南醫(yī)大藥物分析喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析

練習(xí)與思考鹽酸氯丙嗪片的含量測定：取本品（標(biāo)示量為25mg/片）10片，去糖衣后精密稱定，重0.5130g，研細(xì)，稱取片粉0.0206g，置100mL量瓶中，加鹽酸溶液（9-1000）70mL，振搖使鹽酸氯丙嗪溶解，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置100mL量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，于254nm波長處測定吸光度為0.453，按百分吸收系數(shù)E=915計(jì)算每片的含量。目前一頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)藥物分析第十二章喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析目前二頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)教學(xué)目的與要求

掌握喹啉與青蒿素類抗瘧疾藥物的鑒別試驗(yàn)和含量測定方法。掌握喹啉與青蒿素類抗瘧疾藥物的基本結(jié)構(gòu)和主要性質(zhì)。了解喹啉與青蒿素類抗瘧疾藥物的雜質(zhì)檢查要求。目前三頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)第一節(jié):喹啉類藥物結(jié)構(gòu)特征喹啉類藥物吡啶苯環(huán)稠和而成目前四頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)典型藥物pKa8.8,可與強(qiáng)酸成鹽pKa4.2,不與硫酸成鹽目前五頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)目前六頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)典型藥物目前七頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)典型藥物目前八頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)典型藥物目前九頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)典型藥物磷酸咯萘啶目前十頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)典型藥物目前十一頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)主要性質(zhì)堿性含有N原子,一般都有堿性旋光性含有手性原子,一般都有旋光性熒光特性具有平面共軛結(jié)構(gòu),一般具有熒光紫外吸收光譜特性吡啶與苯環(huán)具有共軛結(jié)構(gòu),也有紫外吸收光譜特性目前十二頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)目前十三頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)1.堿性

奎寧、奎尼?。憾幔蛩幔ㄠ藟A含脂環(huán)氮，堿性強(qiáng)）奎寧(左旋體)：pKb1為5.07pKb2為9.7，飽和水溶液pH為8.8，易溶于氯仿－無水乙醇(2:1)

奎尼丁(右旋體)：pKb1為5.4 pKb2為10，易溶于沸水或乙醇喹核堿上的N原子具有堿性，與強(qiáng)酸成鹽主要化學(xué)性質(zhì)目前十四頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)主要化學(xué)性質(zhì)目前十五頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)主要化學(xué)性質(zhì)3.熒光特性硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光。4.紫外吸收光譜特征含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系目前十六頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)目前十七頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)二、鑒別反應(yīng)Identification（一）、綠奎寧反應(yīng)（Thalleioquin）

含氧喹啉衍生物的特征反應(yīng)，奎寧和奎尼丁鑒別二醌基亞胺的胺鹽（綠色）

取其水溶液加溴試液2～3滴和氨試液1ml，即顯翠綠色；加酸至中性顯藍(lán)色；

酸性則呈紫紅色；翠綠色可轉(zhuǎn)溶于醇、氯仿中不溶于醚。目前十八頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)奎尼丁目前十九頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)二、鑒別試驗(yàn)（二）、光譜特征UV－磷酸氯喹：取本品，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含10μg的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，在222，257，329nm與343nm的波長處有最大吸收。

熒光光譜FLD－硫酸奎寧：取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍(lán)色熒光。IR紅外光譜也可以應(yīng)用于鑒別目前二十頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)二、鑒別試驗(yàn)（三）基于無機(jī)酸鹽的鑒別硫酸鹽加BaCl2生成白色沉淀不溶于鹽酸和稀硝酸加醋酸鉛生成白色沉淀溶于醋酸銨或NaOH加HCl不產(chǎn)生沉淀（區(qū)別于硫代硫酸鹽）目前二十一頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)二、鑒別試驗(yàn)（三）基于無機(jī)酸鹽的鑒別氯化物加稀硝酸和硝酸銀生成白色凝乳狀沉淀加銨試液溶解,加硝酸再沉淀加二氧化錳產(chǎn)生氯氣使KI試紙遇淀粉變藍(lán)目前二十二頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)二、鑒別試驗(yàn)（三）基于無機(jī)酸鹽的鑒別磷酸鹽反應(yīng)加硝酸銀生成淺黃色沉淀在銨試液或稀硝酸中均易溶解加氯化銨鎂生成白色結(jié)晶性沉淀加鉬酸銨試液與硝酸后,加熱生成黃色沉淀在銨試液中溶解目前二十三頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)三、純度檢查一、硫酸奎寧奎寧從金雞納樹皮中提取，提取分離過程中可能帶入其他金雞納堿雜質(zhì)。臨床上使用的藥物為硫酸奎寧片和二鹽酸奎寧注射劑。

