人類染色體技術(shù)

人類染色體技術(shù)第1頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日遺傳病基因病(genicdisease）染色體?。╟hromosomaldisease）單基因病（monogenicdisease）多基因?。╬olygenicdisease）常染色體病性染色體病體細(xì)胞遺傳病線粒體遺傳病第2頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日前言

染色體（chromosome）

是遺傳物質(zhì)(基因)的載體。它由DNA和蛋白質(zhì)等構(gòu)成，具有儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息的作用。

染色質(zhì)和染色體實(shí)質(zhì)上是同一物質(zhì)在不同細(xì)胞周期、執(zhí)行不同生理功能時(shí)不同的存在形式。第3頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日染色質(zhì)（chromatin）定義：間期細(xì)胞核中伸展開的DNA蛋白質(zhì)纖維。分類：常染色質(zhì)（euchromatin）異染色質(zhì)（heterochromatin）

第4頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日常染色質(zhì)與異染色質(zhì)的特性比較

特征常染色質(zhì)異染色質(zhì)數(shù)量和分布一般占染色體的極大部分一般占染色體的少部分,位于著絲粒區(qū)、端粒、核仁形成區(qū)，染色體的中間、末端及整個(gè)染色體臂染色反應(yīng)正常染色反應(yīng)特有染色反應(yīng)DNA復(fù)制正常復(fù)制晚復(fù)制凝縮程度折疊疏松折疊緊密固縮行為間期解螺旋，分裂時(shí)形成螺旋，分裂中期達(dá)到高峰異固縮（正、負(fù)異固縮）組成特性含單一和重復(fù)序列，能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)含重復(fù)和非重復(fù)DNA，不能轉(zhuǎn)錄；功能異染色質(zhì)含有活動(dòng)基因，有轉(zhuǎn)錄活性化學(xué)性質(zhì)無差別無差別第5頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第6頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第7頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日人類染色體的數(shù)目和形態(tài)結(jié)構(gòu)相對(duì)恒定。通過核型分析可以鑒定細(xì)胞中的染色體數(shù)，染色質(zhì)檢查可以確定性染色體情況，顯帶技術(shù)可以鑒別每條染色體的結(jié)構(gòu)。如果因?yàn)槟撤N原因造成染色體的數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常，則會(huì)引起個(gè)體一系列性狀的改變，形成染色體病。染色體異常的種類不同，導(dǎo)致幾種不同類型的染色體病。第8頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第一節(jié)人類染色體

一、染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)在細(xì)胞增殖周期中不斷發(fā)生著變化，一般在有絲分裂中期，染色體的形態(tài)最典型、最清晰。第9頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第10頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日著絲粒位于異染色質(zhì)區(qū)內(nèi)，這里富集了衛(wèi)星DNA，也就是短的DNA串聯(lián)重復(fù)序列。此外，在縊痕區(qū)內(nèi)有一個(gè)直徑或長(zhǎng)度為400nm左右的很致密的顆粒狀結(jié)構(gòu)，這稱為動(dòng)粒(kinetochore)的結(jié)構(gòu)直接與牽動(dòng)染色體向兩極移動(dòng)的纖絲蛋白相連結(jié)。若著絲粒丟失了，那么染色體就失去了附著到紡錘絲上的能力，細(xì)胞分裂時(shí)染色體就會(huì)隨機(jī)地進(jìn)入子細(xì)胞。然而有著絲粒的染色體也會(huì)出現(xiàn)這種異常分配，那就是復(fù)制后的兩個(gè)染色體拷貝并不總是正確地分離進(jìn)入子細(xì)胞。在此過程中發(fā)生錯(cuò)誤的概率通常是很低的。若發(fā)生錯(cuò)誤會(huì)引起染色體數(shù)目的改變。如在酵母中分配發(fā)生錯(cuò)誤的概率低于十萬分之一。第11頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日動(dòng)原粒第12頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日端粒（Telomere）：是染色體的末端部分，有重要的生物學(xué)功能,可穩(wěn)定染色體的功能,防止染色體DNA降解、末端融合,保護(hù)染色體結(jié)構(gòu)基因,調(diào)節(jié)正常細(xì)胞生長(zhǎng)。人端粒是由6個(gè)堿基重復(fù)序列(TTAGGG)和結(jié)合蛋白組成。1984年，分子生物學(xué)家發(fā)現(xiàn)了一種能維持端粒長(zhǎng)度的端粒酶，并揭示了它在人體內(nèi)的奇特作用：除了人類生殖細(xì)胞和部分體細(xì)胞外，端粒酶幾乎對(duì)其他所有細(xì)胞不起作用，但它卻能維持癌細(xì)胞端粒的長(zhǎng)度，使其無限制擴(kuò)增。第13頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日染色體的四種類型：1/2~5/8中央著絲粒染色體5/8~7/8亞中著絲粒染色體7/8近端著絲粒染色體中部亞中部近端部端部

——末端處第14頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第15頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日

細(xì)

胞

培

養(yǎng)

與

染

色

體

制

備

正常人外周血或細(xì)胞

RPMI1640培養(yǎng)基+15%小牛血清=5ml370C，培養(yǎng)68hr加秋水仙素，培養(yǎng)2~4hr（抑制細(xì)胞分裂）收集細(xì)胞離心，去上清液（1000rpm/10min）低滲處理，0.075MKCI，370C，25min

預(yù)固定，甲醇：冰醋酸=3：1

離心，去上清液（1000rpm/10min）重復(fù)固定三次制片，染色，觀察，染色體分析第16頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第17頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日chr.groups:A:1~3B:4,5C:6~12,XD:13~15E:16~18F:19,20G:21,22,Y第18頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日正常人類染色體核型核型：一個(gè)體細(xì)胞（somaticcell）中的全部染色體稱為核型（Karyotype）。確切的說核型是指是一個(gè)體細(xì)胞內(nèi)的全部染色體按其大小和形態(tài)特征排列所構(gòu)成的圖像。對(duì)這種圖像進(jìn)行分析稱為核型分析。

第19頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日第20頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日核型的描述

染色體總數(shù)，性染色體

正常男性46

，XY

正常女性46