花粉生活力測定

湖北生物科技職業(yè)學(xué)院課 時(shí) 教 案講授人 張薇 課 時(shí) 學(xué)時(shí) 序 號課題內(nèi)容

實(shí)訓(xùn)一花粉生活力的測定

教學(xué)時(shí)間設(shè)計(jì)思路

先講后做，了解花粉生活力貯藏及生活力的測定方法和原理。學(xué)問目標(biāo)：把握花粉生活力測定的意義和測定方法教學(xué)目標(biāo) 力量目標(biāo)：會進(jìn)展花粉生活力的測定素養(yǎng)目標(biāo)：培育學(xué)生的團(tuán)隊(duì)精神和動手力量教學(xué)重、難點(diǎn)及解決方法

教學(xué)重點(diǎn)：花粉生活力測定的原理和意義。解決方法：通過多媒體結(jié)合案例講解后學(xué)生動手操作，教師指導(dǎo)。教學(xué)方法及手段 演示、學(xué)做多媒體課件、植物花粉、載玻片、蓋玻片、解剖針、毛筆、枯燥器、TTC教學(xué)預(yù)備講解花粉生活力測定的原理和方法教學(xué)過程及內(nèi)容實(shí)際操作蔗糖瓊脂培育法和染色法教學(xué)過程 教師活動 學(xué)生活動 教案設(shè)計(jì)說明 時(shí)間安排教學(xué)內(nèi)容

講解實(shí)訓(xùn)原理演示實(shí)訓(xùn)過程，布置實(shí)訓(xùn)任務(wù)

