![第一章紫外可見分光光法_第1頁](http://file4.renrendoc.com/view/d66306021e47027286e93b532c6ed927/d66306021e47027286e93b532c6ed9271.gif)
![第一章紫外可見分光光法_第2頁](http://file4.renrendoc.com/view/d66306021e47027286e93b532c6ed927/d66306021e47027286e93b532c6ed9272.gif)
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![第一章紫外可見分光光法_第4頁](http://file4.renrendoc.com/view/d66306021e47027286e93b532c6ed927/d66306021e47027286e93b532c6ed9274.gif)
![第一章紫外可見分光光法_第5頁](http://file4.renrendoc.com/view/d66306021e47027286e93b532c6ed927/d66306021e47027286e93b532c6ed9275.gif)
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根據(jù)物質(zhì)發(fā)射的電磁波或物質(zhì)與電磁波的相互作用建立起來的分析方法統(tǒng)稱為光學(xué)分析法優(yōu)點(diǎn):靈敏度高、選擇性好、用途廣;一般光學(xué)分析方法:折光、旋光、濁度法、圓二色譜法
光譜法:紫外可見、紅外、熒光、原子吸收、核磁共振目前一頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)第一章紫外-可見分光光度法
ultraviolet-visiblespectrophotometry目前二頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)遠(yuǎn)紫外(真空紫外)(10-200nm)*近紫外(200-400nm)*可見光(400-760nm)目前三頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)紫外-可見分光光度法根據(jù)物質(zhì)分子中價(jià)電子對(duì)波長(zhǎng)為200~760nm的電磁輻射的吸收特性建立起來的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法。屬于電子光譜。特點(diǎn):規(guī)律性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、靈敏度高。10-6~10-4g/ml,部分可達(dá)10-7g/ml應(yīng)用:①定性②定量③推斷結(jié)構(gòu)目前四頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)一紫外-可見分光光度法的基本原理和概念二紫外-可見分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)三應(yīng)用實(shí)例目前五頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)§1.紫外-可見分光光度法的基本原理和概念一、分子吸收光譜電子躍遷類型二、紫外-可見吸收光譜中的常用術(shù)語
三、吸收光譜
四、Lambert-Beer定律五、偏離L-B定律的因素目前六頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)分子吸收光譜的形成過程:運(yùn)動(dòng)的分子外層電子--------吸收外來輻射------產(chǎn)生電子能級(jí)躍遷-----分子吸收光譜。能級(jí)組成:除了電子能級(jí)(Electronenergylevel)的躍遷外,分子吸收能量將伴隨著分子的振動(dòng)(Vibration)和轉(zhuǎn)動(dòng)(Rotation)能級(jí)的躍遷!分子的能量變化E為各種形式能量變化的總和:目前七頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)不同物質(zhì)將選擇性地吸收不同波長(zhǎng)或能量的外來輻射,這是UV-Vis定性分析的基礎(chǔ)。定性分析具體做法根據(jù)吸收曲線的特性(峰強(qiáng)度、位置及數(shù)目等)研究分子結(jié)構(gòu)。目前八頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)分子中的價(jià)電子:電子、電子和n電子軌道:幾率分布成鍵軌道、;反鍵軌道*、*非鍵軌道n
當(dāng)兩個(gè)原子靠近結(jié)合成分子時(shí),兩個(gè)原子的原子軌道以線性組合而生成的兩個(gè)分子軌道。紫外-可見吸收光譜就是分子中的價(jià)電子在不同的分子軌道之間躍遷而產(chǎn)生的一、分子吸收光譜的電子躍遷類型目前九頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)各軌道能級(jí)高低順序:n**;H2的成鍵和反鍵軌道在紫外-可見光區(qū)范圍內(nèi),有機(jī)化合物的吸收光譜主要有-*;n-*;-*;n-*及電荷遷移躍遷產(chǎn)生;*>n*>*>n*目前十頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)*躍遷:分子中的成鍵電子躍遷到*反鍵軌道上去,這是一切飽和有機(jī)化合物都可能產(chǎn)生的電子躍遷類型。n*躍遷:分子中未成鍵的n電子激發(fā)到*軌道上去,所有含有雜原子(O、N、S、P、鹵素等)的飽和烴衍生物都可發(fā)生這種躍遷。含有*、n*躍遷的化合物,如:飽和烷烴、鹵代烷烴、醇、醚等是紫外可見吸收光譜測(cè)定時(shí)的良好溶劑。電子躍遷類型目前十一頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)
