氨基乙酰丙酸在祛痘美容方面的應(yīng)用課件

5-氨基乙酰丙酸

在祛痘美容方面的應(yīng)用

5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinicacid，簡稱ALA)，是具有多種生物功能的生物活性劑，在醫(yī)藥上它屬第二代光敏劑，可治療多種不同病因的疾病；在農(nóng)牧業(yè)上它有多種不同的用處，它的應(yīng)用范圍越來越多,倍受人們的重視?，F(xiàn)作如下介紹:

ALA在醫(yī)藥上用作光敏劑，通過光動力療法（PDT）來治療多種不同病因的疾病。光動力療法(PhotodynamicTherapy，PDT)是人們在醫(yī)療實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)的一種新的治療方法，它是通過某些光敏物質(zhì)---通稱光敏劑,在進(jìn)入機(jī)體后，光敏劑在生長旺盛、分裂速度快的異常組織細(xì)胞及某些病菌內(nèi)的聚積濃度遠(yuǎn)大于正常組織細(xì)胞，具有明顯的靶向性。當(dāng)用一定波長的光進(jìn)行照射時，光敏劑會在生物組織內(nèi)發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性的單態(tài)氧和其他自由基，從而引起細(xì)胞膜、細(xì)胞核和線粒體的損傷，使細(xì)胞壞死、凋亡，而達(dá)到治療疾病的目的。這種治療方法有兩大特點(diǎn):一是在正確的使用方法下,能把病變細(xì)胞和致病菌殺死，而正常組織細(xì)胞幾乎不受損傷,對皮膚和粘膜部位的疾病在治愈后不留下疤痕；它的另一特點(diǎn)是同一個藥物能治療多種不同病因的疾病,如5－氨基乙酰丙酸，外用它能夠治療多種皮膚癌、痤瘡、扁平疣、鮮紅斑痣、銀屑病、尖銳濕疣、老年性黃斑變性、痔瘡、膀胱癌、子宮內(nèi)膜移位、宮頸糜爛、口腔粘膜疣狀增生及某些難以治療的皮膚病毒感染等；在美容方面可用于光子嫩膚、光子美白和祛皺祛斑；口服可治療乳腺癌、上消化道癌、直腸癌、腦膠質(zhì)瘤、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及防止血管形成術(shù)后的再度狹窄。一.ALA生物功能及特性:

ALA是一個具有多種生物活性功能的物質(zhì)，它在人、植物、動物和微生物等多種生物體的生命活動中所不可缺少的物質(zhì)。ALA在上述生物體內(nèi)所起的作用，可以通過下圖來表達(dá)：二．ALA-PDT治療痤瘡的作用機(jī)理:1．痤瘡的病因及目前常規(guī)的治療方法:痤瘡的病因主要有以下三個方面：（1）

皮脂腺功能亢進(jìn)。皮脂腺的發(fā)育和分泌受雄激素的支配，青春期時雄激素分泌旺盛使皮脂腺增大，引起皮脂分泌增多。另外，飲食不當(dāng)也可促進(jìn)皮脂腺異常分泌。（2）

