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文檔簡介
藥物血漿半衰期測定實驗第1頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日【目的】學習藥物血漿半衰期測定方法。
【藥品】
10%水楊酸鈉,10%三氯醋酸4ml,0.5%肝素生理鹽水,10%三氯化鐵
【動物】
家兔第2頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日【原理】血中藥物濃度隨時間推移呈規(guī)律性(一級動力學消除)下降。
第3頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日【方法、步驟】1.取3支離心管標記1、2、3,加入10%三氯醋酸4ml;取9支試管標記:A1,A2,A3B1,B2,B3C1,C2,C3備用。2.取家兔一只,稱重,麻醉(20%烏拉坦5ml/kg,2/3iv,1/3ip)第4頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日向心端頭端動脈夾3.分離頸總動脈,頭端用線結(jié)扎,心端用動脈夾夾閉。第5頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日向心端離心端動脈夾4.動脈插管,備取血用。5.肝素化:0.5%肝素生理鹽水2ml/只,IV。第6頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日6.取血:開啟動脈夾取血約1~1.5ml,放入A1號試管,再從A1號試管準確吸取1ml移入1號離心管,充分搖勻,以沉淀血漿蛋白。
7.給藥:10%水楊酸鈉2ml/kg,IV。每次移入離心管的血量務(wù)必準確開啟動脈夾取血時,不要將動脈夾抽離動脈第7頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日8.取血:在給藥后20分鐘和40分鐘時,開啟動脈夾取血約1~1.5ml20分鐘→A2→準確取1ml→2號離心管40分鐘→A3→準確取1ml→3號離心管。每次取血前應(yīng)先將動脈插管內(nèi)殘余血放掉!移入離心管的血液搖勻或攪拌均勻,以充分沉淀血漿蛋白第8頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日
9.離心:3000rpm,3分鐘。
漫漫傾倒上清液入對應(yīng)編號的B1、B2、B3號試管中。
從B組管精確吸取上清液3ml→C組管
A1→B1→C1
A2→B2→C2
A3→B3→C3
10.顯色:各管加入10%三氯化鐵(FeCl3)0.5ml,顯色。第9頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日比色杯必須配套,擦干凈;721分光光度計調(diào)零點時至少三次后再測;清洗比色杯后用衛(wèi)生紙單向擦拭透光面,
11.比色、測光密度值:以C1號管為對照管,用721分光光度計在520nm波長下讀取C2、C3號管的光密度值。第10頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日12.計算:
OD1和OD2分別為2、3號管的光密度值。
第11頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日
公式推導第12頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日第13頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日時間時間零級一級零級一級對數(shù)濃度濃度第14頁,共15頁,2023年,2月20日,星期日血1~1.5ml三氯醋酸4ml離心(3000rpm.3min)傾入吸取上清液3ml三氯化鐵0.5mlA1號試管B1號試管C1號試管1號
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