*躍遷:可以發(fā)生在任何具有不飽和鍵的有機(jī)化合物分子中,其最大摩爾吸光系數(shù)max很大。n*躍遷:發(fā)生在含有雜原子(O、N、S、P、鹵素等)的不飽和化合物中,其最大摩爾吸光系數(shù)max比較小。目前十二頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)二、常用術(shù)語*生色團(tuán):分子中可以吸收光子產(chǎn)生電子躍遷的基團(tuán)。含有鍵的不飽和基團(tuán)*助色團(tuán):有些基團(tuán)本身沒有生色作用,但卻能增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力,即它們與生色團(tuán)相連時(shí),會(huì)使其吸收帶最大吸收波長(zhǎng)發(fā)生紅移,并且增加其強(qiáng)度。通常是帶有非鍵電子對(duì)的雜原子的飽和基團(tuán),如-OH、-NH2、-OR、-SH、-SR、-Cl、-Br、-I等。*紅移和紫移:吸收帶的最大吸收波長(zhǎng)發(fā)生移動(dòng),向長(zhǎng)波方向移動(dòng)稱為紅移,向短波方向移動(dòng)稱為紫移。目前十三頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)
用不同波長(zhǎng)的光依次透過待測(cè)物質(zhì),并測(cè)量物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收程度(吸光度A或透光率T),以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),吸收強(qiáng)度參數(shù)為縱坐標(biāo)作圖,就可以得到該物質(zhì)在測(cè)量波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收曲線。這種曲線體現(xiàn)了物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收能力,也稱為吸收光譜。三、吸收光譜只有具備共軛基團(tuán)的物質(zhì)才能在紫外-可見區(qū)產(chǎn)生吸收,但是吸收曲線并不反映非共軛部分的結(jié)構(gòu)。目前十四頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)吸收峰:曲線上吸光度最大的地方,它對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)稱最大吸收波長(zhǎng)(max)吸收谷:峰與峰之間吸光度最小的部位,該處的波長(zhǎng)稱最小吸收波長(zhǎng)(min)肩峰:在一個(gè)吸收峰旁邊產(chǎn)生的一個(gè)曲折末端吸收:只在圖譜短波端呈現(xiàn)強(qiáng)吸收而不成峰形的部分吸收曲線的形狀,最大吸收波長(zhǎng)max的位置及吸收強(qiáng)度與分子的結(jié)構(gòu)有關(guān),可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。目前十五頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)**五、朗伯—比爾定律
光吸收的基本定律和定量測(cè)定的依據(jù)。**物理意義:當(dāng)一束平行單色光垂直通過某一均勻非散射的吸光物質(zhì)時(shí),其吸光度A與吸光物質(zhì)的濃度c及吸收層厚度b成正比.用數(shù)學(xué)表達(dá)式為:
A=lgI0/I=-lgT=ECl目前十六頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)吸光系數(shù)(E):物理意義:吸光物質(zhì)在單位濃度及單位厚度時(shí)的A。在一定條件下(單色光、溶劑和溫度等),E是物質(zhì)的特性常數(shù),表明物質(zhì)對(duì)某一波長(zhǎng)光的吸收能力。不同物質(zhì)對(duì)同一波長(zhǎng)的單色光可有不同的E。E越大,表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)。測(cè)定的靈敏度越高。目前十七頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)E值及單位與c的單位有關(guān)
當(dāng)l以cm,c:g/L,E稱為吸光系數(shù),用a表示,即:A=aclc:mol/L,E稱為摩爾吸光系數(shù),用表示,它比a更為常用,的單位為L(zhǎng)mol-1cm-1,即:A=clc:百分質(zhì)量濃度g/100mL,E稱為比吸光系數(shù)或百分吸光系數(shù),用E1cm1%表示
=0.1M
E1cm1%目前十八頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)例:M(氯霉素)=323.15g/mol,質(zhì)量濃度為
2mg/100ml,l=1cm,T=24.3%,求?