硫酸鹽難溶于水二鹽酸鹽水溶性好目前二十四頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)三、純度檢查一、硫酸奎寧1.酸度－酸性雜質(zhì)

取本品0.2g，加水20ml溶解后，測定pH值應(yīng)為5.7～6.6。2.氯仿－乙醇不溶物

取本品2g，加氯仿－無水乙醇(2:1)的混合液15ml，在50℃加熱10min后，用稱定重量的垂熔坩堝濾過，濾渣用上述混合液分5次洗滌，每次10ml，在105℃干燥至恒重，遺留殘?jiān)坏眠^2mg。3.其他金雞納堿(TLC、HPLC)主成分自身對照法或?qū)φ掌穼φ辗?，?guī)定限度為0.5%

目前二十五頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)垂熔坩堝垂熔坩堝也叫砂芯坩堝，是一種坩堝式濾器，用玻璃粉壓制成砂芯濾板，適用定量分析對實(shí)驗(yàn)物可作過濾，干燥，稱量的聯(lián)合操作。

造型為一只上口大下口小無底的錐形杯，在杯內(nèi)的下截部位焊有一片砂芯片，或稱為濾片，代替濾紙作過濾溶液用，濾片孔徑有粗細(xì)之分，1號(hào)最粗，6號(hào)最細(xì)，除砂芯濾片粗細(xì)區(qū)分之外，還有容量大小之分。由于它的底是平的，適合對過濾后滯留在砂芯片上的殘?jiān)苯右坪嫦鋬?nèi)干燥，稱量時(shí)也可直接放入天平上稱量。

目前二十六頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)三、純度檢查1.酸度

取本品1.0g，加水25ml溶解，測定pH值應(yīng)大于2.4。2.水中不溶物

取本品加水溶解后，稍放置即有黃色不溶物產(chǎn)生,影響品質(zhì).3.氯化物系生產(chǎn)工藝帶入.檢查時(shí)為了避免溶液顏色干擾,先加堿使咯萘啶沉淀析出,過濾后進(jìn)行檢查.

磷酸咯萘啶的純度檢查目前二十七頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)三、純度檢查磷酸咯萘啶的純度檢查紫色目前二十八頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)四含量測定硫酸奎寧含量測定非水溶液滴定法CHPUSPHPLC法體內(nèi)測定注意樣品處理目前二十九頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)四含量測定目前三十頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)含量測定

硫酸奎寧測定目前三十一頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)目前三十二頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)

硫酸奎寧測定目前三十三頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)見示例12-8每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L)相當(dāng)于19.75mg的（C20H24N2O2)·H2SO4·H2O。1mol硫酸奎寧消耗4mol高氯酸。硫酸奎寧片的含量測定P321目前三十四頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)硫酸奎寧片的含量測定目前三十五頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)硫酸奎寧片的含量測定目前三十六頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)USPHPLC法甲磺酸的作用?醋酸的作用?乙二胺的作用?硫酸奎寧片的含量測定目前三十七頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)含量測定Ion-Pair原理測定雜環(huán)類藥物中吡啶類、喹啉類等藥物時(shí)，主要采用烷基磺酸鹽（如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉）或其他鹽類。影響條件：流動(dòng)相一般呈酸性，以利于生物堿的離解；離子對試劑的非極性部分越大，形成的離子對分配系數(shù)越大，保留時(shí)間越長（十二烷基磺酸鈉＞庚烷磺酸鈉＞戊烷磺酸鈉）。目前三十八頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)目前三十九頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)第二節(jié):青蒿素類藥物的分析青蒿素又名黃蒿素,是我國從菊花科植物青蒿中提取分離得到的一個(gè)含過氧基團(tuán)的新型倍半萜內(nèi)酯。青蒿素是一種高效、速效、低毒的新型抗瘧藥。目前四十頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:資料來源于baidu中國抗瘧新藥的研究源于1967年成立的五二三項(xiàng)目，其全稱為中國瘧疾研究協(xié)作項(xiàng)目，成立于1967年的5月23日,因絕密軍事項(xiàng)目,遂設(shè)代號(hào)523。

目前四十一頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:資料來源于baidu歷經(jīng)380多次鼠瘧篩選，1971年10月取得中藥青蒿素篩選的成功。1972年從中藥青蒿中分離得到抗瘧有效單體，命名為青蒿素，對鼠瘧、猴瘧的原蟲抑制率達(dá)到100%。

