大鼠常規(guī)操作技術(shù)

大鼠常規(guī)操作技術(shù)孫泉首都醫(yī)科大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物辦公室）sunquan@1大鼠常規(guī)操作技術(shù)第1頁(yè)1.了解動(dòng)物試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)和意義2.了解試驗(yàn)動(dòng)物選擇和染毒路徑。3.掌握大鼠試驗(yàn)基本操作技術(shù)。一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)：2大鼠常規(guī)操作技術(shù)第2頁(yè)3大鼠常規(guī)操作技術(shù)第3頁(yè)1.試驗(yàn)動(dòng)物選擇2.試驗(yàn)動(dòng)物抓取和固定3.性別判定4.試驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)標(biāo)識(shí)5.試驗(yàn)動(dòng)物給藥路徑和方法（灌胃、腹腔、皮下注射、尾靜脈注射）6.生物標(biāo)本采集（鼠尾取血、心臟采血、眼眶取血）7.試驗(yàn)動(dòng)物處死二.試驗(yàn)內(nèi)容：4大鼠常規(guī)操作技術(shù)第4頁(yè)試驗(yàn)流程5大鼠的觀察、抓取與固定性別的判定、稱(chēng)重、標(biāo)記編號(hào)及分組大鼠灌胃操作（重點(diǎn)）大鼠腹腔注射、尾靜脈注、皮下注射大鼠眼眶后靜脈叢取血與斷尾取血，以及大鼠的處死大鼠常規(guī)操作技術(shù)第5頁(yè)動(dòng)物物種選擇基本標(biāo)準(zhǔn)：

動(dòng)物選擇6大鼠常規(guī)操作技術(shù)第6頁(yè)健康動(dòng)物首先看外觀：體形豐滿(mǎn)，被毛濃密有光澤、緊貼體表，眼睛明亮，反應(yīng)行動(dòng)靈活。有沒(méi)有顯著疾病癥狀體重、年紀(jì)外觀觀察7大鼠常規(guī)操作技術(shù)第7頁(yè)動(dòng)物抓取和固定單手固定雙手固定固定器固定板注意抓取動(dòng)物手法抓取固定時(shí)力量大小適宜8大鼠常規(guī)操作技術(shù)第8頁(yè)未成熟鼠生殖器發(fā)育不顯著，肛門(mén)與生殖器之間距離來(lái)區(qū)分。遠(yuǎn)——♂、近——♀。成年鼠：雄性臥位可見(jiàn)睪丸，雌性可見(jiàn)腹部有12個(gè)乳頭。性別判定9大鼠常規(guī)操作技術(shù)第9頁(yè)慣用標(biāo)識(shí)，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）先左后右，先上后下動(dòng)物編號(hào)標(biāo)識(shí)10大鼠常規(guī)操作技術(shù)第10頁(yè)穿耳孔法左耳代表十位，右耳代表個(gè)位應(yīng)注意預(yù)防孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部11大鼠常規(guī)操作技術(shù)第11頁(yè)標(biāo)準(zhǔn)：同一試驗(yàn)中，試驗(yàn)動(dòng)物年紀(jì)盡可能一致，試驗(yàn)動(dòng)物體重大致相近；同組、同性別動(dòng)物體重差異應(yīng)小于平均體重10%；不一樣組間同性別動(dòng)物體重均值差異小于5%；♀♂動(dòng)物各半，且♀♂試驗(yàn)結(jié)果分開(kāi)統(tǒng)計(jì)、分析。稱(chēng)重編號(hào)隨機(jī)分組

試驗(yàn)動(dòng)物分組12大鼠常規(guī)操作技術(shù)第12頁(yè)經(jīng)口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等）經(jīng)呼吸道染毒（靜式、動(dòng)式和氣管內(nèi)注入）經(jīng)皮膚染毒注射染毒（皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔和鼠尾靜脈注射等）其它（直腸內(nèi)、鼻腔等）試驗(yàn)動(dòng)物染毒路徑和方法13大鼠常規(guī)操作技術(shù)第13頁(yè)灌胃抓取老鼠時(shí)應(yīng)是鼠