吸光度具有加和性:則A總=Aa+Ab+Ac+…。每個(gè)組分的吸光度由ci和i決定。吸光度的加和性是計(jì)算分光光度法測(cè)定混合組分的依據(jù)。目前十九頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)透光率T與吸光度A的關(guān)系
透光率T描述入射光透過溶液的程度T=I/I0
A=lg(I0/I)=lg(1/T)=-lgT
T=10-A=10-ECl目前二十頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)
樣品吸光度A與c是成正比,A與c的關(guān)系是通過原點(diǎn)的一直線。但事實(shí)上,A與c并不總是成正比,即偏離L-B定律。這種偏離有化學(xué)方面和光學(xué)方面的因素。*六、偏離L-B定律
負(fù)偏離正偏離CA目前二十一頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(一)化學(xué)因素:溶液中溶質(zhì)可因濃度改變而有離解、締合、與溶劑間的相互作用等原因而發(fā)生偏離Beer定律的現(xiàn)象;偏離朗伯-比爾定律的因素目前二十二頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)
1.非單色光
Beer定律的一個(gè)重要前提是入射光是單色光,但事實(shí)上用單色器分離出來的光是具有一定波長(zhǎng)范圍的光。(二)光學(xué)因素目前二十三頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)當(dāng)E1E2時(shí),則吸光度與濃度是非線性的。二者差別越大,則偏離L-B越大;當(dāng)E1>E2,測(cè)得的吸光度比在“單色光”1處測(cè)得的低,產(chǎn)生負(fù)偏離;反之,當(dāng)E1<E2,則產(chǎn)生正偏離。這種影響的程度還與兩種光的強(qiáng)度比和檢測(cè)器對(duì)兩種光靈敏度的差異等因素有關(guān)。所以入射光的譜帶寬度將嚴(yán)重影響物質(zhì)的吸光系數(shù)值和吸收光譜形狀。目前二十四頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)分析譜帶的選擇在所使用的波長(zhǎng)范圍內(nèi),吸光物質(zhì)的吸光系數(shù)變化越大,這種偏離就顯著。所以通常選擇吸光物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)作為分析波長(zhǎng)。這樣不僅能夠保證測(cè)定有較高的靈敏度,而且此處曲線較為平坦,吸光系數(shù)變化不大,對(duì)Beer定律的偏離程度就比較小。目前二十五頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)2.雜散光
從單色器得到的單色光中與所需波長(zhǎng)相隔較遠(yuǎn)的光。3.散射光與反射光使透光強(qiáng)度減弱,吸光度值偏高。4.非平行光使l增大影響測(cè)量值目前二十六頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)由于光源不穩(wěn)定性、讀數(shù)不準(zhǔn)等帶來的誤差。由L-B定律微分后得:微分后除以上式可得:
透射光測(cè)量誤差ΔT是測(cè)量中的隨機(jī)誤差,來自儀器的噪音:1暗噪音:檢測(cè)器與放大電路等各部件不確定性引起。2訊號(hào)噪音:亦稱訊號(hào)散粒噪音電子躍遷的不相等性測(cè)量光強(qiáng)的不確定性
(三)透光率測(cè)量誤差T目前二十七頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)當(dāng)相對(duì)誤差c/c最小時(shí),求得T=0.368或A=0.4343。即當(dāng)A=0.4343時(shí),誤差最?。⊥ǔ?赏ㄟ^調(diào)節(jié)溶液濃度或改變光程l來控制A
的讀數(shù)在0.2~0.7范圍內(nèi)。目前二十八頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)§2.紫外-可見分光光度計(jì)的
基本結(jié)構(gòu)
一、主要部件二、分光光度計(jì)的類型和光學(xué)性能在UV-vis區(qū)可任意選擇不同波長(zhǎng)的光測(cè)定吸光度的儀器目前二十九頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)光源單色器吸收池檢測(cè)器顯示和處理功能:提供能量激發(fā)被測(cè)物質(zhì)分子,使之產(chǎn)生電子光譜譜帶(提供寬帶輻射)。發(fā)射連續(xù)光譜,具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的使用壽命且發(fā)光面較小的光源。連續(xù)光源: 紫外光區(qū)
氘燈、氫燈(氣體放電光源)) 可見光區(qū) 鎢燈、碘鎢燈(熱輻射光源)一、主要部件1.光源目前三十頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)
功能:將光源發(fā)射的復(fù)合光(連續(xù)光譜)按波長(zhǎng)順序色散,并從中分離出一定寬度的譜帶。
①入射狹縫:光源的光由此進(jìn)入單色器;
②準(zhǔn)光裝置:透鏡或反射鏡使入射光成為平行光束;
③色散元件:將復(fù)合光分解成單色光;棱鏡或光柵;
④聚焦裝置:透鏡或凹面反射鏡,將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫;⑤出射狹縫。
