病毒診防治的學(xué)習(xí)課件

病毒診防治的學(xué)習(xí)課件第1頁(yè)/共17頁(yè)

第一節(jié)病毒感染的檢測(cè)

virologicaldiagnosis

一、標(biāo)本的采取、送檢與處理

基本與細(xì)菌同，只是標(biāo)本可加“雙抗”處理另外就是低溫送檢；血清最好是早晚期雙份

二、病毒的分離培養(yǎng)與鑒定一）病毒的分離培養(yǎng)：需提供活細(xì)胞第2頁(yè)/共17頁(yè)提供活細(xì)胞的三種方式:（一）動(dòng)物接種（animalinoculation）（二）雞胚培養(yǎng)

（embryonatedeggs）

絨毛尿囊膜接種

尿囊腔接種羊膜腔接種

卵黃囊接種第3頁(yè)/共17頁(yè)第4頁(yè)/共17頁(yè)（三）細(xì)胞培養(yǎng)（tissueculture）#原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)#二倍體細(xì)胞株#傳代細(xì)胞系大多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而成。如HEP-2、HeLa和KB細(xì)胞。病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的檢測(cè)指標(biāo)*細(xì)胞變化：CPE、包涵體(inclusionbody)形成、紅細(xì)胞吸附等第5頁(yè)/共17頁(yè)細(xì)胞病變(Cytopathiceffect,CPE)正常細(xì)胞病變細(xì)胞病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)細(xì)胞團(tuán)縮、裂解、腫脹、變圓細(xì)胞融合或聚集成葡萄串樣等第6頁(yè)/共17頁(yè)第7頁(yè)/共17頁(yè)組織培養(yǎng)瓶與pH變化*細(xì)胞代謝的改變:第8頁(yè)/共17頁(yè)*細(xì)胞代謝的改變:pH值*干擾現(xiàn)象：*免疫熒光法檢測(cè)二）病毒數(shù)量與感染性的測(cè)定*空斑測(cè)定：PFU

感染性病毒量：以PFU/ml表示*TCID50或ID50的測(cè)定：*紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)：*MOI測(cè)定：第9頁(yè)/共17頁(yè)三）新分離病毒的鑒定1、核酸類型的測(cè)定2、理化性狀的檢測(cè)3、形態(tài)學(xué)觀察4、血清學(xué)鑒定5、基因測(cè)序和生物對(duì)比（sequencingandblast）:

這是最特異和重要的方法第10頁(yè)/共17頁(yè)三、病毒感染的血清學(xué)診斷1、中和試驗(yàn)（neutralizationtest）2、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（complementfixationtest）3、血凝抑制試驗(yàn)（hemagglutinationinhibitiontest）4、凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)第11頁(yè)/共17頁(yè)四、病毒感染的快速診斷

1.形態(tài)學(xué)檢查：EM或IEM，≥107/ml

2.病毒蛋白抗原檢查：IF，RIA，EIA

3.特異性IgM抗體的檢查：

4.檢測(cè)病毒核酸：PCR或LCR第12頁(yè)/共17頁(yè)

第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防

preventionagainstviralinfection一、人工主動(dòng)免疫(activeimmunization) 主要是疫苗（vaccine）一代：死疫苗、減毒活疫苗、新型活疫苗二代：亞單位疫苗（基因工程、合成）三代：DNA疫苗

其他：轉(zhuǎn)基因植物、治療性疫苗等第13頁(yè)/共17頁(yè)二、人工被動(dòng)免疫(passiveimmunization)1.免疫球蛋白(gammaglobulin)血清/胎盤，HBIg

2.干擾素、淋巴因子等細(xì)胞免疫制劑

第14頁(yè)/共17頁(yè)國(guó)家免疫規(guī)劃疫苗:2008年2月乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫苗、麻疹疫苗、白破疫苗（以前）甲肝疫苗、流腦疫苗、乙腦疫苗、麻風(fēng)腮疫苗（08）重點(diǎn)人群和地區(qū)：出血熱疫苗、炭疽疫苗、鉤體疫苗預(yù)防的傳染病15種:乙肝、結(jié)核、脊灰、百日咳、白喉、破傷風(fēng)、麻疹、甲肝、流腦、乙腦、風(fēng)疹、腮腺炎、出血熱、炭疽、鉤體第15頁(yè)/共17頁(yè)第三節(jié)病毒感染的治療

therapyforviralinfection一、化學(xué)制劑：始于1959年1.核苷類：阿昔洛韋、拉米呋定、病毒唑（利巴