觀看多媒體

結(jié)合實(shí)訓(xùn)過程講解

20min教學(xué)內(nèi)容 指導(dǎo)實(shí)訓(xùn) 蔗糖瓊脂培育法 學(xué)生練習(xí)思考 90min教學(xué)內(nèi)容 指導(dǎo)實(shí)訓(xùn) 染色法 學(xué)生練習(xí)思考 45min記錄實(shí)訓(xùn)結(jié)果完成記錄實(shí)訓(xùn)結(jié)果完成教學(xué)內(nèi)容檢查實(shí)訓(xùn)內(nèi)容的把握25min實(shí)訓(xùn)報(bào)告教學(xué)反思湖北生物科技職業(yè)學(xué)院教案附頁一、花粉生活力測定的意義在園藝植物有性雜交工作中，常因雜交親本間花期不遇，或父本植株栽在異處(地)而必需預(yù)先收集花粉?；ǚ圪A藏在低溫(0～4℃)、枯燥(相對濕度0～40％)、黑暗的環(huán)境下，粉不能用于雜交，這對取得雜交效果有直接影響。二、實(shí)訓(xùn)材料及儀器藥品園藝植物的雄花、載玻片、蓋玻片、解剖針、毛筆、枯燥器、TTC三、花粉生活力的測定方法是將待測花粉直接授粉，然后統(tǒng)計(jì)結(jié)實(shí)率和結(jié)子數(shù)。此法的缺點(diǎn)是需時(shí)間較長，且試驗(yàn)結(jié)果易受氣候條件的影響；是將待測粉受到柱頭上，隔肯定時(shí)間切下柱頭，在顯微鏡下檢查花粉的萌發(fā)狀況，依據(jù)萌發(fā)率的凹凸來鑒定花粉的生命力；1％)25％左右，蘋果和梨10～15％，桃10％左右為宜。蔗糖濃度凹凸可調(diào)整培育基的滲透壓，以防止花粉在培育基上裂開。培育基以微酸性為宜，一般在pH5.2～6之間。發(fā)芽溫度在20～25℃左B1。麻煩，要有肯定設(shè)備和肯定時(shí)間。以促進(jìn)過氧化物(如HO)放氧分解。這些剛被放出的活性氧很簡潔使復(fù)原劑氧化。在本試驗(yàn)中所用的無色聯(lián)苯胺-萘酚都是復(fù)原劑，但他們被氧化后卻都表現(xiàn)紅色或玫瑰紅色。假設(shè)反映遲遲不能進(jìn)展，花粉也就保持原色。此色優(yōu)點(diǎn)是比較快捷，但比較間接。比較粗略，有時(shí)不能真實(shí)反映出有發(fā)芽力花粉的數(shù)量。四、實(shí)訓(xùn)步驟蔗糖瓊脂培育法培育基的配制：在100ml的蒸餾水中，參加瓊脂1g、蔗糖10～25g(因植物花粉種類而異)，置于燒杯中加熱煮沸，然后將該燒杯置水浴鍋或盛熱水的杯中備用，以防培育基冷卻凝固，適于羽衣甘藍(lán)花粉萌發(fā)的蔗糖濃度為150g/L，硼對促進(jìn)羽衣甘藍(lán)花粉萌發(fā)的20mg/L。發(fā)芽床的設(shè)置和播撒花粉：在蓋玻片上滴一滴培育基，用棉耳棒蘸上花粉少許，鏡下檢查花粉是否分布均勻，再將載玻片置入用濕紗布或濕濾紙墊底以保濕的大培育皿中，蓋上皿蓋。在各載玻片上貼上標(biāo)簽，注明花粉種類、采集時(shí)間、蔗糖濃度、播粉時(shí)間和操作25～28℃的溫箱中。播花粉后的檢查：在播花粉后，依據(jù)不同植物，經(jīng)不同時(shí)間，在顯微鏡下檢查花粉發(fā)芽狀況。3～4h后檢查，每次檢查3-5個(gè)視野，統(tǒng)計(jì)花粉總粒數(shù)和發(fā)芽粒數(shù)填寫下表?！不ǚ郯l(fā)芽以其花粉管伸長超過花粉直徑為標(biāo)準(zhǔn)〕本試驗(yàn)65100?；ǚ?，統(tǒng)計(jì)每種測定方法中具有生活力花粉的百分率，將觀看結(jié)果記入下表。蔗糖濃度 視野1視野2視野3視野4視野5花粉?；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿Ｃ劝l(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率花粉粒花粉?；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿Ｃ劝l(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)數(shù)萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率萌發(fā)率染色法TTC①原理：凡具有生活力的花粉，在其呼吸作用過程中都有氧化復(fù)原反響，TTC滲入有生活力的花粉時(shí)，花粉中TTCTTC變成三苯基甲(TTF)而呈紅色。②試液的配制Ⅰ.100ml0.832g的Na2HPO4·2H2O和0.273gKH2PO4pH7.17。放入棕色滴瓶內(nèi)，置于暗處。TTC為有毒性物質(zhì)，操作時(shí)應(yīng)留意安全。1～2滴的配制液，用鑷子使其混合后，蓋上蓋玻片。將此載玻片置于人工氣候箱中(35～40℃)約(100倍)下觀看，凡具有生活力的花粉粒呈紅色，其次呈淡紅色，失去生活力的和不育的花粉粒表現(xiàn)無色。過氧化物酶測定法①原理：具有生活力的花粉含有活潑的過氧化物酶，它能使過氧化物放出花粉有無生活力。②試液的配制50％酒精溶液中。Ⅱ.0.15100ml50％酒精溶液中。Ⅲ.0.25g100ml的蒸餾水中。以上三種溶液分別放入棕色瓶中備用，使用時(shí)將這三種溶液等量配成試劑A，放入棕色滴瓶中備用。0.3％H2O2B，裝入棕色滴瓶中備用。AB各一滴，3-5min后置于顯微鏡下觀看。被染色后呈紅色的花粉粒，則表示有過氧化物酶存在，花粉有生活力；能發(fā)芽，如呈黃色或無色，則表示無生活力。635100?；ǚ郏y(tǒng)計(jì)每種測定方法中具有生活力花粉的百分率，將觀看結(jié)果記入下表。玻片 視野1視野2視野3視野4視野5花粉?；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿０l(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽數(shù)發(fā)芽率發(fā)芽率發(fā)芽率發(fā)芽率發(fā)芽率花粉?；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿；ǚ哿Ｎ?、實(shí)訓(xùn)作業(yè)五、實(shí)訓(xùn)作業(yè)1．分別計(jì)算出蔗糖瓊脂培育法和染色法所測