狹縫寬度要適當(dāng)。2.單色器目前三十一頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)功能:盛放樣品溶液石英(氧化硅):紫外光區(qū)、可見光區(qū)玻璃池:可見光區(qū)盛空白溶液的吸收池和盛試樣溶液的吸收池也應(yīng)相互匹配,即有相同的厚度和透光性。3.吸收池目前三十二頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)4.檢測(cè)器功能:將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)類型:(1)光電池:硒光電池(可見) 硅光電池(紫外可見)(2)光電管:
紫(藍(lán))敏光電管銫陰極
紅敏光電管銀和氧化銫陰極(3)光電倍增管:放大倍數(shù)106~107。(4)光二極管陣列檢測(cè)器:目前三十三頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)顯示方式:T、AC、E5.顯示系統(tǒng)目前三十四頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)二、紫外-可見分光光度計(jì)的類型
(1)單波長(zhǎng)單光束分光光度計(jì)固定波長(zhǎng),分別測(cè)量樣品、空白對(duì)照的T或A,要求光源和檢測(cè)器供電電壓穩(wěn)定性高缺點(diǎn):受電源波動(dòng)的影響較大,誤差較大。目前三十五頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(2)單波長(zhǎng)雙光束分光光度計(jì)
優(yōu)點(diǎn):消除光源強(qiáng)度不穩(wěn)帶來的影響,操作簡(jiǎn)單,自動(dòng)記錄,快速全波段掃描,不需移動(dòng)吸收池。仍宜用固定波長(zhǎng)測(cè)量方式單色光能在很短的時(shí)間內(nèi)交替通過空白和樣品溶液目前三十六頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(3)雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)通過切光器使兩束不同波長(zhǎng)的光交替通過吸收池,測(cè)得吸光度差A(yù)。試樣溶液濃度與A成正比。優(yōu)點(diǎn):可測(cè)多組份試樣、混濁試樣、而且可作成導(dǎo)數(shù)光譜、不需參比液(消除了由于參比池的不同和制備空白溶液等產(chǎn)生的誤差)、克服了電源不穩(wěn)而產(chǎn)生的誤差,靈敏度高。目前三十七頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)具有快速掃描的特點(diǎn)(4)光多道二極管陣列檢測(cè)分光光度計(jì)可在0.1秒內(nèi)獲得190~820nm范圍的全光光譜。用于追蹤化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究。操作簡(jiǎn)單,只需將樣品放入無蓋開放式樣品室,并點(diǎn)擊“開始”即可。MultiSpec-1500型紫外可見光電二極管陣列分光光度計(jì)目前三十八頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)紫外-可見分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)1、取吸收池時(shí),手拿毛面。盛裝樣品溶液以池體積的4/5為宜。使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋。吸收池每次放入的方向要相同。使用后用溶劑或水沖洗干凈,污染不易洗凈時(shí)可用硫酸-發(fā)煙硝酸(3:1)浸泡。2、含有雜原子的有機(jī)溶劑,通過有很強(qiáng)的末端吸收,用作溶劑時(shí),測(cè)定波長(zhǎng)均不能小于溶劑的截止波長(zhǎng)。3、稀釋時(shí),所取溶液體積不得少于5ml。含量測(cè)定時(shí),常取3份,平行操作。4、除另有規(guī)定外,供試品溶液的吸光度在0.2-0.7之間為宜。5、狹縫寬度的選擇就以減小狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再增加為準(zhǔn)。目前三十九頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)§3.應(yīng)用實(shí)例
吸收光譜比較簡(jiǎn)單,特征性不強(qiáng),并且大多數(shù)簡(jiǎn)單官能團(tuán)在近紫外光區(qū)只有微弱吸收或無吸收,所以應(yīng)用有一定局限性。但可用于鑒定共軛生色團(tuán),以此推斷未知物的結(jié)構(gòu)骨架,在配合其它結(jié)構(gòu)分析方法時(shí),是有用的輔助方法。一、定性鑒別目前四十頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)定性方法對(duì)比法 形狀、峰數(shù)、max位置、強(qiáng)度與相應(yīng)的同一物質(zhì)圖譜相同,但圖譜相同的不一定是同一物質(zhì)1.測(cè)定max與不同波長(zhǎng)處A的比值
2.測(cè)定一定波長(zhǎng)下的E3.對(duì)比不同吸收峰(谷)的A或E的比值可以消除c、l的影響4.對(duì)比吸收光譜的一致性P14目前四十一頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)二、純度檢查雜質(zhì)檢查