毛囊皮脂腺導(dǎo)管角化過度，皮脂分泌排泄不暢。痤瘡患者的毛囊上角化異常，上皮細(xì)胞不能正常脫落，使毛囊口變小，皮脂堵塞在毛囊內(nèi)，淤積在毛囊口，形成粉刺。（3）微生物的異常生長。皮脂分泌旺盛，如果排泄不通暢，造就了病菌生長繁殖環(huán)境，滋生丙酸桿菌屬痤瘡菌（以下簡稱痤瘡桿菌）、葡萄球菌、毛囊蟲（俗稱“螨蟲”）等痤瘡的病原微生物。毛囊內(nèi)的微生物及其代謝產(chǎn)物都可引起炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致紅腫化膿等現(xiàn)象。針對痤瘡的病因，常規(guī)的治療方法是：（1）內(nèi)服或外用抗生素以殺滅致病菌：如四環(huán)素、美滿霉素、強(qiáng)力霉素、紅霉素等，因痤瘡桿菌對抗生素產(chǎn)生耐藥性，其治療效果越來越不令人滿意。（2）異維A酸（isotretinoin）：異維A酸對皮脂腺的分泌和痤瘡桿菌有較強(qiáng)的抑制作用。但服藥后可出現(xiàn)口唇干燥、皮膚脫屑、脫發(fā)、血脂升高等副反應(yīng)。本藥有致畸作用，不適于育齡期（3）皮質(zhì)類固醇激素：如曲安西龍混懸液、潑尼龍男女服用。混懸液，也可用長效皮質(zhì)激素制劑。激素類藥物雖然有很強(qiáng)的抑制炎癥反應(yīng)的作用，但副作用亦較多。（4）內(nèi)分泌療法：皮脂腺的發(fā)育受雄激素支配，因此具有拮抗雄性激素作用的藥物對痤瘡具有治療作用。但該療法可引起內(nèi)分泌的紊亂，因此一般不主張使用。（5）物理治療：液氮冷凍噴霧法或點(diǎn)涂，適用于結(jié)節(jié)性或囊腫性痤瘡，但易留下疤痕。（6）中醫(yī)治療：中醫(yī)稱本病為“肺風(fēng)粉刺”，治則宜宣肺清熱，可內(nèi)服枇杷清肺飲（黨參、枇杷葉、黃連、桑白皮、黃柏、甘草），外用顛倒散（大黃、硫磺），但作用緩慢，效果不理想。2．ALA－PDT法治療痤瘡的作用機(jī)理國內(nèi)外學(xué)者對ALA－PDT法治療尋常痤瘡的作用機(jī)理進(jìn)行了系統(tǒng)深入的研究，針對尋常痤瘡的發(fā)病原因，本療法通過抑制皮脂腺過度分泌、抑制毛囊口上皮角化亢進(jìn)、打通堵塞的毛囊孔和殺死毛囊內(nèi)的致病菌等而取得顯著的療效?，F(xiàn)綜述如下：（1）ALA—PDT對毛囊皮脂腺分泌有明顯的抑制作用另據(jù)MeeSookJun等人報道，ALA在人的離體毛囊皮脂腺單位中引起的原卟啉IX主要表達(dá)在皮脂細(xì)胞內(nèi)。從頭皮移植術(shù)病人取得有毛的頭皮部位樣本，顯微解剖后將所有細(xì)胞培養(yǎng)，各種細(xì)胞的PpIX含量按每μg細(xì)胞蛋白質(zhì)中含PpIX的量進(jìn)行計算，用分光光度計測定并與PpIX的標(biāo)準(zhǔn)曲線作比較；用Bio-Rad蛋白質(zhì)測定法測定細(xì)胞蛋白質(zhì)含量。結(jié)果：所得細(xì)胞PpIX含量(Fig.1A)在真皮乳頭細(xì)胞、表皮角化細(xì)胞、外根鞘細(xì)胞、纖維原細(xì)胞、皮脂細(xì)胞中依次遞增，平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為219±22.6＜422±88.6＜457±31.2＜570±15.8＜679±29.7(ng/μg蛋白質(zhì))。在受試細(xì)胞中,皮脂細(xì)胞中的PpIX含量最高，是真皮乳頭細(xì)胞的三倍多。但表皮角化細(xì)胞和外根鞘毛囊角化細(xì)胞之間沒有明顯差別。Fig.1人體毛囊皮脂腺細(xì)胞中ALA引起的細(xì)胞PpIX含量（A）和皮脂細(xì)胞中PpIX在細(xì)胞內(nèi)的位置（B-D）（A）全部細(xì)胞用100μg/mlALA處理48小時，細(xì)胞PpIX含量以PpIX/μg細(xì)胞蛋白質(zhì)的ng來表示。Sebocyte皮脂細(xì)胞;ORS外根鞘細(xì)胞；DP真皮乳頭細(xì)胞；EK表皮角化細(xì)胞；FB纖維原細(xì)胞。（B-D）(B)對照皮脂細(xì)胞；(C)用50μg/mlALA處理48小時的皮脂細(xì)胞；(D)次級培養(yǎng)的皮脂細(xì)胞。Fig.2PpIX在離體人毛囊皮脂單位中的位置。（A）對照樣本；（B）用1mg/mlALA培養(yǎng)6小時；（C）6小時ALA培養(yǎng)后再在沒有ALA的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時；（D）6小時ALA培養(yǎng)后再在沒有ALA的培養(yǎng)基中培養(yǎng)48小時；（E）用1mg/mlALA培養(yǎng)24h（F）H&E染色；（G）Ki-67增殖測定。（a，a-1）表皮角化細(xì)胞；（b，b-1）皮脂腺；（c，c-1）毛外根鞘角化細(xì)胞；（d，d-1）在毛球中的真皮乳頭T和基質(zhì)細(xì)胞；（e）真皮纖維原細(xì)胞。在（G）上的綠點(diǎn)標(biāo)記（白色箭頭）表示增生擴(kuò)散細(xì)胞。本研究證明，人的離體毛囊皮脂腺細(xì)胞用ALA處理后，產(chǎn)生明顯的原卟啉IX，皮脂腺周圍區(qū)域PpIX的表達(dá)最明顯，親脂性的PpIX容易在皮脂腺中油脂充足的環(huán)境中聚積。該實(shí)驗(yàn)證實(shí)局部用ALA會導(dǎo)致PpIX在皮脂腺中優(yōu)先聚積，當(dāng)光照時就會產(chǎn)生光動力效應(yīng)損傷皮脂細(xì)胞減少皮脂分泌。(2).對毛囊皮脂腺過度角質(zhì)化的作用：毛囊皮脂腺過度角質(zhì)化、皮脂分泌旺盛及痤瘡桿菌的侵害是尋常痤瘡的主要發(fā)病機(jī)理。我們給家兔耳外涂抹煤焦油，使其毛孔擴(kuò)張、毛囊口部位角化過度、皮損略突于皮面，似痤瘡樣。病理檢查可見角質(zhì)層增厚，呈明顯角化過度及角化不全，皮脂腺毛囊口部位有由皮脂、角化細(xì)胞及角化不全細(xì)胞組成的栓塞物。以此為動物痤瘡模型，進(jìn)行ALA-PDT治療試驗(yàn)。由于局部用ALA后，皮膚角化細(xì)胞及皮脂腺吸收了外源性ALA，在體內(nèi)產(chǎn)生原卟啉IX，經(jīng)波長為632nm、劑量為150J/c㎡的光照，皮膚角化細(xì)胞及皮脂細(xì)胞被滅活。病理切片可見，表皮增厚明顯減輕，毛囊口堵塞程度減輕，其內(nèi)角化物質(zhì)減少，部分已接近正常組織。按組織學(xué)判定級別標(biāo)準(zhǔn)，屬0-1級；ALA-PDT法優(yōu)于陽性對照藥克林霉素甲硝唑搽劑的療效。與對照組相比，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）Fig3.從P.痤瘡菌中萃取的卟啉的HPLC（上圖），和用含100μg/mlALA培養(yǎng)的培養(yǎng)物中萃取的卟啉的HPLC（下圖）。生長時間對卟啉量增加的作用如Fig4所示。加入ALA（100μg/ml）促進(jìn)了卟啉的增加。有ALA存在時產(chǎn)生的糞卟啉的量明顯提高。試驗(yàn)開始時從“起始平皿”中轉(zhuǎn)移來的肉湯培養(yǎng)基的細(xì)胞懸液中測得卟啉量幾乎是零。Fig4.不同生長階段的P.痤瘡菌的培養(yǎng)物的糞卟啉熒光強(qiáng)度。在液體培養(yǎng)基中有（▲）或沒有（■）ALA（100μg/ml）時生長24，48，72，96小時。提取每一培養(yǎng)時間的樣品進(jìn)行HPLC分析。記錄相同數(shù)量細(xì)胞提取物中糞卟啉的熒光強(qiáng)度。

