙醇:70-75%,皮膚粘膜消毒。異丙醇:作用強(qiáng),毒性強(qiáng),器材體溫計。低效消毒劑可殺滅多數(shù)繁殖體，不能殺滅芽胞、結(jié)核分枝桿菌及某些抵抗力強(qiáng)的真菌和病毒。季銨鹽類消毒劑新潔爾滅:表面活性劑,清潔作用。皮膚粘膜,地面。氯已定洗必泰:皮膚粘膜,地面。高錳酸鉀氧化殺菌作用皮膚粘膜,餐具,水果,蔬菜消毒一醫(yī)療器械物品的消毒滅菌高危器械物品

注射器,手術(shù)器械,注射液體,導(dǎo)管進(jìn)入無菌組織物品。滅菌使用。

中危器械物品

呼吸機(jī),麻醉機(jī),胃鏡,支氣管鏡,體溫計接觸黏膜。消毒使用。低危器械物品

治療盤,食品器皿,便盆用后清洗,消毒即可?？焖僦苻D(zhuǎn)醫(yī)療器械

內(nèi)窺鏡,牙科器械等。瞬時滅菌、微波滅菌等。二室內(nèi)空氣消毒滅菌物理消毒紫外線照射

1.5w/m31hr,空氣物體表面。濾過除菌法

0.2um高效過濾,除去塵埃?；瘜W(xué)消毒過氧乙酸噴霧

0.5%水溶液30ml/m31hr。過氧化氫噴霧

0.3%溶液,30ml/m31hr。二氧化氯熏蒸

水溶解飽合液自然逸散。中藥煙熏手和皮膚的消毒醫(yī)護(hù)人員帶菌,院內(nèi)感染重要途徑,30%。勤洗手,會洗手,肥皂,水;乙醇,次氯酸鈉。粘膜的消毒

口腔-過氧化氫,泌尿-氯已定。病人排泄物分泌消毒

糞尿膿痰,次氯酸鈉2h。病人污染物品

蒸,煮,熏,擦;過氧乙酸浸泡,燒。飲用水消毒

氯氣消毒,或漂白粉。環(huán)境消毒

房間-過氧乙酸噴灑,廁所-生石灰,污水-氯。Sec.4影響消毒滅菌效果的因素微生物種類

微生物的物理狀態(tài)營養(yǎng)缺陷下生長的微生物抵抗力強(qiáng)。數(shù)量消毒劑的性質(zhì),濃度,作用時間表面活性劑對G-效果好,芽孢菌,真菌無效。濃度高比低效果好,但乙醇70-75%最好溫度,酸堿度,有機(jī)物顯著影響消毒劑的效果。

二、微生物的種類與數(shù)量

1.不同微生物對不同化學(xué)消毒劑的敏感性不同。

2.同一消毒劑對不同微生物的殺菌效果不同。

3.微生物的數(shù)量越大，所需消毒的時間就越長

三、溫度消毒劑的殺菌作用實質(zhì)是化學(xué)反應(yīng)，其反應(yīng)速度隨溫度升高而加快。因此，溫度升高可提高消毒效果。四、酸堿度消毒劑的殺菌作用受酸堿度的影響。（戊二醛溶液中加入碳酸氫鈉后才有殺菌作用。）

五、有機(jī)物

環(huán)境中有機(jī)物的存在，能夠影響消毒劑的效果Sec.5病原微生物實驗室生物安全

病原微生物所致的安全問題:

實驗室的安全隱患,生物武器,生物恐怖,重大傳染病的暴發(fā)流行。核心是防擴(kuò)散和防感染。我國法令包括:病原微生物的分類管理,實驗室的分級管理,實驗室感染的控制,監(jiān)督和法律責(zé)任。

一、病原微生物的分類

第一類：能夠引起人類或動物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)宣布消滅的微生物。天花病毒、埃博拉病毒、新疆出血熱病毒等

第二類：能夠引起人類或動物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。漢坦病毒、艾滋病毒、狂犬病毒霍亂弧菌、結(jié)核桿菌、鼠疫桿菌等

第三類：能夠引起人類或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險有限，實驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，且具備有效的治療和預(yù)防措施的微生物。肝炎病毒、皰疹病毒、流感病毒、腦膜炎球菌等

第四類：通常情況下不會引起人類或動物疾病的微生物。

小鼠白血病病毒級別處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。三級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。病原微生物實驗室的分級

一級、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。

三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。

高致病性病原微生物實驗,２人以上共同進(jìn)行一個實驗室,只能從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實驗。有健全安全保衛(wèi)制度三、實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任

實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。

實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，預(yù)防控制措施：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場所；②開展流行病學(xué)調(diào)查；③對病人進(jìn)行隔離治療，對相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查；④對密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察；⑤進(jìn)行現(xiàn)場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。20世紀(jì)40年代，美國為了研究生物武器，開始實施“氣溶膠感染計劃”，大量使用烈性傳染病病原體，實驗室感染事件頻頻發(fā)生。二戰(zhàn)期間，日本軍國主義在對中國實施慘無人道的細(xì)菌戰(zhàn)中，他們實驗室里的工作人員也有很多人受到感染，死傷上千人。

1978年英國伯明翰醫(yī)學(xué)院發(fā)生實驗室感染天花事件，1人死亡。上世紀(jì)80年代，前蘇聯(lián)生物武器研究基地炭疽桿菌泄露造成上千人的感染死傷事件。2001年以來在美國境內(nèi)屢屢制造恐慌的炭疽，后來經(jīng)美國權(quán)威機(jī)構(gòu)鑒定是來自美國軍隊的生化實驗室。這一系列事件造成數(shù)人死亡、幾十人染病。2001年在英國波布特萊爾實驗室東北方向50公里的布倫特伍德地區(qū)首先發(fā)生了口蹄疫。據(jù)分析，口蹄疫病毒很可能就是從波布特萊爾實驗室里泄漏出來，從而造成了大規(guī)模的口蹄疫暴發(fā)。2003年1月11日，美國得克薩斯州工業(yè)大學(xué)的微生物學(xué)家巴特勒教授檢查實驗室的時候發(fā)現(xiàn)，實驗室中30份鼠疫桿菌樣本不翼而飛。2004年冬春之交，新加坡、我國臺灣及北京地區(qū)相繼發(fā)生實驗室SARS病毒泄漏，造成人員感染事件。

3月25日，在腹瀉病毒實驗室進(jìn)修的安徽醫(yī)科大學(xué)研究生宋某感到全身酸痛、發(fā)熱、身體不適。在不經(jīng)意中，她已感染了SARS病毒。由于從未接觸過這種致命的病毒，也沒有得到任何提醒，甚至在被自己傳染的母親去世后，宋某也沒有想到“非典”二字。又一