1973年經(jīng)臨床研究取得與實(shí)驗(yàn)室一致的結(jié)果、抗瘧新藥青蒿素由此誕生。

目前四十二頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:資料來源于baidu1981年10月在北京召開的由世界衛(wèi)生組織主辦的“青蒿素”國際會(huì)議上，中國《青蒿素的化學(xué)研究》的發(fā)言，引起與會(huì)代表極大的興趣，并認(rèn)為“這一新的發(fā)現(xiàn)更重要的意義是在于將為進(jìn)一步設(shè)計(jì)合成新藥指出方向”。

1986年，青蒿素獲得新一類新藥證書，雙氫青蒿素也獲一類新藥證書。這些成果分別獲得國家發(fā)明獎(jiǎng)和全國十大科技成就獎(jiǎng)。

目前四十三頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:資料來源于baidu2011年9月，中國女藥學(xué)家屠呦呦因創(chuàng)制新型抗瘧藥———青蒿素和雙氫青蒿素的貢獻(xiàn)，獲得被譽(yù)為諾貝爾獎(jiǎng)“風(fēng)向標(biāo)”的拉斯克獎(jiǎng)。這是中國生物醫(yī)學(xué)界迄今為止獲得的世界級(jí)最高級(jí)大獎(jiǎng)。

目前四十四頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:資料來源于baidu屠呦呦，女，1930年12月30日生，藥學(xué)家，中國中醫(yī)研究院終身研究員兼首席研究員，青蒿素研究開發(fā)中心主任。1980年聘為碩士生導(dǎo)師，2001年聘為博士生導(dǎo)師。多年從事中藥和中西藥結(jié)合研究，突出貢獻(xiàn)是創(chuàng)制新型抗瘧藥———青蒿素和雙氫青蒿素。目前四十五頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:資料來源于baidu填補(bǔ)了華人十年未獲此獎(jiǎng)的空白，也造就了第一位在中國獨(dú)立完成研究的獲獎(jiǎng)?wù)摺?/p>

目前四十六頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)研究歷史:很遺憾的事情這個(gè)藥物雖然由我國發(fā)現(xiàn),但我國卻沒有取得專利.因此,雖然這個(gè)藥物每年在全球產(chǎn)生巨大的效益,但我國還是處于原料供應(yīng)的地位,而這個(gè)地位還受到嚴(yán)重威脅.遺憾目前四十七頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)目前四十八頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)是青蒿素經(jīng)還原制得，同時(shí)也是青蒿琥酯的體內(nèi)活性代謝物質(zhì)目前四十九頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)是青蒿素的水溶性衍生物目前五十頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)是青蒿素的脂溶性衍生物目前五十一頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物化學(xué)性質(zhì)氧化性過氧橋鍵具有氧化性旋光性手性原子,具有旋光性紫外吸收特性環(huán)狀結(jié)構(gòu)雖然不具有共軛特性,但取代基具有一定吸收特性水解反應(yīng)青蒿素結(jié)構(gòu)中有內(nèi)酯，在堿性條件下水解，其余藥物結(jié)構(gòu)中沒有內(nèi)酯，不發(fā)生水解目前五十二頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的鑒別試驗(yàn)呈色反應(yīng)過氧橋鍵具有氧化性酸性條件下能將碘離子氧化成碘與淀粉指示液顯藍(lán)紫色目前五十三頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的鑒別試驗(yàn)羥肟酸鐵反應(yīng)含內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件下與羥胺反應(yīng)生成羥肟酸。在稀酸溶液中與高鐵離子呈色顯紫色例：青蒿素、青蒿琥酯目前五十四頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的鑒別試驗(yàn)香草醛-硫酸反應(yīng)使分子中的羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移，雙分子縮合反應(yīng)生成其軛系統(tǒng)，在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色ChP青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加三氯甲烷1mL溶解后，取3~4滴置白瓷板上，等三氯甲烷揮發(fā)后，加2%香草醛硫酸溶液1滴，顯紅色。目前五十五頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的鑒別試驗(yàn)吸收光譜特征紅外，與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照紫外，取代基末端吸收以資鑒別目前五十六頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的鑒別試驗(yàn)色譜法HPLC法保留時(shí)間定性目前五十七頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的鑒別試驗(yàn)純度檢查HPLC法TLC法青蒿素是以天然藥材分離提取為主，藥品中通常存在結(jié)構(gòu)類似的有關(guān)物質(zhì)目前五十八頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的含量測定HPLC法目前五十九頁\總數(shù)六十五頁\編于十四點(diǎn)青蒿素類藥物的體內(nèi)藥物分析HPLC/M