痤瘡桿菌在厭氧性液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時(A)為沒有照射的對照培養(yǎng)菌存活率。(B)為用75J/cm的藍(lán)光照射一次，細(xì)菌的成活數(shù)減少一個或兩個數(shù)量級。（C）為連續(xù)照射2次，每次間隔時間24小時（在生長24和48小時時照射）培養(yǎng)物成活量減少四個數(shù)量級。（D）為24，48，72小時照三次減少五個數(shù)量級。(E)為生長48小時并且被照射一次的培養(yǎng)菌，成活率幾乎減少兩個數(shù)量級Fig5.用強(qiáng)藍(lán)光照射后，幸存的P.痤瘡菌。在厭氧的液體培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物。用407－420nm的藍(lán)光在75J/cm2的光劑量下照射.X射線微量分析結(jié)合掃描電子顯微鏡法細(xì)胞元素分析顯示：在含ALA（100μg/ml）的培養(yǎng)基中培育24小時的痤瘡菌培養(yǎng)物用100J/cm2光照，發(fā)現(xiàn)鉀元素?fù)p失90％。（Fig7上圖）。用同樣濃度的ALA培養(yǎng)72小時的菌并且用75J/cm2照射，同樣的，鉀元素?fù)p失（96％），磷含量也減少40％（Fig7下圖）。用ALA培育的痤瘡桿菌敏化后，經(jīng)光照產(chǎn)生的光動力反應(yīng)引起細(xì)菌細(xì)胞鉀、磷流失可能與細(xì)胞膜損傷有關(guān)。

