大鼠常規(guī)操作技術

大鼠常規(guī)操作技術孫泉首都醫(yī)科大學試驗動物辦公室）sunquan@1大鼠常規(guī)操作技術第1頁1.了解動物試驗目標和意義2.了解試驗動物選擇和染毒路徑。3.掌握大鼠試驗基本操作技術。一、試驗目標：2大鼠常規(guī)操作技術第2頁3大鼠常規(guī)操作技術第3頁1.試驗動物選擇2.試驗動物抓取和固定3.性別判定4.試驗動物編號標識5.試驗動物給藥路徑和方法（灌胃、腹腔、皮下注射、尾靜脈注射）6.生物標本采集（鼠尾取血、心臟采血、眼眶取血）7.試驗動物處死二.試驗內(nèi)容：4大鼠常規(guī)操作技術第4頁試驗流程5大鼠的觀察、抓取與固定性別的判定、稱重、標記編號及分組大鼠灌胃操作（重點）大鼠腹腔注射、尾靜脈注、皮下注射大鼠眼眶后靜脈叢取血與斷尾取血，以及大鼠的處死大鼠常規(guī)操作技術第5頁動物物種選擇基本標準：

動物選擇6大鼠常規(guī)操作技術第6頁健康動物首先看外觀：體形豐滿，被毛濃密有光澤、緊貼體表，眼睛明亮，反應行動靈活。有沒有顯著疾病癥狀體重、年紀外觀觀察7大鼠常規(guī)操作技術第7頁動物抓取和固定單手固定雙手固定固定器固定板注意抓取動物手法抓取固定時力量大小適宜8大鼠常規(guī)操作技術第8頁未成熟鼠生殖器發(fā)育不顯著，肛門與生殖器之間距離來區(qū)分。遠——♂、近——♀。成年鼠：雄性臥位可見睪丸，雌性可見腹部有12個乳頭。性別判定9大鼠常規(guī)操作技術第9頁慣用標識，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）先左后右，先上后下動物編號標識10大鼠常規(guī)操作技術第10頁穿耳孔法左耳代表十位，右耳代表個位應注意預防孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部11大鼠常規(guī)操作技術第11頁標準：同一試驗中，試驗動物年紀盡可能一致，試驗動物體重大致相近；同組、同性別動物體重差異應小于平均體重10%；不一樣組間同性別動物體重均值差異小于5%；♀♂動物各半，且♀♂試驗結果分開統(tǒng)計、分析。稱重編號隨機分組

試驗動物分組12大鼠常規(guī)操作技術第12頁經(jīng)口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等）經(jīng)呼吸道染毒（靜式、動式和氣管內(nèi)注入）經(jīng)皮膚染毒注射染毒（皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔和鼠尾靜脈注射等）其它（直腸內(nèi)、鼻腔等）試驗動物染毒路徑和方法13大鼠常規(guī)操作技術第13頁灌胃抓取老鼠時應是鼠

成豎直線灌胃成功時，所遇阻力較小灌胃時注意胃容量0.1ml/10g-0.3ml/10g

，＜1mL14大鼠常規(guī)操作技術第14頁腹下1/3外側，防止損傷實質(zhì)器官30-45°角刺入扎入時有“落空感”，回抽無尿液或血液腹腔注射15大鼠常規(guī)操作技術第15頁酒精擦拭尾部左手食指，拇指配合按住尾端右手持注射器，針尖輕輕抬起與血管平行刺入血管由紅變白，按壓止血尾靜脈注射16大鼠常規(guī)操作技術第16頁俯臥固定，左手拇指和食指捏住頸背部皮膚提起，右手持針沿縱軸方向刺入皮下，進針時感覺有阻力，繼續(xù)刺入，突然阻力消失，活動針頭，確認刺入皮下即可注射藥液。

皮下注射17大鼠常規(guī)操作技術第17頁俯臥保定，與皮膚平行刺入捏住皮膚，注射部位局部形成皮丘。為防止藥液流出，停留片刻，再將針頭撥出

皮內(nèi)注射

18大鼠常規(guī)操作技術第18頁血液采集（斷尾采血、眼眶采血、心臟采血等）尿液采集糞便采集生物標本采集19大鼠常規(guī)操作技術第19頁固定→用手輕揉鼠尾→靜脈充血后剪尾尖（1-2mm）→用手從尾根向尾尖推擠→采血→干棉止血。每次0.1mL尾尖靜脈采血法20大鼠常規(guī)操作技術第20頁左手固定動物→滴少許10%可卡因于動物眼內(nèi)→右手持消毒過毛細吸管→以抗凝劑濕潤內(nèi)壁→眼瞼和眼球間旋轉刺入→采血后消毒紗布止血30秒。每次0.2-0.3mL眼眶后靜脈叢采血21大鼠常規(guī)操作技術第21頁動物仰臥→固定器固定→剪左側心區(qū)毛→皮膚消毒→小號針頭注射器在3-4肋間刺入?？蛇_0.5mL心臟采血法22大鼠常規(guī)操作技術第22頁脊椎脫臼法：用左手按住動物頭部于試驗臺上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、略向上使勁拉，使動物頸椎以致脊椎脫臼死亡。過量麻醉法動物處死23大鼠常規(guī)操作技術第23頁將動物固定于解剖臺上，從恥骨聯(lián)合至下頜沿正中線切開皮膚，再從恥骨聯(lián)合至肋骨下緣沿腹正中線切開腹壁肌肉（不要用力過猛，以免切破腹腔臟器，尤其是膀胱）。從肋骨下端向脊柱方向，將兩側腹壁剪開，方便觀察腹腔內(nèi)臟器。應注意不可將腹腔內(nèi)臟器翻亂，應有次序地檢驗。臟器標本采集24大鼠常規(guī)操作技術第24頁25大鼠常規(guī)操作技術第25頁26大鼠常規(guī)操作技術第26頁27大鼠常規(guī)操作技術第27頁28大鼠常規(guī)操作技術第28頁抓取稱重給藥采血麻醉解剖大鼠常規(guī)操作技術第29頁1.抓取與操作動物時小心不要被咬傷，假如被咬傷需馬上用清水沖洗并用碘酒消毒。2.抓取動物時用