化合物無吸收,雜質(zhì)有強(qiáng)吸收,如乙醇中的苯;化合物有吸收,雜質(zhì)可使化合物的吸光系數(shù)增大或減小;雜質(zhì)使吸收光譜變形。目前四十二頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)依據(jù):Lambert-Beer定律,A=Ecl波長(zhǎng):max,提高靈敏度,減少測(cè)量誤差如有幾個(gè)峰,選擇無其他物質(zhì)干擾的較高的吸收峰。一般不選靠近短波末端的吸收峰若溶劑在紫外光區(qū)有吸收峰,組分測(cè)定的波長(zhǎng)必須大于溶劑的截止波長(zhǎng)。**三、單組分的定量方法目前四十三頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(一)標(biāo)準(zhǔn)曲線法(二)對(duì)照法(三)吸光系數(shù)法目前四十四頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(一)標(biāo)準(zhǔn)曲線法
通常采用A—c標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定。A=KcK值不再是物質(zhì)的常數(shù),不能用作定性依據(jù),只是個(gè)別具體條件下的比例常數(shù)。目前四十五頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(二)對(duì)照法在同樣條件下配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液,在選定波長(zhǎng)處分別測(cè)量吸光度,根據(jù)朗伯-比爾定律,可以得出:Eg:可測(cè)定試樣中組分的含量cx弱酸(堿)的離解常數(shù)和配合平衡常數(shù)及配合物組成的測(cè)定。目前四十六頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)(三)吸光系數(shù)法
這種方法也稱絕對(duì)法注意:此法計(jì)算的濃度為百分濃度,即100ml中所含被測(cè)組分的克數(shù),
稀釋倍數(shù)目前四十七頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)百分含量目前四十八頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)例1濃度為25.0μg/50mL的Cu2+溶液,用雙環(huán)已酮草酰二腙分光光度法測(cè)定,于波長(zhǎng)600nm處,用2.0cm比色皿測(cè)得T=50.1%,求吸光系數(shù)a和摩爾吸光系數(shù)。已知M(Cu)=64.0。目前四十九頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)解已知T=0.501,則A=-lgT=0.300,l=2.0cm,
則根據(jù)朗伯—比爾定律
A=αcl,而ε=Mα
=64.0g·mol-1×3.00×10-2L·g-1·cm-1=1.92×104(L·mol-1·cm-1)目前五十頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)例2
精密稱取咖啡酸10.00mg,加少量乙醇溶解,定容至200ml,取此溶液5.00ml,置于50ml容量瓶中,加6mol/LHCl4ml,加水至刻度。取此溶液于1cm吸收池中,在323nm處測(cè)得吸光度為0.463,已知該波長(zhǎng)處咖啡酸的=927.9,求咖啡酸的百分含量。目前五十一頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)99.8%解目前五十二頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)例3精密稱取50.00mg樣品,置于250ml容量瓶中,加入0.02mol/LHCl溶解,稀釋刻度。準(zhǔn)確吸取2ml,稀釋至100ml。以0.02mol/LHCl為空白,在263nm處用1cm吸收池測(cè)得透光率為41.7%,其摩爾吸光系數(shù)為12000,被測(cè)物分子量為100,求263nm處的和樣品的百分含量。目前五十三頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)1200,79.2%解:目前五十四頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)四、多組分的定量方法
要求:
被測(cè)組分彼此不發(fā)生反應(yīng)每組分在某一波長(zhǎng)處范圍內(nèi)符合L-B定律
依據(jù):吸光度的加和性目前五十五頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)三種情況:①x、y兩組分共存,吸收光譜不完全重疊②x、y兩組分共存,吸收光譜部分重疊③x、y兩組分共存,吸收光譜互相重疊目前五十六頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)①若各組分的吸收曲線互不重疊,則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。這本質(zhì)上與單組分測(cè)定沒有區(qū)別。目前五十七頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)②a,b組分有部分重疊根據(jù)吸光度的加合性計(jì)算A1a=E1acal目前五十八頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)③若各組分的吸收曲線互有重疊,則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。當(dāng)l=1目前五十九頁\總數(shù)六十七頁\編于十四點(diǎn)例4有一A和B兩化合物的混合溶液,已知A在282nm和238nm處的分別為720和270。而B在上述兩處波長(zhǎng)處的吸光度相等。
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