Fig7.用ALA處理過的P.痤瘡菌的X-射線的元素圖。痤瘡菌用ALA（100μg/ml）培養(yǎng)24小時（上圖）或72小時（下圖）。培養(yǎng)基用藍(lán)光照射，照射劑量分別為100J/cm2或75J/cm2。用ALA培養(yǎng)但沒有照射的培養(yǎng)物作對照。

通過傳輸電子顯微鏡方法觀測，證明了內(nèi)源性卟啉光敏過程的殺菌作用。用ALA（100μg/ml）培養(yǎng)24小時并用407-420nm100J/cm2藍(lán)光照射，痤瘡桿菌的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。細(xì)胞中部低密度區(qū)的出現(xiàn)能夠說明細(xì)胞內(nèi)成分的泄漏（Fig8B,C）。觀測到已處理過的細(xì)胞的不對稱的分割（Fig8D）。常發(fā)現(xiàn)未分開的伸長的細(xì)胞連接到另一個沒有分開的子細(xì)胞上（Fig8B,C）。根據(jù)已處理過的細(xì)菌結(jié)構(gòu)變更的結(jié)果，揭示，細(xì)胞溶解酶的作用導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞死亡。Fig8藍(lán)色光照射對P.痤瘡菌的超微結(jié)構(gòu)的作用。用ALA（100μg/ml）培養(yǎng)24小時并且用407－420nm100J/cm2照射劑量的強(qiáng)藍(lán)光照射（B，C，D）。箭頭指向：不對稱分隔（AS），拉長細(xì)胞（EL）或者滲漏（L）。培養(yǎng)24小時后未經(jīng)照射的完整細(xì)胞作對照（A）。

2011年10北京軍區(qū)總醫(yī)院發(fā)表了“三種光療法治療尋常性痤瘡療效觀察”，光動力療法(PDT)，強(qiáng)脈沖光(IPL)和紅藍(lán)光(LED)治療中、重度尋常性痤瘡的療效對比：將90例中、重度痤瘡患者隨機(jī)分為三組：PDT治療組，IPL治療組和LED紅藍(lán)光治療組分別于治療前、治療中期(治療1個月)和末次治療結(jié)束后評價療效結(jié)果：治療中期評價時，PDT、IPL、LED治療組總有效率分別為93.3％、60.0％和36.7％，平均皮損減少率分別為90.4％、69.0％和39.8％。要達(dá)到炎癥性皮損痊愈，PDT組平均需要(3±1.52)個治療周期，IPL組(6±2.15)個治療周期，LED組(9±3.34)個治療周期。結(jié)論：光療法治療中、重度痤瘡療效顯著，PDT組療法效果優(yōu)于IPL和LED組，副作用少，有很好應(yīng)用前景，而長期療效有待進(jìn)一步觀察。ALA-PDT能針對毛囊皮脂腺的過度分泌、毛囊口角質(zhì)形成細(xì)胞的過度角化、皮脂腺開口的阻塞、痤瘡桿菌等致病菌的感染等，痤瘡的這三大病因，能夠同時給予有效的治療,是能取得顯著療效的主要原因。也是與其他治療方法所不同之處。三．ALA-PDT治療痤瘡的操作要點(diǎn)：

用ALA-PDT治治療痤瘡，給藥濃度、封包時間、光照劑量是三個關(guān)鍵問題，控制得恰當(dāng)效果就好。1.涂藥后的起時光照時間（即封包時間）因ALA本身不具有光敏活性,外用除了要有一個吸收過程外,還要在生物體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂泄饷艋钚缘倪策惢衔?所以需要一定的時間。我們Ⅰ期臨床進(jìn)行了不同藥物濃度涂藥后熒光強(qiáng)度的達(dá)峰時間的實(shí)驗(yàn)，如下圖：