成豎直線(xiàn)灌胃成功時(shí)，所遇阻力較小灌胃時(shí)注意胃容量0.1ml/10g-0.3ml/10g

，＜1mL14大鼠常規(guī)操作技術(shù)第14頁(yè)腹下1/3外側(cè)，防止損傷實(shí)質(zhì)器官30-45°角刺入扎入時(shí)有“落空感”，回抽無(wú)尿液或血液腹腔注射15大鼠常規(guī)操作技術(shù)第15頁(yè)酒精擦拭尾部左手食指，拇指配合按住尾端右手持注射器，針尖輕輕抬起與血管平行刺入血管由紅變白，按壓止血尾靜脈注射16大鼠常規(guī)操作技術(shù)第16頁(yè)俯臥固定，左手拇指和食指捏住頸背部皮膚提起，右手持針沿縱軸方向刺入皮下，進(jìn)針時(shí)感覺(jué)有阻力，繼續(xù)刺入，突然阻力消失，活動(dòng)針頭，確認(rèn)刺入皮下即可注射藥液。

皮下注射17大鼠常規(guī)操作技術(shù)第17頁(yè)俯臥保定，與皮膚平行刺入捏住皮膚，注射部位局部形成皮丘。為防止藥液流出，停留片刻，再將針頭撥出

皮內(nèi)注射

18大鼠常規(guī)操作技術(shù)第18頁(yè)血液采集（斷尾采血、眼眶采血、心臟采血等）尿液采集糞便采集生物標(biāo)本采集19大鼠常規(guī)操作技術(shù)第19頁(yè)固定→用手輕揉鼠尾→靜脈充血后剪尾尖（1-2mm）→用手從尾根向尾尖推擠→采血→干棉止血。每次0.1mL尾尖靜脈采血法20大鼠常規(guī)操作技術(shù)第20頁(yè)左手固定動(dòng)物→滴少許10%可卡因于動(dòng)物眼內(nèi)→右手持消毒過(guò)毛細(xì)吸管→以抗凝劑濕潤(rùn)內(nèi)壁→眼瞼和眼球間旋轉(zhuǎn)刺入→采血后消毒紗布止血30秒。每次0.2-0.3mL眼眶后靜脈叢采血21大鼠常規(guī)操作技術(shù)第21頁(yè)動(dòng)物仰臥→固定器固定→剪左側(cè)心區(qū)毛→皮膚消毒→小號(hào)針頭注射器在3-4肋間刺入?？蛇_(dá)0.5mL心臟采血法22大鼠常規(guī)操作技術(shù)第22頁(yè)脊椎脫臼法：用左手按住動(dòng)物頭部于試驗(yàn)臺(tái)上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、略向上使勁拉，使動(dòng)物頸椎以致脊椎脫臼死亡。過(guò)量麻醉法動(dòng)物處死23大鼠常規(guī)操作技術(shù)第23頁(yè)將動(dòng)物固定于解剖臺(tái)上，從恥骨聯(lián)合至下頜沿正中線(xiàn)切開(kāi)皮膚，再?gòu)膼u骨聯(lián)合至肋骨下緣沿腹正中線(xiàn)切開(kāi)腹壁肌肉（不要用力過(guò)猛，以免切破腹腔臟器，尤其是膀胱）。從肋骨下端向脊柱方向，將兩側(cè)腹壁剪開(kāi)，方便觀察腹腔內(nèi)臟器。應(yīng)注意不可將腹腔內(nèi)臟器翻亂，應(yīng)有次序地檢驗(yàn)。臟器標(biāo)本采集24大鼠常規(guī)操作技術(shù)第24頁(yè)25大鼠常規(guī)操作技術(shù)第25頁(yè)26大鼠常規(guī)操作技術(shù)第26頁(yè)27大鼠常規(guī)操作技術(shù)第27頁(yè)28大鼠常規(guī)操作技術(shù)第28頁(yè)抓取稱(chēng)重給藥采血麻醉解剖大鼠常規(guī)操作技術(shù)第29頁(yè)1.抓取與操作動(dòng)物時(shí)小心不要被咬傷，假如被咬傷需馬上用清水沖洗并用碘酒消毒。2.抓取動(dòng)物時(shí)用