藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座專家講座

第十章甾體激素類藥品分析藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第1頁基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷駢多氫菲ABCD12345678910111213141516171819藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第2頁分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第3頁腎上腺皮質(zhì)激素氫化可松藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第4頁腎上腺皮質(zhì)激素醋酸地塞米松藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第5頁雄性激素丙酸睪酮藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第6頁蛋白同化激素苯丙酸諾龍藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第7頁孕激素黃體酮藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第8頁雌激素炔雌醇藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第9頁一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17

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α–醇酮基還原性藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第10頁2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17–

β–羥基可成酯藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第11頁3.孕激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化納反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第12頁4.雌激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17–羥基可成酯藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第13頁二、判別試驗(yàn)（一）與強(qiáng)酸呈色反應(yīng)甾體激素類藥品呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第14頁(二)官能團(tuán)反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥品呈色四氮唑鹽OHˉ1C17

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α–醇酮基還原性A.呈色反應(yīng)藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第15頁腎上腺皮質(zhì)激素藥品Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅B.沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第16頁甾酮類激素藥品呈色羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃慣用羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第17頁異煙腙（黃色）睪酮藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第18頁黃體酮異煙雙腙（黃色）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第19頁含有甲酮基或活潑亞甲基甾體激素類藥品呈色亞硝基鐵氰化納間二硝基酚芳香醛3.甲酮基藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第20頁黃體酮藍(lán)紫色亞硝基鐵氰化納其它甾體淡橙色不顯色藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第21頁黃體酮藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第22頁藍(lán)紫色藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第23頁有機(jī)氟Fˉ有機(jī)破壞有機(jī)氯Clˉ4.有機(jī)鹵素茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第24頁茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色F-藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第25頁雌激素類藥品紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第26頁含炔基甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基↓藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第27頁炔雌醇白藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第28頁△KOH(三)制備衍生物測(cè)定m.p.藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第29頁△△藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第30頁（四）水解產(chǎn)物反應(yīng)藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第31頁藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第32頁△４-3-酮240nm苯環(huán)280nm（五）UV法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第33頁3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（六）IR法3750～3300cm-1ν藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第34頁醋酸可松結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第35頁結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC17–乙炔基炔諾酮藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第36頁結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第37頁（七）TLC法

主要用于甾體激素類藥品制劑判別

方法：對(duì)照品法要求供試品溶液所顯主斑點(diǎn)顏色和位置與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)相同。藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第38頁（八）HPLC法

主要用于甾體激素類藥品制劑判別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）

方法：對(duì)照品法要求在含量測(cè)定項(xiàng)下統(tǒng)計(jì)色譜圖中，供試品峰tR與對(duì)照品峰tR一致。藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第39頁三、雜質(zhì)檢驗(yàn)（一）其它甾體定義與標(biāo)示藥品結(jié)構(gòu)不一樣甾體化合物都稱為“其它甾體”藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第40頁Li/NH3C2H5OH弱酸雌二醇－3－甲醚苯丙酸諾龍合成路線III藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第41頁強(qiáng)酸苯丙酰氯HClIII藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第42頁

特點(diǎn)（1）可能存在多個(gè)甾體雜質(zhì)（2）結(jié)構(gòu)類似2.起源原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第43頁4.方法（含有一定分離能力）

TLC法（高低濃度對(duì)比法）

HPLC法（類似高低濃度對(duì)比法）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第44頁（1）TLC法（高低濃度對(duì)比法）判定方法：要求雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)目要求雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第45頁特點(diǎn)：（1）簡(jiǎn)便易行，不需特殊儀器；（2）不需對(duì)照品；（3）只能控制單個(gè)雜質(zhì)限量；（4）要求雜質(zhì)與主成份顯色靈敏度靠近。藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第46頁（2）HPLC法（高低濃度對(duì)比法）判定方法：要求雜質(zhì)峰數(shù)目要求雜質(zhì)峰面積藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第47頁（二）游離磷酸地塞米松磷酸鈉氫化可松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉對(duì)照品法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第48頁原理：方法：藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第49頁（對(duì)照液

0.0035%KH2PO4）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第50頁（三）甲醇和丙酮（靈敏度法）甲醇不得出峰檢測(cè)限=3.1ng丙酮≤5.0%

內(nèi)標(biāo)法+校正因子GC法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第51頁炔雌醇藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第52頁（四）雌酮原理Zimmermann反應(yīng)堿性KOH乙醇高純度藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第53頁硒四、起源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫原理方法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第54頁四、含量測(cè)定（一）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)280nm（±）雌激素藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第55頁（二）反應(yīng)分光光度法1.適合用于非分光光度活性藥品2.使待測(cè)組分光譜位移，防止干擾3.增加測(cè)定靈敏度4.增加選擇性弱、非分光光度活性藥品強(qiáng)分光光度活性藥品化學(xué)反應(yīng)藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第56頁

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強(qiáng)還原性1.原理OH-[還原]四氮唑比色法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第57頁[O]OH-分子重排藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第58頁藍(lán)四氮唑（BT）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第59頁雙甲瓚（暗藍(lán)）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第60頁2.方法ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT對(duì)照品法40～45′暗藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第61頁3.討論（1）基團(tuán)對(duì)反應(yīng)速度影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16不論何種取代基ν↓藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第62頁（2）溶劑、水分影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反應(yīng)—無醛無水乙醇醛→A↑—無水乙醇藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第63頁（3）O2與光線影響反應(yīng)過程反應(yīng)產(chǎn)物怕光→避光、快速O2影響顏色強(qiáng)度和穩(wěn)定性→隔絕空氣、快速、充N2藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第64頁（4）堿種類及加入次序反應(yīng)應(yīng)在強(qiáng)堿性（pH13.75）條件下進(jìn)行以氫氧化四甲基銨結(jié)果最正確加入次序：藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第65頁（5）溫度與時(shí)間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1h藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第66頁4.特點(diǎn)：缺點(diǎn)影響原因太多優(yōu)點(diǎn)測(cè)定結(jié)果能指示藥品穩(wěn)定性（氧化及降解產(chǎn)物無此反應(yīng)）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第67頁腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（縮合）異煙肼比色法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第68頁異煙腙（黃色）藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第69頁2.方法暗45′對(duì)照品法藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第70頁3.討論反應(yīng)速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第71頁（2）溶劑選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇藥物分析甾體激素類藥物的分析專業(yè)知識(shí)講座第72頁（3）水分、O2與光線影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