不同給藥濃度病灶部位熒光Meandensity-Time曲線圖

2．光照劑量的選擇當(dāng)給藥量足夠時，照射的總劑量少，不能使已生成的原卟啉Ⅸ完全發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生的細(xì)胞毒性物少，療效差，當(dāng)劑量過大時產(chǎn)生的副作用大，一般認(rèn)為30—60J/cm2為宜。因照射時患者會有灼熱、剌痛感，光劑量可由小漸大，使其漸漸適應(yīng)。但設(shè)定好的總照射劑量不應(yīng)變。光照劑量的測定有一定的難處，因?yàn)楣夤β视嫓y定的數(shù)值跟光的波長、光的照射距離有很大關(guān)聯(lián)，治療儀上標(biāo)示的輸出功率跟病灶實(shí)際得到的照射功率誤差較大，各臨床文獻(xiàn)報導(dǎo)的光劑量從30-127J/cm2差矩很大，很值得探索。四．ALA-PDT治療中重度痤瘡的操作方法：

1.

治療前的注意事項(xiàng)：要詳細(xì)了解病情：治療前給患者建立護(hù)理病歷，了解患者的年齡、職業(yè)、與發(fā)病有關(guān)的因素，包括飲食習(xí)慣、睡眠質(zhì)量、既往史、使用過何種藥物及化妝品、月經(jīng)史、妊娠史，口服避孕藥患者及系統(tǒng)應(yīng)用糖皮質(zhì)激素患者等。應(yīng)特別注意是否有光動力療法的禁忌者：光敏性濕疹、卟啉癥、自身免疫性疾病、白化病等。前4周內(nèi)服或外用抗生素、維A酸制劑等增加光敏感性藥物者。2.操作方法:患者用清水清潔面部(痂皮較多者可先用植物油清洗面部,用溫水洗凈后),ALA乳液涂于皮損部位,不要超出病灶外10mm,用保鮮膜包裹封包，防止藥物揮發(fā)。封包后,于無強(qiáng)光的室內(nèi)或戴避光面膜(或面罩)避光0.5-2.0h左右后，用棉棒擦掉未吸收的藥物,給患者戴上護(hù)目鏡后(操作者戴上深色墨鏡),用波長630nm左右的LED紅光照射。照射的總能量密度為30至40J/C㎡左右。也可隨治療次數(shù)的能量密度依次遞增，可分別30J/cm2、40J/cm2、50J/cm2等不同的照射劑量。10天左右或兩周治療1次。光照結(jié)束后，患者照射部位出現(xiàn)不同程度的紅斑、腫脹等急性炎癥反應(yīng)，要給予30min左右的冷噴（冷敷）護(hù)理，使癥狀緩解。隨后要24h避強(qiáng)光，治療期間盡量不要使用化妝品。當(dāng)起始光照劑量患者也不能承受時，要再次降低照射劑量，用延長照射時間的辦法來達(dá)到照射總能量。照射時要調(diào)整治療儀，使治療儀發(fā)出的光斑完全覆蓋整個面部，發(fā)光板距面部10--12cm左右為好。在整個光照過程中，務(wù)必保持病灶部位在照射范圍內(nèi)，告知光照時會有灼熱、疼痛、腫脹、收縮等情況屬于正常?？刹扇∠鄳?yīng)措施減輕患者不適感：①．漸進(jìn)性適應(yīng)：，增大光照距離，可先將治療儀的發(fā)光板拉遠(yuǎn)如至15-20cm，待患者適應(yīng)后，再緩慢移近，最后至最佳光照距離10cm至12cm以確保治療效果。②．暫停設(shè)備發(fā)光進(jìn)程，待患者癥狀緩解后再繼續(xù)治療。③．每位患者的自身感受不同，且個體差異性大，護(hù)士可進(jìn)行一定的心理安慰，消除患者的恐懼心理。④．部分患者對光特別敏感，需時刻觀察患者面部的反應(yīng)，癥狀較重者，可遵醫(yī)囑適當(dāng)縮短光照時間，能量減半，并根據(jù)患者個體差異制定相應(yīng)光照時間。3．治療后護(hù)理：（1）一般護(hù)理經(jīng)紅光照射患者，因